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人羊膜上皮细胞横向分化为肝细胞样细胞及脾内移植的初步研究

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-22页
前言第22-26页
第一章 人羊膜上皮细胞的分离培养及其干细胞生物学特征的鉴定人胚胎干细胞自发向造血细胞分化的研究第26-40页
 1. 材料和方法第26-31页
   ·分子生物学试剂第26-27页
   ·细胞生物学试剂第27页
   ·主要仪器第27页
   ·标本来源第27页
   ·研究方法第27-31页
     ·人羊膜上皮细胞的分离及培养第27-28页
     ·人羊膜上皮细胞干细胞特征的鉴定第28-30页
     ·腺相关病毒感染人羊膜上皮细胞第30-31页
   ·统计学方法第31页
 2. 结果第31-33页
   ·人羊膜上皮细胞的培养第32页
   ·人羊膜上皮细胞细胞生物学特性的鉴定第32页
   ·人羊膜上皮细胞腺相关病毒的感染第32-33页
 3. 讨论第33-36页
 4. 结论第36-37页
 彩色附图第37-40页
第二章 人羊膜上皮细胞向肝脏细胞样细胞诱导分化的初步研究第40-59页
 1. 材料与方法第40-45页
   ·材料与试剂第40-41页
   ·主要仪器第41页
   ·细胞培养第41页
   ·体外诱导人羊膜上皮细胞向肝脏细胞样细胞分化第41-44页
   ·半定量PCR检测功能基因随时间改变而变化的趋势第44-45页
   ·流式细胞技术检测分化效率对诱导分化体系进行优化第45页
   ·原代及体外传代两代的人羊膜上皮细胞诱导后ALB基因表达的比较第45页
   ·统计学方法第45页
 2. 结果第45-48页
   ·细胞形态第45-46页
   ·肝细胞样细胞相关转录因子及功能基因的表达第46页
   ·诱导后的人羊膜上皮细胞表达AFP,ALB,CK18等肝细胞特异性的细胞表面标记第46页
   ·诱导过程中肝细胞ablumin,CYP3A4,CYP1A2等功能基因随诱导天数的增加其表达逐渐增强第46-47页
   ·诱导中的hEACs在不同诱导时间表达AFP,ALB,CK18等肝细胞特异性的细胞表面标第47页
   ·诱导过样中的Dex,HGF,IGF等细胞因子的剂量依赖性作用第47页
   ·不同代数体外培养的人羊膜上皮细胞诱导后均表达albumin基因第47-48页
 3. 讨论第48-50页
 4. 结论第50-51页
 彩色附图第51-59页
第三章 人羊膜上皮细胞脾移植治疗肝损伤裸小鼠的实验研究第59-74页
 1. 材料和方法第60-64页
   ·材料与试剂第60页
   ·主要仪器第60-61页
   ·细胞培养及AAV-GFP感染效率检测第61页
   ·体外诱导hAECs细胞向肝细胞样细胞分化第61页
   ·肝切除动物模型的制备及移植第61页
   ·实验分组第61-62页
   ·移植效果检测第62-63页
   ·移植细胞体内示踪第63页
   ·统计分析第63-64页
 2. 结果第64-66页
   ·实验动物存活情况第64页
   ·标本的大体观察第64页
   ·组织学观察第64页
   ·免疫荧光染色第64-65页
   ·血清肝功能检测第65页
   ·裸鼠血中人白蛋白检测第65-66页
 3. 讨论第66-69页
 4. 结论第69-70页
 彩色附图第70-74页
小结第74-75页
参考文献第75-85页
综述第85-121页
致谢第121-122页
在读博士期间发表的论文目录第122-123页
个人简历第123页

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