摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-14页 |
英文缩略表 | 第14-15页 |
第一章 引言 | 第15-21页 |
·病原学 | 第15-17页 |
·分类 | 第15页 |
·形态结构与理化特性 | 第15-16页 |
·细胞嗜性及培养特性 | 第16页 |
·流行病学调查 | 第16-17页 |
·TTV 分子生物学 | 第17-18页 |
·PTTV 基因组特征 | 第17-18页 |
·TTV 编码蛋白特性 | 第18页 |
·PTTV 诊断技术的研究进展 | 第18-20页 |
·病原学诊断方法 | 第18-19页 |
·血清学诊断方法 | 第19-20页 |
·电镜技术 | 第20页 |
·研究目的和意义 | 第20-21页 |
第二章 PTTV1-Cap 蛋白的原核表达与免疫活性鉴定 | 第21-26页 |
·材料和方法 | 第21-23页 |
·菌株和质粒 | 第21页 |
·主要试剂 | 第21页 |
·主要仪器设备 | 第21页 |
·引物设计 | 第21页 |
·目的基因片段扩增及产物回收纯化 | 第21-22页 |
·原核表达载体的构建及鉴定 | 第22页 |
·目的蛋白的诱导表达及 SDS-PAGE 分析 | 第22页 |
·表达产物存在形式的检测及纯化 | 第22页 |
·表达产物 Western blot 鉴定 | 第22-23页 |
·结果 | 第23-25页 |
·PCR 扩增及重组质粒鉴定 | 第23页 |
·融合蛋白的 SDS-PAGE 检测 | 第23-24页 |
·表达产物的可溶性分析 | 第24页 |
·融合蛋白的鉴定 | 第24-25页 |
·讨论 | 第25-26页 |
第三章 抗 PTTV1-rCap 蛋白单克隆抗体的制备 | 第26-32页 |
·材料和方法 | 第26-29页 |
·实验动物及试剂 | 第26页 |
·重组 PTTV1-Cap 蛋白表达纯化 | 第26页 |
·单克隆抗体的制备 | 第26-27页 |
·单克隆抗体的鉴定 | 第27-29页 |
·结果 | 第29-30页 |
·单抗亚类的鉴定 | 第29页 |
·单抗效价测定 | 第29-30页 |
·单抗反应特性鉴定 | 第30页 |
·讨论 | 第30-32页 |
第四章 PTTV1-rCap 蛋白真核表达与单克隆抗体鉴定 | 第32-39页 |
·材料和方法 | 第32-34页 |
·菌株和质粒 | 第32页 |
·主要试剂 | 第32页 |
·主要仪器设备 | 第32页 |
·引物设计 | 第32-33页 |
·目的基因片段扩增 | 第33页 |
·真核表达重组质粒的构建 | 第33页 |
·真核表达重组质粒的鉴定 | 第33页 |
·重组质粒瞬时转染 293 T 细胞 | 第33-34页 |
·IPMA 方法检测重组蛋白表达及单抗鉴定 | 第34页 |
·临床血清样品的 IPMA 检测 | 第34页 |
·结果 | 第34-38页 |
·目的基因的 PCR 扩增 | 第34-35页 |
·重组质粒菌落 PCR 结果 | 第35-36页 |
·重组质粒酶切鉴定 | 第36页 |
·IPMA 鉴定融合蛋白 | 第36页 |
·真核表达的 Cap 蛋白与制备的单抗的反应活性鉴定 | 第36-37页 |
·临床血清样品 IPMA 检测结果 | 第37-38页 |
·讨论 | 第38-39页 |
第五章 结论 | 第39-40页 |
参考文献 | 第40-44页 |
附录 | 第44-45页 |
致谢 | 第45-46页 |
作者简介 | 第46页 |