| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 双生病毒研究进展 | 第8-24页 |
| 一、 双生病毒科的分类 | 第9-10页 |
| 二、 Begomovirus属病毒的特性 | 第10-18页 |
| 三、 双生病毒的复制 | 第18-20页 |
| 四、 双生病毒的转录 | 第20-21页 |
| 五、 双生病毒卫星分子的发现及其在致病中的作用 | 第21-22页 |
| 六、 双生病毒侵染性克隆构建及其应用 | 第22-24页 |
| 第二章 材料与方法 | 第24-33页 |
| 1 材料 | 第24页 |
| ·抗血清 | 第24页 |
| ·植物材料与菌种 | 第24页 |
| ·生物试剂 | 第24页 |
| ·常用化学试剂，缓冲液的配制 | 第24页 |
| ·常用筛选抗生素 | 第24页 |
| 2 实验方法 | 第24-33页 |
| ·植物总DNA提取(CTAB法) | 第24-25页 |
| ·PCR扩增 | 第25-26页 |
| ·PCR产物纯化 | 第26页 |
| ·DNA克隆技术 | 第26-33页 |
| ·连接 | 第26-27页 |
| ·感受态细胞制备 | 第27页 |
| ·转化 | 第27-28页 |
| ·重组质粒的提取与鉴定 | 第28页 |
| ·酶切鉴定 | 第28-29页 |
| ·农杆菌的电击感受态细胞制定方法及转化， | 第29页 |
| ·电转连接纯化产物 | 第29-30页 |
| ·用三亲交配法将DNAβ的侵染性克隆转入农杆菌 | 第30页 |
| ·Southern印迹检测 | 第30-32页 |
| ·电泳及转膜 | 第30-31页 |
| ·探针标记 | 第31页 |
| ·预杂交和杂交 | 第31-32页 |
| ·三抗体夹心ELISA(TAS-ELISA) | 第32-33页 |
| 第三章 赛葵黄脉病毒元谋分离物卫星DNA结构特征 | 第33-39页 |
| 1 材料与方法 | 第33-35页 |
| ·毒源 | 第33-34页 |
| ·植物基因组总DNA提取 | 第34页 |
| ·PCR扩增DNA-A部分序列及DNAβ全长序列 | 第34页 |
| ·克隆及序列测定 | 第34页 |
| ·序列分析 | 第34-35页 |
| 2 结果与讨论 | 第35-39页 |
| ·Y200 DNA-A部分序列测定 | 第35页 |
| ·病毒基因组DNA-β结构 | 第35-36页 |
| ·Y200DNAβ与其它双生病毒DNAβ的同源性比较 | 第36-37页 |
| ·讨论 | 第37-39页 |
| 第四章 赛葵黄脉病毒及其伴随DNAβ致病性研究 | 第39-59页 |
| 1 材料与方法 | 第39-44页 |
| ·材料 | 第39-40页 |
| ·病毒分离物 | 第39页 |
| ·抗血清 | 第39页 |
| ·植物材料与菌种 | 第39-40页 |
| ·引物 | 第40页 |
| ·方法 | 第40-44页 |
| ·植物总DNA的提取 | 第40页 |
| ·PCR扩增 | 第40-41页 |
| ·DNA克隆技术 | 第41页 |
| ·侵染性克隆的构建 | 第41页 |
| ·侵染性克隆的转化 | 第41页 |
| ·农杆菌接种 | 第41页 |
| ·MYVV病毒的PCR鉴定 | 第41-44页 |
| ·病毒DNA的Southern印迹检测 | 第44页 |
| ·三抗体夹心ELISA(TAS-ELISA)鉴定 | 第44页 |
| 2 实验结果 | 第44-52页 |
| ·MYVV-Y47病毒分离物DNA-A侵染性克隆的构建 | 第44-46页 |
| ·MYVV-Y47病毒分离物DNA-β侵染性克隆的构建 | 第46-47页 |
| ·MYVV-Y47 DNA-A和DNAβ的致病性测定 | 第47-49页 |
| ·MYVV-Y47分离物的ELISA检测 | 第49-50页 |
| ·MYVV-Y47分离物的Southern印迹检测结果 | 第50-52页 |
| 3 讨论 | 第52-59页 |
| 附录A 常用缓冲液及培养基配方 | 第59-64页 |
| 附录B 常用的抗生素及使用浓度 | 第64-65页 |
| 附录C 常用化学试剂、分子生物学试剂及仪器 | 第65-66页 |
| 1 常用化学试剂 | 第65页 |
| 2 分子生物学试剂 | 第65-66页 |
| 3 仪器 | 第66页 |
