| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-18页 |
| 第一章 研究背景介绍 | 第18-45页 |
| ·Ndrg2 基因简介 | 第18-24页 |
| ·Ndrg2 基因的发现和蛋白结构 | 第18-20页 |
| ·Ndrg2 基因的表达谱以及功能 | 第20-24页 |
| ·脊椎动物骨骼发育简介 | 第24-28页 |
| ·脊椎动物骨骼元件发育过程 | 第24-28页 |
| ·脊椎动物脊椎骨发育的研究背景 | 第28-39页 |
| ·脊椎动物脊椎骨的组成 | 第28-29页 |
| ·体节形成的分子机制 | 第29-33页 |
| ·Hox 基因与脊椎骨模式和属性的决定 | 第33-37页 |
| ·参与脊椎骨模式和属性决定的主要信号通路 | 第37-39页 |
| ·脊椎动物脊椎骨发育缺陷相关疾病简介 | 第39-43页 |
| ·脊椎肋骨发育不全综合症 | 第40-42页 |
| ·胸腰椎综合症 | 第42-43页 |
| ·本论文的研究目的和研究策略 | 第43-45页 |
| 第二章 实验方法和材料 | 第45-76页 |
| ·分子生物学实验方法 | 第45-47页 |
| ·质粒提取方法 | 第45页 |
| ·感受态制备与转化 | 第45页 |
| ·限制性内切酶反应与连接反应 | 第45页 |
| ·组织 RNA 提取以及反转录 | 第45页 |
| ·定量 PCR | 第45-46页 |
| ·蛋白质提取方法 | 第46页 |
| ·Western Blot 实验 | 第46-47页 |
| ·细胞生物学实验方法 | 第47-52页 |
| ·细胞系培养 | 第47页 |
| ·细胞转染实验 | 第47页 |
| ·pMSCV 逆转录病毒上清的收集和细胞感染 | 第47-49页 |
| ·ATDC5 和 MC3T3E1 细胞诱导实验 | 第49-50页 |
| ·细胞染色实验 | 第50-51页 |
| ·荧光素酶定量实验 | 第51页 |
| ·L-Wnt3a 细胞蛋白收集 | 第51-52页 |
| ·鸡胚相关实验方法 | 第52-55页 |
| ·RCAS 病毒的制备 | 第52-54页 |
| ·RCAS 病毒显微注射 | 第54页 |
| ·鸡胚骨架染色 | 第54-55页 |
| ·小鼠相关实验方法 | 第55-69页 |
| ·实验动物和设施 | 第55页 |
| ·Ndrg2 基因敲除小鼠和转基因小鼠的构建 | 第55-56页 |
| ·基因分型 | 第56-58页 |
| ·整体原位杂交 | 第58-61页 |
| ·切片原位杂交 | 第61-64页 |
| ·石蜡切片和冰冻切片 | 第64-65页 |
| ·Safranino O 染色和 Von Kossa 染色 | 第65-67页 |
| ·X-gal 染色 | 第67-68页 |
| ·小鼠骨架染色 | 第68-69页 |
| ·实验材料 | 第69-76页 |
| ·化学物品以及生物学物品 | 第69-72页 |
| ·实验中所用的 RNA 探针 | 第72-73页 |
| ·实验中所涉及的引物序列 | 第73-76页 |
| 第三章 实验结果 | 第76-108页 |
| ·Ndrg2 基因在软骨内骨化和脊椎骨发育过程中的表达谱分析 | 第76-82页 |
| ·Ndrg2 基因在软骨内骨化过程中表达谱分析 | 第76-78页 |
| ·Ndrg2 基因在骨骼重塑过程中的表达谱分析 | 第78-79页 |
| ·Ndrg2 基因在体节形成和发育过程中的表达谱分析 | 第79-82页 |
| ·Ndrg2 基因在软骨内骨化过程中的功能研究 | 第82-88页 |
| ·Ndrg2 基因在体外细胞系中过量表达延迟软骨成熟和骨分化 | 第82-85页 |
| ·Ndrg2 基因在鸡胚肢芽中异位表达能延迟软骨成熟和骨分化 | 第85-87页 |
| ·Ndrg2 基因在小鼠肢芽间充质干细胞中过量表达不影响软骨内骨化过程 | 第87-88页 |
| ·Ndrg2 基因在和脊椎骨发育过程中的功能研究 | 第88-108页 |
| ·Ndrg2 基因条件性敲除小鼠的制备和验证 | 第88-90页 |
| ·Ndrg2 基因敲除小鼠表现出一系列脊椎骨同源异型转变缺陷 | 第90-94页 |
| ·Col1a1-Ndrg2 和 Col2a1-Ndrg2 转基因小鼠出现脊椎骨同源异型转变缺陷 | 第94-96页 |
| ·骨骼系统中条件敲除 Ndrg2 基因导致与 Ndrg2 基因全身敲除相似表型 | 第96-99页 |
| ·Ndrg2 基因缺失引起的表型与 Hox 基因表达的改变有关 | 第99-102页 |
| ·Ndrg2 基因的失活不影响 PSM 中的主要信号通路 | 第102-104页 |
| ·Ndrg2 基因的失活使体节中 Bmp/Smad 信号通路活性上升 | 第104-108页 |
| 第四章 讨论 | 第108-120页 |
| ·Ndrg2 基因在软骨内骨化过程中功能 | 第109-112页 |
| ·Ndrg2 基因在体节分节后调节脊椎骨的模式和属性 | 第112-115页 |
| ·Ndrg2 基因在调控脊椎骨模式和属性的过程中处于 Hox 基因的上游 | 第115-116页 |
| ·Ndrg2 基因在脊椎骨的发育过程中抑制 Bmp/Smad 信号 | 第116-117页 |
| ·脊椎骨的属性直到体节分化的晚期仍然是可塑的 | 第117-120页 |
| 第五章 总结与展望 | 第120-122页 |
| 参考文献 | 第122-132页 |
| 致谢 | 第132-134页 |
| 攻读博士期间发表的学术论文 | 第134页 |
