第一部分 引 言 | 第1-21页 |
Ⅰ 植物病毒血清学的研究进展 | 第11-20页 |
Ⅱ 本项研究的目的和意义 | 第20-21页 |
第二部分 马铃薯 Y 病毒 HC-Pro 基因的克隆、原核表达与抗血清制备 | 第21-40页 |
1 材料 | 第22页 |
·病毒 | 第22页 |
·菌株和质粒 | 第22页 |
·酶和试剂 | 第22页 |
·寡聚核苷酸引物 | 第22页 |
2 方法 | 第22-28页 |
·RNA 的提取 | 第22-23页 |
·反转录合成病毒 cDNA 第一条链 | 第23页 |
·HC-Pro 基因的 PCR 扩增 | 第23-24页 |
·扩增产物的连接 | 第24页 |
·转化大肠杆菌 | 第24-26页 |
·PVYN HC-Pro 基因的原核表达 | 第26-28页 |
·原核表达的 PVYN HC-Pro 抗血清制备 | 第28页 |
3 结果和分析 | 第28-38页 |
·RT-PCR 扩增 PVYN、PVYO HC-Pro 基因 | 第28-29页 |
·外源 DNA 与质粒载体的连接及重组质粒向大肠杆菌的转化 | 第29-31页 |
·PVYN、PVYO HC-Pro 基因的序列测定 | 第31页 |
·PVY HC-Pro 序列同源性比较 | 第31页 |
·系统树的绘制 | 第31-33页 |
·大肠杆菌表达载体的构建 | 第33页 |
·SDS-PAGE 分析 | 第33页 |
·用原核表达 HC-Pro 所制备抗血清的效价 | 第33-38页 |
4 结论和讨论 | 第38-40页 |
第三部分 甘蔗花叶病毒 CP 基因的克隆、原核表达与抗血清制备 | 第40-56页 |
1 材料 | 第40-41页 |
·菌株和质粒 | 第40-41页 |
·试剂和其它材料 | 第41页 |
2 方法 | 第41-45页 |
·植物总 RNA 的提取 | 第41页 |
·反转录合成病毒 cDNA 第一条链 | 第41页 |
·病毒外壳蛋白基因的 PCR 扩增 | 第41-42页 |
·扩增产物的连接 | 第42-43页 |
·转化大肠杆菌 | 第43页 |
·SCMV-TA CP 基因的原核表达 | 第43-44页 |
·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析 | 第44页 |
·Western blot 分析 | 第44-45页 |
·原核表达的 SCMV-TA CP 抗血清制备 | 第45页 |
3 结果和分析 | 第45-54页 |
·SCMV-TA 外壳蛋白基因的克隆 | 第45-47页 |
·SCMV-TA CP 基因的序列分析 | 第47-48页 |
·系统树的绘制 | 第48-50页 |
·大肠杆菌表达载体的构建 | 第50-51页 |
·SDS-PAGE 分析 | 第51页 |
·用原核表达 CP 所制抗血清的效价和专化性 | 第51-54页 |
4 结论和讨论 | 第54-56页 |
结论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
发表论文 | 第67页 |