| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-11页 |
| 1 前言 | 第11-30页 |
| 1．1 研究的目的和意义 | 第11-12页 |
| 1．2 文献综述 | 第12-30页 |
| 1．2．1 植物遗传转化方法 | 第12-18页 |
| 1．2．1．1 载体介导法 | 第12-15页 |
| 1．2．1．2 直接转化法 | 第15-17页 |
| 1．2．1．3 种质系统介导法 | 第17-18页 |
| 1．2．2 抗真菌病植物基因工程研究进展 | 第18-24页 |
| 1．2．2．1 抗真菌病相关蛋白及相关基因 | 第18-19页 |
| 1．2．2．2 几丁质酶与真菌病害防治研究进展 | 第19-22页 |
| 1．2．2．3 葡聚糖酶与真菌病害防治研究进展 | 第22-24页 |
| 1．2．3 葡萄遗传转化研究进展 | 第24-30页 |
| 1．2．3．1 葡萄遗传转化途径 | 第25-27页 |
| 1．2．3．2 再生系统 | 第27-28页 |
| 1．2．3．3 葡萄遗传转化中存在的问题 | 第28-30页 |
| 2 材料与方法 | 第30-45页 |
| 2．1 植株再生体系的建立 | 第30-32页 |
| 2．1．1 试验材料 | 第30页 |
| 2．1．2 试验方法 | 第30-32页 |
| 2．1．2．1 愈伤组织再生体系的建立 | 第30-31页 |
| 2．1．2．2 悬浮培养体系的建立 | 第31-32页 |
| 2．2 根癌农杆菌介导的遗传转化 | 第32-40页 |
| 2．2．1 试验材料 | 第32-33页 |
| 2．2．1．1 植物材料 | 第32页 |
| 2．2．1．2 菌株及质粒 | 第32-33页 |
| 2．2．2 试验方法 | 第33-36页 |
| 2．2．2．1 非转化材料选择压力的确定 | 第33页 |
| 2．2．2．2 质粒pBch导入农杆菌 | 第33-34页 |
| 2．2．2．3 菌种活化 | 第34页 |
| 2．2．2．4 转化程序 | 第34页 |
| 2．2．2．5 影响遗传转化效率主要因素的探讨 | 第34-36页 |
| 2．2．2．6 转化后植株再生 | 第36页 |
| 2．2．3 转化后材料检测 | 第36-40页 |
| 2．2．3．1 GUS基因表达的检测 | 第36-37页 |
| 2．2．3．2 PCR检测 | 第37-40页 |
| 2．3 基因枪法转化葡萄的研究 | 第40-44页 |
| 2．3．1 试验材料 | 第40-41页 |
| 2．3．1．1 菌株与质粒 | 第41页 |
| 2．3．1．2 受体植物材料 | 第41页 |
| 2．3．1．3 酶与试剂 | 第41页 |
| 2．3．2 试验方法 | 第41-44页 |
| 2．3．2．1 烟草β-1，3葡聚糖酶基因表达载体的构建 | 第41-43页 |
| 2．3．2．2 基因枪法转化 | 第43-44页 |
| 2．3．2．3 转化体的PCR检测 | 第44页 |
| 2．4 统计分析方法 | 第44-45页 |
| 3 结果与分析 | 第45-68页 |
| 3．1 植株再生体系的建立 | 第45-51页 |
| 3．1．1 愈伤组织再生体系的建立 | 第45-47页 |
| 3．1．1．1 体细胞胚萌发阶段培养基的确立 | 第45-46页 |
| 3．1．1．2 生根培养基的确立 | 第46-47页 |
| 3．1．2 悬浮培养体系的建立 | 第47-51页 |
| 3．1．2．1 细胞的悬浮培养 | 第47页 |
| 3．1．2．2 体细胞胚胎发生 | 第47-48页 |
| 3．1．2．3 再生植株的产生 | 第48-49页 |
| 3．1．2．4 胚性悬浮培养细胞生长曲线 | 第49-51页 |
| 3．2 根癌农杆菌介导的遗传转化 | 第51-63页 |
| 3．2．1 非转化材料选择压力的确定 | 第51-54页 |
| 3．2．1．1 抗生素筛选种类及浓度的确立 | 第51-53页 |
| 3．2．1．2 最佳筛选方式的确立 | 第53-54页 |
| 3．2．2 影响遗传转化效率主要因素的探讨 | 第54-59页 |
| 3．2．2．1 不同菌株对转化的影响 | 第54-55页 |
| 3．2．2．2 影响转化的几个主要因子的正交试验 | 第55-56页 |
| 3．2．2．3 酚类化合物对转化的影响 | 第56-57页 |
| 3．2．2．4 负压处理对转化的影响 | 第57-59页 |
| 3．2．3 转化后植株再生 | 第59-61页 |
| 3．2．3．1 防止愈伤组织褐化的研究 | 第59-61页 |
| 3．2．4 转基因材料检测 | 第61-63页 |
| 3．2．4．1 GUS瞬间表达率的检测 | 第61-62页 |
| 3．2．4．2 PCR检测 | 第62-63页 |
| 3．3 基因枪法对葡萄的转化 | 第63-68页 |
| 3．3．1 β-1,3glu基因的载体构建 | 第63-66页 |
| 3．3．1．1 中间载体pUCG的构建 | 第63-65页 |
| 3．3．1．2 中间表达载体pMMG的构建 | 第65-66页 |
| 3．3．2 转化体的PCR检测 | 第66-68页 |
| 4 讨论 | 第68-74页 |
| 5 结论 | 第74-76页 |
| 参考文献 | 第76-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |
| 图版及图版说明 | 第88-94页 |