| 前言 | 第1-12页 |
| 实验一 维生素A结合蛋白基因的克隆与序列分析 | 第12-21页 |
| 1 实验材料 | 第12-13页 |
| ·人睾丸cDNA库 | 第12页 |
| ·宿主菌及载体 | 第12页 |
| ·工具酶及试剂盒 | 第12页 |
| ·寡核苷酸引物 | 第12页 |
| ·主要试剂 | 第12页 |
| ·试剂配制 | 第12-13页 |
| ·主要实验仪器 | 第13页 |
| 2 实验方法 | 第13-16页 |
| ·引物设计 | 第13页 |
| ·钓取基因 | 第13-14页 |
| ·PCR产物的电泳回收 | 第14页 |
| ·重组克隆载体的构建 | 第14-15页 |
| ·质粒转化 | 第15-16页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第15页 |
| ·转化感受态 | 第15页 |
| ·阳性重组克隆的筛选(Kieser法) | 第15-16页 |
| ·阳性重组克隆的鉴定 | 第16页 |
| ·菌落PCR鉴定 | 第16页 |
| ·特异性酶切鉴定 | 第16页 |
| ·DNA序列分析 | 第16页 |
| 3 实验结果 | 第16-19页 |
| 4 讨论 | 第19-21页 |
| 实验二 维生素A结合蛋白基因在大肠杆菌中的表达 | 第21-27页 |
| 1 实验材料 | 第21-22页 |
| ·宿主菌 | 第21页 |
| ·质粒 | 第21页 |
| ·工具酶 | 第21页 |
| ·主要试剂 | 第21页 |
| ·试剂配制 | 第21-22页 |
| ·主要实验器 | 第22页 |
| 2 实验方法 | 第22-24页 |
| ·构建重组表达载体 | 第22-23页 |
| ·阳性重组克隆的筛选和鉴定 | 第23页 |
| ·工程菌的诱导表达 | 第23-24页 |
| ·全菌体蛋白的电泳分析 | 第24页 |
| 3 实验结果 | 第24-26页 |
| ·重组表达质粒的酶切鉴定图谱 | 第24-25页 |
| ·重组表达质粒在E.coliDH5α中表达的SDS-PAGE电泳图谱 | 第25页 |
| ·讨论 | 第25-26页 |
| 4 结论 | 第26-27页 |
| 致谢 | 第27-28页 |
| 参考文献 | 第28-31页 |
| 作者简介 | 第31页 |