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微生物生物合成β-榄香烯前体—吉马烯A研究

致谢第1-5页
摘要第5-6页
Abstract第6-8页
缩略语说明第8-10页
目录第10-13页
1 绪论第13-27页
   ·β-榄香烯概述第13-14页
   ·合成生物学第14-17页
     ·合成生物学概念及研究内容第14-15页
     ·合成生物学研究方法第15页
     ·合成生物学面临的挑战第15-16页
     ·合成生物学应用前景第16页
     ·合成生物学安全问题及应对策略第16-17页
   ·萜类化合物微生物生物合成第17-22页
     ·萜类化合物及微生物萜类合成第17-19页
     ·微生物萜类生物合成研究实例第19-22页
     ·微生物生物合成展望第22页
   ·定向进化技术第22-25页
     ·定向进化技术研究方法第23-24页
     ·定向进化技术应用展望第24-25页
   ·论文的研究内容及研究的目的意义第25页
   ·本论文研究的实验技术流程图第25-27页
2 莪术cDNA文库的构建及IPP异构酶基因克隆、功能验证和GAS基因的克隆第27-40页
   ·实验材料、菌株及质粒第27页
   ·实验试剂第27-28页
   ·培养基、缓冲液与引物信息第28-29页
   ·实验仪器第29-30页
   ·实验方法第30-35页
     ·cDNA文库构建及随机测序第30-34页
     ·IPP异构酶编码基因克隆及功能验证第34-35页
   ·结果与讨论第35-40页
     ·cDNA文库构建及随机测序结果与分析第35-37页
     ·cDNA克隆IPP异构酶结果与讨论第37-40页
3 GAS基因表达研究第40-55页
   ·实验材料第40-41页
   ·试剂及仪器信息第41-42页
   ·培养基、缓冲液及配制第42页
   ·引物信息第42-43页
   ·实验方法第43-50页
     ·基因查找与获得第43-46页
     ·基因表达及产物测定第46-48页
     ·蓝细菌来源的GAS编码基因在酿酒酵母中的表达研究第48-50页
   ·实验结果与讨论第50-55页
     ·蓝细菌GAS基因克隆表达结果与讨论第50页
     ·莴笋LTC1基因的克隆与表达结果与讨论第50-52页
     ·气相色谱—质谱产物检测结果与讨论第52-54页
     ·蓝细菌来源的GAS基因在酿酒酵母中表达结果与讨论第54-55页
4 大肠杆菌中异源MVA途径构建、功能验证及GAS共表达研究第55-74页
   ·实验试剂第55-56页
   ·实验菌株及质粒第56页
   ·实验仪器第56页
   ·引物信息第56-57页
   ·实验方法第57-64页
     ·异源MVA途径构建相关基因的克隆第57-59页
     ·异源MVA途径的构建第59-62页
     ·异源MVA途径在大肠杆菌中的功能验证第62-63页
     ·β-榄香烯前体吉马烯A合成条件优化第63-64页
   ·实验结果与讨论第64-72页
     ·MVA途径相关基因克隆结果第64页
     ·MVA途径构建结果讨论第64-67页
     ·外源MVA途径在大肠杆菌中的功能验证第67-68页
     ·β-榄香烯前体吉马烯A合成条件优化结果与讨论第68-72页
   ·小结第72-74页
5 GAS可溶性表达定向进化策略及P450基因与GAS共表达研究第74-81页
   ·实验试剂第74页
   ·实验菌株、质粒及引物第74-75页
   ·实验方法第75-76页
     ·基于LacZa融合报告系统的GAS定向进化第75-76页
     ·P450和GAS在大肠杆菌中共表达研究第76页
   ·结果与讨论第76-81页
     ·分子定向进化筛选可溶性GAS基因结果讨论第76-79页
     ·p450与GAS基因共表达初步探索研究结果与讨论第79-81页
6 结论与展望第81-83页
   ·结论第81-82页
   ·展望第82-83页
参考文献第83-91页
附录:作者简介第91-92页

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