| 第一章 文献综述 | 第1-37页 |
| 1 引言 | 第11页 |
| 2 小鼠胚胎干细胞研究历程 | 第11-13页 |
| ·小鼠ES细胞的研究历程 | 第11-12页 |
| ·小鼠EG细胞的研究历程 | 第12-13页 |
| 3 胚胎干细胞的生物学特性 | 第13-24页 |
| ·自我更新和多能性 | 第13-18页 |
| ·nanog基因与ES的自我更新和全能性的维持 | 第13-14页 |
| ·Oct4与ES细胞自我更新和全能性的维持 | 第14-16页 |
| ·LIF/STAT3路径与ES细胞自我更新和全能性的维持 | 第16页 |
| ·LIF的其他信号路径对ES细胞自我更新和全能性的维持 | 第16-18页 |
| ·BMP4/Smad与ES细胞自我更新和全能性的维持 | 第18页 |
| ·胚胎干细胞的多向分化潜能 | 第18-20页 |
| ·向造血细胞分化 | 第18-19页 |
| ·向心肌细胞分化 | 第19页 |
| ·向神经细胞分化 | 第19页 |
| ·向上皮细胞分化 | 第19-20页 |
| ·胚胎干细胞的永生性 | 第20-21页 |
| ·干细胞和肿瘤细胞 | 第20-21页 |
| ·干细胞与端粒酶 | 第21页 |
| ·干细胞的细胞周期调控 | 第21-24页 |
| ·分化细胞由G1期向S期的转化模式 | 第21-22页 |
| ·分化细胞与ES细胞周期调控的不同 | 第22-23页 |
| ·gp130信号路径与ES细胞周期调控 | 第23-24页 |
| ·P53与ES细胞周期调控 | 第24页 |
| 4 原始生殖细胞的迁移 | 第24-26页 |
| 5 胚胎干细胞的分离培养 | 第26-27页 |
| ·全胚培养 | 第26页 |
| ·分离ICM培养 | 第26-27页 |
| ·分离PGCs培养 | 第27页 |
| 6 胚胎干细胞的培养体系 | 第27-31页 |
| ·饲养层 | 第27-28页 |
| ·培养基 | 第28-29页 |
| ·常用添加成分 | 第29页 |
| ·细胞因子 | 第29-31页 |
| ·干细胞生长因子 | 第29-30页 |
| ·白血病抑制因子 | 第30页 |
| ·碱性成纤维细胞生长因子 | 第30页 |
| ·其他细胞因子 | 第30-31页 |
| 7 胚胎干细胞的鉴定 | 第31-34页 |
| ·形态学鉴定 | 第31页 |
| ·细胞特异性分子的鉴定 | 第31-32页 |
| ·碱性磷酸酶染色 | 第32页 |
| ·发育全能性标志基因的表达 | 第32页 |
| ·端粒酶活性 | 第32-33页 |
| ·核型分析 | 第33页 |
| ·体内分化实验 | 第33页 |
| ·体外分化实验 | 第33-34页 |
| ·嵌合体制备 | 第34页 |
| 8 胚胎干细胞的应用 | 第34-37页 |
| ·克隆动物和转基因动物的生产 | 第34-35页 |
| ·发育生物学研究的体外模型 | 第35页 |
| ·人类疾病研究的动物模型 | 第35页 |
| ·细胞、组织和器官的替代治疗 | 第35-36页 |
| ·药理研究与新药开发 | 第36-37页 |
| 第二章 小鼠胎儿成纤维细胞的分离、培养及饲养层的制作 | 第37-46页 |
| 1 引言 | 第37页 |
| 2 实验材料 | 第37-39页 |
| ·实验动物 | 第37页 |
| ·主要试剂 | 第37-38页 |
| ·主要仪器设备 | 第38页 |
| ·主要溶液配制 | 第38-39页 |
| ·细胞培养液 | 第39页 |
| 3 小鼠胎儿成纤维细胞的分离和培养 | 第39-41页 |
| ·小鼠胎儿的获取 | 第39页 |
| ·小鼠胎儿成纤维细胞的分离和培养 | 第39-40页 |
| ·小鼠胎儿成纤维细胞的传代培养 | 第40页 |
| ·小鼠胎儿成纤维细胞生长曲线的测定 | 第40页 |
| ·细胞冷冻与解冻 | 第40-41页 |
| ·细胞冷冻 | 第40页 |
| ·细胞解冻 | 第40-41页 |
| ·丝裂霉素C对小鼠胎儿成纤维细胞饲养层的影响 | 第41页 |
| ·小鼠胎儿成纤维细胞饲养层的制备 | 第41页 |
| 4 结果 | 第41-43页 |
| ·小鼠胎儿成纤维细胞生长的观察 | 第41-42页 |
| ·小鼠胎儿成纤维细胞生长曲线 | 第42页 |
| ·小鼠胎儿成纤维细胞的冷冻与解冻 | 第42页 |
| ·丝裂霉素C处理对小鼠胎儿成纤维细胞的影响 | 第42-43页 |
| 5 讨论 | 第43-46页 |
| ·小鼠胎儿成纤维细胞的分离与培养 | 第43-44页 |
| ·细胞的冷冻与解冻 | 第44页 |
| ·饲养层的制作 | 第44-46页 |
| 第三章 小鼠胚胎生殖细胞的分离与培养 | 第46-55页 |
| 1 引言 | 第46页 |
| 2 实验材料 | 第46-47页 |
| ·实验动物 | 第46页 |
| ·主要试剂 | 第46页 |
| ·主要仪器设备 | 第46页 |
| ·主要溶液的配制 | 第46-47页 |
| ·细胞培养液 | 第47页 |
| 3 小鼠原始生殖细胞的分离与培养 | 第47-49页 |
| ·小鼠胎儿的获取 | 第47页 |
| ·小鼠胎儿肝细胞的分离与培养及条件培养液的制作 | 第47页 |
| ·小鼠PGCs的分离培养 | 第47-48页 |
| ·小鼠EG细胞的传代培养 | 第48页 |
| ·小鼠EG细胞的鉴定 | 第48-49页 |
| ·形态学鉴定 | 第48页 |
| ·AKP染色 | 第48页 |
| ·体外分化试验 | 第48-49页 |
| 4 结果 | 第49-52页 |
| ·小鼠PGCs的分离、培养与观察 | 第49页 |
| ·不同分离方法对EG细胞分离的影响 | 第49-50页 |
| ·不同传代方法对小鼠EG细胞传代培养的影响 | 第50页 |
| ·不同培养液对小鼠EG细胞培养的影响 | 第50-51页 |
| ·添加17β-雌二醇对小鼠EG细胞分离培养的影响 | 第51页 |
| ·不同性别的胎儿对小鼠EG细胞分离培养的影响 | 第51-52页 |
| ·鉴定 | 第52页 |
| ·碱性磷酸酶染色鉴定结果 | 第52页 |
| ·体外分化实验 | 第52页 |
| 5 讨论 | 第52-55页 |
| ·不同分离和传代方法对小鼠EG细胞传代培养的影响 | 第52-53页 |
| ·培养液对小鼠EG细胞分离培养的影响 | 第53页 |
| ·雌激素对小鼠EG细胞分离培养的影响 | 第53-54页 |
| ·胎儿性别对小鼠EG细胞分离培养的影响 | 第54-55页 |
| 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-67页 |
| 附图 | 第67-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 作者简介 | 第73页 |
