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白果活性蛋白的分离、纯化、结构及其生物活性研究

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-12页
第一章 、 文献综述第12-48页
 1 活性多肽蛋白质研究进展第12-15页
   ·从人体中发现的新肽物质第12-13页
   ·从动物体中发现的新肽物质第13-14页
   ·从植物体中发现的新多肽蛋白类物质第14-15页
 2 活性多肽蛋白类化合物的分离纯化方法研究概况第15-25页
   ·蛋白质浓度测定方法第16页
   ·分离纯化中蛋白质的不稳定性及其预防措施第16-21页
   ·吸附色谱在分离纯化活性蛋白中应用概况第21-25页
   ·纯度的鉴定第25页
 3 生物质谱技术在蛋白质、多肽结构测定中的应用第25-33页
   ·生物质谱技术简介第26-28页
   ·质谱在蛋白质结构测定中的应用第28-33页
 4 蛋白质构象研究概况第33-41页
   ·紫外差光谱在蛋白质分子构象研究中的应用第33-34页
   ·荧光光谱在蛋白质分子构像研究中的应用第34-36页
   ·红外光谱法测定蛋白质二级结构的进展第36-37页
   ·拉曼光谱法测定蛋白质二级结构的进展第37-39页
   ·简介X射线衍射结构分析法研究蛋白质和多肽的结构第39-40页
   ·简介核磁共振法研究蛋白质的结构第40-41页
 参考文献第41-48页
第二章 、 研究目的第48-52页
第三章 、 原料的形态特征和化学成分研究第52-62页
 1 材料与设备第52-53页
 2 实验方法第53-54页
   ·白果化学成分分析方法第53页
   ·白果中类胡萝卜素的提取、分离和鉴定第53-54页
 3 结果与分析第54-60页
   ·不同地区白果的形态特征第54-55页
   ·不同地区干白果主要化学成分含量第55页
   ·白果蛋白质的氨基酸组成分析第55-56页
   ·白果矿物质和微量元素测定及其分布研究第56-57页
   ·白果中类胡萝卜素的提取、分离和鉴定第57-60页
 4 结论第60-61页
 参考文献第61-62页
第四章 、 白果活性蛋白的分离提取第62-77页
 1 材料与设备第62-63页
 2 实验方法第63-65页
   ·白果中清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白、碱溶谷蛋白和复合蛋白含量的测定第63页
   ·白果中各蛋白组分的制备第63-64页
   ·盐溶蛋白提取条件的研究第64页
   ·可溶性蛋白pI的测定第64页
   ·硫酸铵分段盐析白果盐溶蛋白第64-65页
   ·白果清蛋白球蛋白和盐溶蛋白的化学成分分析第65页
 3 结果与分析第65-75页
   ·白果中各蛋白质组分分析第65-66页
   ·白果蛋白各组分抑制羟基自由基活性比较第66-67页
   ·白果盐溶蛋白提取的研究第67-71页
   ·盐析法分离白果盐溶蛋白第71-73页
   ·白果盐溶蛋白、白果清蛋白和白果球蛋白提取工艺的确定第73-74页
   ·清蛋白、球蛋白和盐溶蛋白化学成分测定第74页
   ·白果蛋白氨基酸组成分析第74-75页
 4 结论第75页
 参考文献第75-77页
第五章 、 GAP分离纯化第77-95页
 1 材料与设备第77-78页
 2 实验方法第78-81页
   ·离子交换层析中溶液pH值的选择第78-79页
   ·离子交换层析中洗脱条件的选择第79页
   ·树脂的准备和层析柱的填装第79页
   ·样品上柱第79-80页
   ·洗柱和目的蛋白质的洗脱第80页
   ·收集第80页
   ·纯化第80页
   ·聚丙烯酰胺凝胶电泳第80-81页
   ·测定蛋白质的等电点第81页
 3 结果与分析第81-93页
   ·离子交换层析中溶液pH值的选择第81-82页
   ·离子交换层析中洗脱条件的选择第82页
   ·步进式洗脱分离清蛋白第82-83页
   ·梯度式洗脱分离清蛋白第83-85页
