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抗猪细环病毒1型Cap蛋白的单克隆抗体制备及鉴定

摘要第1-8页
Abstract第8-14页
英文缩略表第14-15页
第一章 引言第15-21页
   ·病原学第15-17页
     ·分类第15页
     ·形态结构与理化特性第15-16页
     ·细胞嗜性及培养特性第16页
     ·流行病学调查第16-17页
   ·TTV 分子生物学第17-18页
     ·PTTV 基因组特征第17-18页
     ·TTV 编码蛋白特性第18页
   ·PTTV 诊断技术的研究进展第18-20页
     ·病原学诊断方法第18-19页
     ·血清学诊断方法第19-20页
     ·电镜技术第20页
   ·研究目的和意义第20-21页
第二章 PTTV1-Cap 蛋白的原核表达与免疫活性鉴定第21-26页
   ·材料和方法第21-23页
     ·菌株和质粒第21页
     ·主要试剂第21页
     ·主要仪器设备第21页
     ·引物设计第21页
     ·目的基因片段扩增及产物回收纯化第21-22页
     ·原核表达载体的构建及鉴定第22页
     ·目的蛋白的诱导表达及 SDS-PAGE 分析第22页
     ·表达产物存在形式的检测及纯化第22页
     ·表达产物 Western blot 鉴定第22-23页
   ·结果第23-25页
     ·PCR 扩增及重组质粒鉴定第23页
     ·融合蛋白的 SDS-PAGE 检测第23-24页
     ·表达产物的可溶性分析第24页
     ·融合蛋白的鉴定第24-25页
   ·讨论第25-26页
第三章 抗 PTTV1-rCap 蛋白单克隆抗体的制备第26-32页
   ·材料和方法第26-29页
     ·实验动物及试剂第26页
     ·重组 PTTV1-Cap 蛋白表达纯化第26页
     ·单克隆抗体的制备第26-27页
     ·单克隆抗体的鉴定第27-29页
   ·结果第29-30页
     ·单抗亚类的鉴定第29页
     ·单抗效价测定第29-30页
     ·单抗反应特性鉴定第30页
   ·讨论第30-32页
第四章 PTTV1-rCap 蛋白真核表达与单克隆抗体鉴定第32-39页
   ·材料和方法第32-34页
     ·菌株和质粒第32页
     ·主要试剂第32页
     ·主要仪器设备第32页
     ·引物设计第32-33页
     ·目的基因片段扩增第33页
     ·真核表达重组质粒的构建第33页
     ·真核表达重组质粒的鉴定第33页
     ·重组质粒瞬时转染 293 T 细胞第33-34页
     ·IPMA 方法检测重组蛋白表达及单抗鉴定第34页
     ·临床血清样品的 IPMA 检测第34页
   ·结果第34-38页
     ·目的基因的 PCR 扩增第34-35页
     ·重组质粒菌落 PCR 结果第35-36页
     ·重组质粒酶切鉴定第36页
     ·IPMA 鉴定融合蛋白第36页
     ·真核表达的 Cap 蛋白与制备的单抗的反应活性鉴定第36-37页
     ·临床血清样品 IPMA 检测结果第37-38页
   ·讨论第38-39页
第五章 结论第39-40页
参考文献第40-44页
附录第44-45页
致谢第45-46页
作者简介第46页

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