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利用广谱抗病基因培育抗黄萎病棉花

符号、缩略语第1-9页
中文摘要第9-10页
英文摘要第10-11页
引言第11-13页
第一章 文献综述第13-37页
 1. 棉花抗黄萎病育种概况第13-16页
  1.1 黄萎病病原及其危害第13-14页
  1.2 棉花黄萎病的致病机理第14页
  1.3 棉花对黄萎病的抗性机制第14-15页
  1.4 棉花抗黄萎病育种第15-16页
 2. 抗病基因工程研究进展第16-25页
  2.1 基因—基因假说第17页
  2.2 抗病基因的克隆及其产物特征第17-19页
  2.3 无毒基因(avr)和激发子(elicitor)第19-20页
  2.4 防卫反应基因和防卫反应第20-21页
  2.5 系统获得性抗性(SAR)第21-22页
  2.6 SA和H2O2在SAR过程中的作用第22-23页
  2.7 SAR信号传导途径中的功能基因第23-25页
 3. 抗病基因策略第25-28页
  3.1 基于R基因和avr基因的抗病策略第25-26页
  3.2 基于防卫反应基因的抗病策略第26-27页
  3.3 基于SAR的抗病策略第27-28页
  3.4 ISR及其它诱导系统抗性策略第28页
 4. 植物病原菌诱导型启动子研究进展第28-35页
  4.1 几种典型的病原菌诱导型启动子第29-31页
  4.2 决定病原诱导型的启动子顺式作用元件第31-33页
  4.3 病原诱导型启动子在抗病基因工程中的应用第33-34页
  4.4 展望第34-35页
 5. 本研究的目的和意义第35-37页
第二章 NPR1基因的转化和检测第37-48页
 1. 材料第37-38页
  1.1 菌株和质粒第37页
  1.2 植物材料第37页
  1.3 试剂第37-38页
  1.4 培养基第38页
 2. 方法第38-42页
  2.1 pNPR1转化土壤根癌农杆菌LBA第38-39页
   2.1.1 土壤根癌农杆菌LBA4404感受态细胞的制备第38页
   2.1.2 质粒转化农杆菌感受态LBA第38-39页
  2.2 植物的转化第39-42页
   2.2.1 农杆菌活化第39页
   2.2.2 烟草的遗传转化和植株再生第39页
   2.2.3 棉花的遗传转化和胚性愈伤的诱导第39-40页
   2.2.4 烟草转基因植株DNA的提取第40页
   2.2.5 烟草转基因植株的PCR检测第40页
   2.2.6 烟草转基因植株的Southern杂交分析第40-42页
   2.2.7 烟草转基因植株的抗病性鉴定第42页
 3. 结果及分析第42-45页
  3.1 pNPR1转化LBA4404阳性克隆的鉴定第42-43页
  3.2 转基因烟草植株再生第43页
  3.3 转基因烟草的PCR检测第43页
  3.4 转基因烟草的Southern杂交分析第43-44页
  3.5 转基因烟草的抗病性鉴定第44页
  3.6 转NPR1基因棉花抗性愈伤的获得第44-45页
  3.7 转NPR1基因棉花的获得、检测及抗病性鉴定第45页
 4. 讨论第45-48页
第三章 NPR1基因的病原诱导型载体(pIPR)的构建和转化第48-57页
 1. 材料第48-49页
  1.1 菌种和质粒第48页
  1.2 植物材料第48页
  1.3 试剂第48-49页
 2. 方法第49-53页
  2.1 Pr1-a基因启动子的克隆第49-50页
   2.1.1 PCR引物设计第49页
   2.1.2 烟草Wisconsin38 DNA的提取第49-50页
   2.1.3 PCR扩增第50页
   2.1.4 琼脂糖凝胶电泳第50页
   2.1.5 回收第50页
   2.1.6 测序第50页
  2.2 质粒的提取第50-51页
  2.3 对质粒进行双酶切第51-52页
  2.4 酶切产物的回收第52页
  2.5 连接反应第52页
  2.6 连接产物转化大肠杆菌DH5α感受态细胞第52页
  2.7 质粒的大量提取第52页
  2.8 花粉管通道法转化棉花第52-53页
  2.9 转化棉株的Kna检测第53页
 3. 结果与分析第53-55页
  3.1 Pr1-a基因启动子的克隆第53-54页
  3.2 pIPR载体的构建第54页
  3.3 pIPR载体的酶切鉴定第54-55页
  3.4 花粉管通道法转化棉花第55页
 4. 讨论第55-57页
第四章 结论及展望第57-59页
 1. 结论第57-58页
 2. 展望第58-59页
附录:彩色图片第59-65页
主要参考文献第65-72页

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