中文摘要 | 第1-8页 |
引言 | 第8-9页 |
第一篇 文献综述 | 第9-54页 |
1 基因免疫原理和研究进展 | 第10-23页 |
1.1 基因免疫发展历史 | 第10-11页 |
1.2 基因免疫的方法 | 第11-14页 |
1.3 基因免疫的机理 | 第14-18页 |
1.4 基因免疫的优越性 | 第18-20页 |
1.5 基因免疫的安全性 | 第20-21页 |
1.6 基因免疫在畜牧兽医中的应用 | 第21-23页 |
2 抑制素对动物生殖免疫调控的研究进展 | 第23-43页 |
2.1 抑制素的研究历史 | 第23-24页 |
2.2 抑制素分子结构特征 | 第24-25页 |
2.3 抑制素的分泌、转运与体内代谢 | 第25-26页 |
2.4 抑制素的生殖生理作用 | 第26-31页 |
2.5 抑制素的生殖生理作用机制 | 第31-34页 |
2.6 家畜抑制素免疫的意义 | 第34-37页 |
2.7 抑制素常规免疫的困境 | 第37-43页 |
3 BCL-2基因与卵泡细胞凋亡 | 第43-54页 |
3.1 细胞凋亡有关的基因 | 第44页 |
3.2 细胞凋亡信号传递途径 | 第44-45页 |
3.3 BCL-2与细胞凋亡 | 第45-51页 |
3.4 BCL-2基因应用展望 | 第51-54页 |
第二篇 实验研究 | 第54-100页 |
研究一、 抑制素基因克隆、表达和基因免疫 | 第54-55页 |
4 猪卵泡抑制素A亚基结构和理化特性分析 | 第55-70页 |
4.1 材料与方法 | 第56-58页 |
4.1.1 猪和其它几种家畜抑制素α蛋白序列 | 第56页 |
4.1.2 抑制素α亚基理化特性预测方法 | 第56页 |
4.1.3 抑制素抗原性预测和比较 | 第56页 |
4.1.4 抑制素α亚基与其它蛋白的同源性比较 | 第56-58页 |
4.2 结果 | 第58-65页 |
4.2.1 猪抑制素α亚基氨基酸组成 | 第58-59页 |
4.2.2 猪抑制素α亚基的二级结构 | 第59页 |
4.2.3 猪抑制素α亚基的理化特征 | 第59-60页 |
4.2.4 猪抑制素α亚基抗原性 | 第60页 |
4.2.5 猪抑制素α亚基与其它蛋白的同源性 | 第60-63页 |
4.2.5 拟重构的抑制素α亚基与其它蛋白质的同源性 | 第63-65页 |
4.2.7 拟克隆的抑制素α亚基及片段抗原性分析 | 第65页 |
4.3 结论与讨论 | 第65-70页 |
4.3.1 猪抑制素α亚基的同源性 | 第65-66页 |
4.3.2 抑制素α亚基的抗原性 | 第66页 |
4.3.3 抑制素免疫原的选择 | 第66-70页 |
5 猪卵泡抑制素A基因克隆和原核表达 | 第70-87页 |
5.1 材料和方法 | 第71-76页 |
5.1.1 材料和试剂 | 第71页 |
5.1.2 抑制素基因克隆和核酸序列分析 | 第71-73页 |
5.1.3 抑制素原核表达质粒pEINH构建 | 第73-74页 |
5.1.4 抑制素融合蛋白免疫反应性检测 | 第74-75页 |
5.1.5 抑制素在大肠杆菌中表达的最优诱导条件 | 第75-76页 |
5.1.6 抑制素α(1-32)与硫氧还蛋白融合蛋白的同源性和抗原性分析 | 第76页 |
5.2 结果 | 第76-83页 |
5.2.1 抑制素基因克隆与鉴定 | 第76页 |
5.2.2 抑制素基因与pET-32c重组 | 第76页 |
5.2.3 抑制素基因在大肠杆菌中的表达 | 第76-78页 |
5.2.4 抑制素模拟肽免疫反应性 | 第78页 |
5.2.5 抑制素α(1-32)与硫氧还蛋白融合蛋白的同源性 | 第78-82页 |
5.2.6 抑制素融合蛋白的理化特性分析 | 第82-83页 |
5.3 结论与讨论 | 第83-87页 |
5.3.1 抑制素基因克隆及融合蛋白同源性 | 第83-84页 |
5.3.2 抑制素融合蛋白的理化特性 | 第84页 |
5.3.3 抑制素重组基因的最佳诱导时间 | 第84-87页 |
