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马铃薯Y病毒HC-Pro和甘蔗花叶病毒CP基因的克隆、原核表达与抗血清制备

第一部分 引 言第1-21页
 Ⅰ 植物病毒血清学的研究进展第11-20页
 Ⅱ 本项研究的目的和意义第20-21页
第二部分 马铃薯 Y 病毒 HC-Pro 基因的克隆、原核表达与抗血清制备第21-40页
 1 材料第22页
   ·病毒第22页
   ·菌株和质粒第22页
   ·酶和试剂第22页
   ·寡聚核苷酸引物第22页
 2 方法第22-28页
   ·RNA 的提取第22-23页
   ·反转录合成病毒 cDNA 第一条链第23页
   ·HC-Pro 基因的 PCR 扩增第23-24页
   ·扩增产物的连接第24页
   ·转化大肠杆菌第24-26页
   ·PVYN HC-Pro 基因的原核表达第26-28页
   ·原核表达的 PVYN HC-Pro 抗血清制备第28页
 3 结果和分析第28-38页
   ·RT-PCR 扩增 PVYN、PVYO HC-Pro 基因第28-29页
   ·外源 DNA 与质粒载体的连接及重组质粒向大肠杆菌的转化第29-31页
   ·PVYN、PVYO HC-Pro 基因的序列测定第31页
   ·PVY HC-Pro 序列同源性比较第31页
   ·系统树的绘制第31-33页
   ·大肠杆菌表达载体的构建第33页
   ·SDS-PAGE 分析第33页
   ·用原核表达 HC-Pro 所制备抗血清的效价第33-38页
 4 结论和讨论第38-40页
第三部分 甘蔗花叶病毒 CP 基因的克隆、原核表达与抗血清制备第40-56页
 1 材料第40-41页
   ·菌株和质粒第40-41页
   ·试剂和其它材料第41页
 2 方法第41-45页
   ·植物总 RNA 的提取第41页
   ·反转录合成病毒 cDNA 第一条链第41页
   ·病毒外壳蛋白基因的 PCR 扩增第41-42页
   ·扩增产物的连接第42-43页
   ·转化大肠杆菌第43页
   ·SCMV-TA CP 基因的原核表达第43-44页
   ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析第44页
   ·Western blot 分析第44-45页
   ·原核表达的 SCMV-TA CP 抗血清制备第45页
 3 结果和分析第45-54页
   ·SCMV-TA 外壳蛋白基因的克隆第45-47页
   ·SCMV-TA CP 基因的序列分析第47-48页
   ·系统树的绘制第48-50页
   ·大肠杆菌表达载体的构建第50-51页
   ·SDS-PAGE 分析第51页
   ·用原核表达 CP 所制抗血清的效价和专化性第51-54页
 4 结论和讨论第54-56页
结论第56-57页
参考文献第57-66页
致谢第66-67页
发表论文第67页

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