   ·步进式结合梯度式洗脱分离清蛋白第85-87页
   ·DEAE-Sephadex-A50柱层析纯化GAPⅡ第87页
   ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离白果清蛋白第87-89页
   ·纯度鉴定第89-91页
   ·GAPⅡa样品的物理化学性质第91-93页
 4 结论第93页
 参考文献第93-95页
第六章 、 GAPⅡa一级结构研究第95-116页
 1 材料与设备第96-97页
 2 实验方法第97-98页
   ·酸水解法测定色氨酸含量第97页
   ·氨基酸组成分析第97页
   ·MALDI-TOF-MS测定蛋白的分子量和肽质量指纹图谱第97-98页
   ·ESI-MS/MS测定GAPⅡa部分序列第98页
   ·蛋白质序列数据库检索第98页
   ·0-糖苷键的稀碱水解第98页
 3 结果与分析第98-113页
   ·GAPⅡa氨基酸组成第98-100页
   ·GAPⅡa分子量测定第100-101页
   ·GAPⅡa肽质量指纹图谱第101-109页
   ·GAPⅡa序列测定第109-112页
   ·β-消除反应确定GAPⅡa糖肽链的连接方式第112-113页
 4 结论第113页
 参考文献第113-116页
第七章 、 GAPⅡa分子构象的表征第116-150页
 1 实验材料第117页
 2 实验仪器第117页
 3 实验方法第117-120页
   ·GAPⅡa拉曼光谱分析第118页
   ·GAPⅡa红外光谱分析第118页
   ·GAPⅡa园二色谱分析第118页
   ·GAPⅡa状态的扫描电镜和透射电镜观察第118页
   ·GAP晶体特性的测定第118-119页
   ·GAPⅡa荧光分析第119页
   ·GAPⅡa紫外差光谱分析第119页
   ·GAPⅡa的构象与抗氧化活性关系的研究及其机理初探第119-120页
 4 结果与讨论第120-141页
   ·拉曼光谱分析GAPⅡa的二级结构第120-121页
   ·GAP红外光谱分析第121-125页
   ·园二色谱分析GAPⅡa的二级结构第125-126页
   ·GAP晶体特性的测定第126-127页
   ·GAPⅡa聚集状态的扫描电镜和透射电镜观察第127-128页
   ·GAPⅡa荧光光谱研究第128-136页
   ·紫外差光谱分析的二级结构第136页
   ·GAPⅡa的构象与抗氧化活性关系的研究及其机理初探第136-141页
 5 蛋白质结构预测第141-147页
   ·GAPⅡa中部分肽段理化特性的计算和分析第141-144页
   ·肽段(2470)和肽段(1911)二级结构预测第144-145页
   ·肽段(2470)、肽段(2355)和肽段(1911)的螺旋轮第145-147页
 6 结论第147-113页
 参考文献第113-150页
第八章 、 白果蛋白生物活性的研究第150-173页
 1 材料与设备第150-151页
   ·样品第150页
   ·实验动物第150-151页
   ·试剂第151页
   ·仪器第151页
 2 实验方法第151-155页
   ·白果蛋白的抗氧化性能第151-154页
     ·对非脂质体系的抗氧化作用第152页
     ·白果蛋白抗生物氧化性能第152-154页
   ·果蝇生存实验第154-155页
   ·白果清蛋白耐缺氧实验第155页
 3 结果与分析第155-168页
   ·白果蛋白的抗氧化性能第155-165页
     ·白果蛋白在非脂质体系中的抗氧化作用第155-159页
     ·白果蛋白抗生物氧化性能第159-165页
   ·白果活性蛋白对果蝇寿命影响的研究第165-167页
   ·白果清蛋白对小鼠密闭缺氧存活时间的影响第167-168页
 4 结论第168页
 5 关于白果抗衰老机理的探讨第168-148页
 参考文献第148-173页
结论第173-175页
附录 攻读博士学位期间发表的论文第175-176页
致谢第176页

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