| 中文摘要 | 第1-12页 |
| 英文摘要 | 第12-15页 |
| 前言 | 第15-17页 |
| 文献综述 | 第17-41页 |
| 1 猪传染性胃肠炎病毒研究进展 | 第17-31页 |
| ·TGEV的一般生物学 | 第17-22页 |
| ·病原学 | 第17-18页 |
| ·流行病学 | 第18-19页 |
| ·临床症状 | 第19页 |
| ·病理变化 | 第19-20页 |
| ·发病机理 | 第20页 |
| ·诊断 | 第20-21页 |
| ·防治 | 第21页 |
| ·TGEV和PRCV | 第21-22页 |
| ·TGEV的分子生物学 | 第22-28页 |
| ·TGEV基因组结构 | 第22-23页 |
| ·基因的复制与转录 | 第23-24页 |
| ·S基因 | 第24页 |
| ·TGEV结构蛋白与功能 | 第24-28页 |
| ·非结构蛋白 | 第28页 |
| ·猪传染性胃肠炎病毒疫苗的研究现状 | 第28-30页 |
| ·常规疫苗 | 第28页 |
| ·基因工程疫苗 | 第28-30页 |
| ·结语 | 第30-31页 |
| 2 基因表达系统研究进展 | 第31-36页 |
| ·原核表达系统的代表-大肠杆菌表达系统 | 第31-32页 |
| ·原核表达系统的后起之秀-枯草杆菌表达系统 | 第32页 |
| ·最具商品价值的真核细胞表达系统-酵母表达系统 | 第32-33页 |
| ·具有开发前景的真核细胞表达系统-昆虫细胞/杆状病毒载体表达系统 | 第33页 |
| ·比较完备的真核细胞表达系统-哺乳动物细胞表达系统 | 第33-34页 |
| ·方兴未艾的表达系统-真核个体表达系统 | 第34-36页 |
| 3 核酸疫苗研究进展 | 第36-41页 |
| ·核酸疫苗的构建 | 第36页 |
| ·核酸疫苗的特点 | 第36-37页 |
| ·核酸疫苗的免疫机理 | 第37页 |
| ·核酸疫苗的接种方式 | 第37-38页 |
| ·核酸疫苗免疫效果的影响因素 | 第38-39页 |
| ·核酸疫苗的研究现状及应用前景 | 第39-41页 |
| ·人类核酸疫苗研究现状 | 第39页 |
| ·兽类传染病核酸疫苗研究现状 | 第39-40页 |
| ·核酸疫苗的安全性问题 | 第40-41页 |
| 实验研究 | 第41-84页 |
| 1 猪传染性胃肠炎病毒TH-98株S基因原核表达载体的构建 | 第41-51页 |
| ·实验材料 | 第42页 |
| ·质粒与菌种 | 第42页 |
| ·实验中用到的引物 | 第42页 |
| ·主要试剂 | 第42页 |
| ·主要仪器设备 | 第42页 |
| ·实验方法 | 第42-45页 |
| ·SaPRO重组子的构建 | 第43-45页 |
| ·SaPET重组子的构建 | 第45页 |
| ·SasPET重组子的构建 | 第45页 |
| ·Sas6P-1重组子的构建 | 第45页 |
| ·实验结果 | 第45-47页 |
| ·SaPRO重组子的构建 | 第45页 |
| ·SaPET重组子的构建 | 第45-47页 |
| ·SasPET重组子的构建 | 第47页 |
| ·Sas6P-1重组子的构建 | 第47页 |
| ·讨论 | 第47-51页 |
| 2 猪传染性胃肠炎病毒TH-98株S基因杆状病毒/昆虫细胞转移载体的构建 | 第51-57页 |
| ·材料与方法 | 第52-53页 |
| ·质粒.菌种和工具酶 | 第52页 |
| ·S基因片段的回收 | 第52页 |
| ·杆状病毒供体预处理 | 第52页 |
| ·重组质粒的克隆及鉴定 | 第52页 |
| ·重组子的构建与酶切鉴定 | 第52-53页 |
| ·重组子PCR鉴定及纯化 | 第53页 |
| ·结果 | 第53-54页 |
| ·S基因片段及供体质粒预处理 | 第53页 |
| ·重组质粒BAC-S克隆与酶切鉴定 | 第53-54页 |
| ·重组质粒构建与酶切鉴定 | 第54页 |
| ·重组质粒PCR鉴定及纯化 | 第54页 |
| ·讨论 | 第54-57页 |
| 3 猪传染性胃肠炎病毒TH-98株S基因改建及大肠杆菌/酵母细胞穿梭质粒的构建 | 第57-67页 |
| ·材料 | 第58页 |
| ·主要实验材料 | 第58页 |
| ·引物情况 | 第58页 |
| ·方法 | 第58-60页 |
| ·目的片段的扩增 | 第58-59页 |
| ·SNa片段的克隆 | 第59页 |
| ·SNb片段的克隆 | 第59页 |
| ·SN片段的克隆 | 第59页 |
| ·SN重组质粒的鉴定 | 第59页 |
| ·大肠杆菌/酵母细胞穿梭质粒SNPIC3.5的构建 | 第59-60页 |
| ·结果 | 第60-63页 |
| ·目的片段的扩增 | 第60页 |
| ·SNa片段的克隆 | 第60页 |
| ·SNb片段的克隆 | 第60页 |
| ·SN片段的克隆 | 第60-61页 |
| ·SN片段的鉴定 | 第61-62页 |
| ·大肠杆菌/酵母细胞穿梭质粒SNPIC3.5的构建 | 第62-63页 |
| ·讨论 | 第63-67页 |
| 4 猪传染性胃肠炎病毒TH-98株S基因核酸疫苗构建及其免疫的研究 | 第67-84页 |
| ·材料与方法 | 第69-71页 |
| ·实验材料 | 第69-70页 |
| ·实验方法 | 第70-71页 |
| ·实验结果 | 第71-77页 |
| ·重组真核表达载体SaPCI的构建 | 第71-72页 |
| ·重组真核表达载体SaPCDNA3的构建 | 第72页 |
| ·重组真核表达载体SPCI的构建 | 第72-73页 |
| ·重组真核表达载体的大量制备 | 第73-74页 |
| ·抗体检测 | 第74-75页 |
| ·外周血CD4~+.CD8~+细胞的检测 | 第75-77页 |
| ·讨论 | 第77-84页 |
| 结论 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-98页 |
| 附录 | 第98-105页 |
| 致谢 | 第105-106页 |
| 作者简介 | 第106-107页 |
| RESUME | 第107-108页 |
