| 中文摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 前言 | 第9-21页 |
| 实验材料和方法 | 第21-43页 |
| 1. 主要试剂 | 第21-23页 |
| 2. 核苷酸序列与引物 | 第23页 |
| 3. 细胞株 | 第23页 |
| 4. 主要试剂配制 | 第23-26页 |
| 5. 主要仪器和材料 | 第26-27页 |
| 6. 实验方法 | 第27-42页 |
| ·细胞培养 | 第27页 |
| ·Real-time PCR 检测内源性 hsa-miR-181a 的表达水平 | 第27-29页 |
| ·Real-time PCR 检测外源性 miR-181a minics 的转染效果 | 第29-30页 |
| ·Real-time PCR 检测 PPFIA1siRNA 在 K562 细胞中的干扰效果 | 第30-32页 |
| ·Western Blot 检测细胞内 PPFIA1 蛋白的相对表达水平 | 第32-33页 |
| ·PPFIA13'UTR 和 PPFIA1 mut-3'UTR 报告基因载体的荧光素酶活性分析 | 第33-38页 |
| ·MTT 法检测 miR-181a、PPFIA1siRNA 对 K562 细胞增值抑制的剂量效应 | 第38-39页 |
| ·台盼兰法检测 miR-181a、PPFIA1siRNA 对 K562 细胞生长抑制的时间效应 | 第39-40页 |
| ·Annexin V/PI 双染检测 miR-181a、PPFIA1siRNA 对 K562 细胞凋亡的影响 | 第40-41页 |
| ·MTT 法检测 miR-181a、PPFIA1siRNA 影响 K562 细胞对 STI571 药物敏感性的作用 | 第41-42页 |
| ·统计学处理 | 第42页 |
| 7. 生物信息学软件和网络数据库 | 第42-43页 |
| 实验结果与讨论 | 第43-61页 |
| 第一部分 K562 细胞中内源性 hsa-miR-181a 的表达水平及外源性 miR-181a minics的转染效果检测 | 第43-46页 |
| ·Real-time PCR 检测内源性 hsa-miR-181a 的表达水平 | 第43-44页 |
| ·Real-time PCR 检测外源性 miR-181a minics 的转染效果 | 第44页 |
| ·讨论 | 第44-46页 |
| 第二部分 hsa-miR-181a 候选靶基因 PPFIA1 的实验鉴定 | 第46-53页 |
| ·生物信息学分析 PPFIA1 与 hsa-miR-181a 的结合 | 第46-47页 |
| ·Real-time PCR 检测细胞内 PPFIA1 mRNA 的相对表达水平 | 第47页 |
| ·Western Blot 检测细胞内 PPFIA1 蛋白的相对表达水平 | 第47-48页 |
| ·荧光素酶活性分析 | 第48-49页 |
| ·讨论 | 第49-53页 |
| 第三部分 hsa-miR-181a 靶向作用 PPFIA1 对白血病 K562 细胞生长和凋亡的影响45 | 第53-59页 |
| ·MTT 法检测不同浓度的 miR-181a、PPFIA1 siRNA 对 K562 细胞生长的影响 | 第53页 |
| ·台盼蓝法检测不同时间下 miR-181a、PPFIA1 siRNA 对 K562 细胞生长的影响 | 第53-54页 |
| ·Annexin V/PI 双染检测 miR-181a 和 PPFIA1 siRNA 对 K562 细胞凋亡的影响 | 第54-55页 |
| ·讨论 | 第55-59页 |
| 第四部分 hsa-miR-181a 靶向作用 PPFIA1 提高 K562 细胞对 SIT571 的药物敏感性 | 第59-61页 |
| ·MTT 法检测 hsa-miR-181a 靶向作用 PPFIA1 提高 K562 细胞对 STI571 的药物敏感性 | 第59-60页 |
| ·讨论 | 第60-61页 |
| 全文结论 | 第61-62页 |
| 不足与展望 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-70页 |
| 附录 英文缩略词 | 第70-71页 |
| 在校期间科研成果 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
