| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-11页 |
| 1 前言 | 第11-25页 |
| ·水稻条纹病毒的研究进展 | 第11-18页 |
| ·病毒的形态特征及生物学特性 | 第11页 |
| ·病害的发生与分布 | 第11-12页 |
| ·血清学 | 第12页 |
| ·病害症状及寄主范围 | 第12-13页 |
| ·病害的外部症状 | 第12页 |
| ·病害的内部症状 | 第12页 |
| ·寄主范围 | 第12-13页 |
| ·病害的传毒介体与传毒特性 | 第13页 |
| ·RSV的分子生物学 | 第13-18页 |
| ·病毒基因组的结构与功能 | 第13-14页 |
| ·病毒基因组的编码蛋白 | 第14-16页 |
| ·病毒基因组的复制与转录机制 | 第16-18页 |
| ·植物病毒的株系分化和分子变异的研究 | 第18-23页 |
| ·病毒分子变异研究的常用技术 | 第19-20页 |
| ·植物病毒的变异机制 | 第20-21页 |
| ·RSV分子变异的研究 | 第21-23页 |
| ·RSV分子变异的特征 | 第21-22页 |
| ·RSV分子变异的机制 | 第22-23页 |
| ·RSV株系分化的研究 | 第23页 |
| ·本项目研究的目的及意义 | 第23-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-38页 |
| ·材料 | 第25-27页 |
| ·病毒分离物 | 第25页 |
| ·病毒寄主 | 第25页 |
| ·菌株 | 第25页 |
| ·载体 | 第25页 |
| ·试剂及酶类 | 第25-27页 |
| ·实验方法 | 第27-38页 |
| ·NS3蛋白基因的分子变异 | 第27-34页 |
| ·毒源繁殖 | 第27页 |
| ·引物设计与合成 | 第27-28页 |
| ·病毒提取 | 第28页 |
| ·病叶总RNA的提取 | 第28-29页 |
| ·RT-PCR扩增 | 第29-30页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物 | 第30页 |
| ·单链构象多态性(SSCP)分析 | 第30-31页 |
| ·目的基因转化大肠杆菌 | 第31-34页 |
| ·序列测定与分析 | 第34页 |
| ·NS3蛋白基因在大肠杆菌中表达 | 第34-36页 |
| ·NS3基因原核表达载体的构建 | 第34-35页 |
| ·融合蛋白的诱导表达 | 第35页 |
| ·蛋白的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第35页 |
| ·Western blot鉴定 | 第35-36页 |
| ·融合蛋白特异性抗血清的制备及应用 | 第36-38页 |
| ·融合蛋白抗血清的制备 | 第36页 |
| ·抗血清效价测定 | 第36页 |
| ·间接ELISA检测方法的建立 | 第36-37页 |
| ·Western blot检测病株及提纯病毒中NS3蛋白 | 第37-38页 |
| 3 结果与分析 | 第38-67页 |
| ·NS3基因的分子变异 | 第38-62页 |
| ·RT-PCR | 第38-39页 |
| ·SSCP分析 | 第39-40页 |
| ·PCR扩增产物的克隆 | 第40页 |
| ·重组质粒的筛选和鉴定 | 第40-41页 |
| ·序列分析与比较 | 第41-58页 |
| ·系统进化分析 | 第41-43页 |
| ·NS3基因的变异特征 | 第43-44页 |
| ·部分分离物与其它片断同源性比较分析 | 第44-58页 |
| ·云南沙坝、昆明单个分离物内部的分子变异 | 第58-60页 |
| ·在不同种寄主和不同抗性类型的水稻品种上产生的寄主适应性对病毒种群结构的影响的初步探讨 | 第60-62页 |
| ·菌株的获得 | 第60页 |
| ·SSCP分析 | 第60-62页 |
| ·RSV NS3基因的原核表达及抗血清的制备 | 第62-67页 |
| ·RSV NS3基因的克隆 | 第62页 |
| ·RSV NS3基因融合蛋白原核表达载体的构建 | 第62页 |
| ·融合蛋白SDS-PAGE分离鉴定 | 第62页 |
| ·Western blot鉴定 | 第62页 |
| ·GST-NS3蛋白抗血清的制备与效价测定 | 第62-63页 |
| ·间接ELISA检测方法的建立 | 第63-66页 |
| ·抗血清的适宜工作浓度 | 第63页 |
| ·灵敏度测定 | 第63-66页 |
| ·Western blot检测病株及提纯病毒中的NS3蛋白 | 第66-67页 |
| 4 讨论 | 第67-72页 |
| ·RSV NS3基因的分子变异 | 第67-68页 |
| ·RSV的准种结构 | 第68-69页 |
| ·RSV的寄主适应性 | 第69-70页 |
| ·抗血清的制备 | 第70页 |
| ·NS3功能的初步探讨 | 第70-71页 |
| ·小结 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 附录1 缩写词和英汉对照 | 第80-83页 |
| 附录2 本研究使用的主要试剂与溶液的配制 | 第83-87页 |