6 抑制素基因免疫对小鼠生殖的影响 | 第87-100页 |
6.1 材料和方法 | 第88-90页 |
6.1.1 抑制素真核表达质粒的构建 | 第88页 |
6.1.2 实验动物及处理 | 第88-89页 |
6.1.3 繁殖性能测定 | 第89页 |
6.1.4 抑制素抗体测定 | 第89页 |
6.1.5 生殖激素测定 | 第89-90页 |
6.2 结果 | 第90-96页 |
6.2.1 抑制素真核表达质粒 | 第90页 |
6.2.2 基因免疫后雌鼠的一般情况 | 第90页 |
6.2.3 基因免疫后雌鼠抑制素抗体的P/N值 | 第90页 |
6.2.4 基因免疫对生殖激素的影响 | 第90-92页 |
6.2.5 抑制素基因免疫后初生仔鼠P/N值 | 第92-93页 |
6.2.6 基因免疫后雌鼠产仔情况 | 第93-94页 |
6.2.7 抑制素基因免疫阳性鼠产仔数、窝重和平均初生重与阴性鼠比较 | 第94页 |
6.2.8 雌鼠抑制素抗体水平与产仔数等的相关 | 第94-96页 |
6.3 结论与讨论 | 第96-100页 |
6.3.1 抑制素基因免疫可以使小鼠产生抑制素抗体 | 第96页 |
6.3.2 抑制素抗体与产仔数、初生重和窝重的相关性 | 第96-97页 |
6.3.3 抑制素基因免疫可以改变FSH的变化 | 第97页 |
6.3.4 进一步研究的两点建议 | 第97-100页 |
研究二、 BCL-2基因真核表达质粒构建和基因免疫 | 第100-124页 |
7 BCL-2基因真核表达质粒构建 | 第100-106页 |
7.1 材料和方法 | 第100-106页 |
7.1.1 材料和试剂 | 第100-102页 |
7.1.2 pCDCB1的制备 | 第101-102页 |
7.1.3 bcl-2基因真核表达质粒构建 | 第102页 |
7.2 结果 | 第102-103页 |
7.3 结论讨论 | 第103-106页 |
8 BCL-2基因对体外培养颗粒细胞的抗凋亡作用 | 第106-115页 |
8.1 材料和方法 | 第107页 |
8.1.1 材料和试剂 | 第107页 |
8.1.2 基因转染 | 第107页 |
8.1.3 细胞增殖的观察和记录 | 第107页 |
8.1.4 流式细胞仪检测细胞生长 | 第107页 |
8.1.5 统计分析 | 第107页 |
8.2. 结果 | 第107-112页 |
8.2.1 外源bcl-2转染对原代卵泡颗粒细胞增殖的影响 | 第107-108页 |
8.2.2 转染外源bcl-2对第2代卵泡颗粒细胞增殖的影响 | 第108-109页 |
8.2.3 转染外源bcl-2基因对细胞生长周期和凋亡的影响 | 第109-112页 |
8.3 结论与讨论 | 第112-115页 |
9 BCL-2基因免疫对小鼠生长和繁殖性能的影响 | 第115-124页 |
9.1 材料和方法 | 第116-117页 |
9.1.1 实验动物及处理 | 第116页 |
9.1.2 生长和繁殖性能测定 | 第116页 |
9.1.3 统计方法 | 第116-117页 |
9.2 结果 | 第117-121页 |
9.2.1 bcl-2基因免疫后小鼠生长情况 | 第117页 |
9.2.2 bcl-2基因免疫后小鼠生长模型 | 第117-119页 |
9.2.3 小鼠bcl-2基因免疫后性腺情况 | 第119-120页 |
9.2.4 bcl-2基因免疫后小鼠的产仔数 | 第120-121页 |
9.3 结论与讨论 | 第121-124页 |
9.3.1 小鼠bcl-2基因免疫后生长速度 | 第121页 |
9.3.2 小鼠bcl-2基因免疫后性腺没有显著的变化 | 第121-122页 |
9.3.3 小鼠bcl-2基因免疫后产仔数没有显著的变化 | 第122-124页 |
全文结论 | 第124-123页 |
英文摘要 | 第123-127页 |
附录 在读期间发表论文(著)及获奖 | 第127-129页 |
致谢 | 第129-135页 |