摘要 | 第1-7页 |
1 前言 | 第7-25页 |
·植物耐盐分子生物学研究进展 | 第7-22页 |
·植物耐盐机理的研究进展 | 第7-12页 |
·植物耐盐相关基因克隆研究进展 | 第12-18页 |
·盐胁迫的信号传导研究进展 | 第18-20页 |
·红树林植物耐盐分子生物学研究进展 | 第20-21页 |
·克隆耐盐基因的策略 | 第21页 |
·小结 | 第21-22页 |
·本项研究的目的和意义 | 第22页 |
·本项研究的技术路线 | 第22-25页 |
2 材料与方法 | 第25-50页 |
·研究材料的选择 | 第25页 |
·海马齿不耐盐植株的诱导筛选方法 | 第25-26页 |
·海马齿植株Total RNA的提取方法 | 第26-28页 |
·mRNA的纯化 | 第28-29页 |
·耐盐海马齿植株与不耐盐植株表达差异分析(SSH) | 第29-37页 |
·Reverse Northern Dot-Blot鉴定阳性差异片段 | 第37-39页 |
·Northern Blot进一步鉴定阳性差异片段 | 第39-43页 |
·差异片段的BLAST(Basic Local Alignment Search Tool)分析 | 第43页 |
·差异片段的全长cDNA克隆 | 第43-48页 |
·全长cDNA序列分析 | 第48-49页 |
·全长cDNA编码的蛋白质序列分析 | 第49-50页 |
·新基因的耐盐功能鉴定 | 第50页 |
3 结果与分析 | 第50-96页 |
·海马齿不耐盐植株的诱导筛选结果 | 第50-52页 |
·海马齿耐盐植株和不耐盐植株Total RNA的提取结果 | 第52-53页 |
·海马齿6号耐盐植株与不耐盐植株表达差异抑制消减杂交结果 | 第53-54页 |
·Rsa Ⅰ酶切效果电泳检测 | 第53-54页 |
·PCR扩增结果分析 | 第54页 |
·SSH差示文库的建立 | 第54页 |
·SSH差示库克隆的Reverse Northern Dot-Blot鉴定结果 | 第54-56页 |
·Reverse Northern Dot-Blot中部分阳性克隆的测序分析与同源性比较 | 第56-58页 |
·Reverse Northern Dot-Blot中部分阳性克隆的Northern Blot鉴定结果 | 第58-59页 |
·152和233两个差异基因片段的全长cDNA克隆结果 | 第59-64页 |
·全长cDNA序列分析 | 第64-96页 |
·152全长cDNA序列 | 第64-77页 |
·152全长cDNA序列的可读框架分析 | 第77页 |
·152全长cDNA序列与同源基因序列的多重对齐分析 | 第77-85页 |
·152全长cDNA序列推知的蛋白质序列分析 | 第85-96页 |
·152全长cDNA序列推知的蛋白质基本性质分析 | 第85页 |
·功能位点分析及与拟南芥晚期胚胎发生高丰度蛋白功能位点比较 | 第85-86页 |
·疏水/亲水性分析 | 第86-88页 |
·保守区域比较和结构功能域分析 | 第88-89页 |
·前导肽分析 | 第89-90页 |
·152全长cDNA序列编码蛋白与LEA蛋白家族的多重比较分析 | 第90-94页 |
·152全长cDNA序列编码蛋白质的二级结构分析 | 第94-96页 |
4 讨论 | 第96-100页 |
·抑制消减杂交技术(SSH)克隆差异基因结果的可靠性 | 第96-97页 |
·红树林植物海马齿Total RNA的大量提取方法 | 第97-98页 |
·152全长cDNA的功能预测 | 第98-99页 |
·233全长cDNA的功能预测 | 第99-100页 |
5 结论 | 第100-102页 |
参考文献 | 第102-111页 |
Abstract | 第111-114页 |
致谢 | 第114-115页 |
附录1 Nos23,66-1,84,89-1,97,152,175,233等8个差异片段的测序结果 | 第115-122页 |
附录2 Nos23,66-1,84,89-1,97,175等6个差异片段的BLASTN和BLASTX分析结果 | 第122-152页 |