缩略语表 | 第1-9页 |
中文摘要 | 第9-12页 |
ABSTRACT | 第12-17页 |
文献回顾 | 第17-39页 |
正文 | 第39-84页 |
1 实验材料 | 第39-43页 |
·细胞系 | 第39页 |
·质粒与菌种 | 第39-40页 |
·病毒 | 第40页 |
·实验动物 | 第40页 |
·主要试剂 | 第40-41页 |
·主要仪器 | 第41-43页 |
2 实验方法 | 第43-57页 |
·siRNA的设计 | 第43页 |
·病毒感染和细胞转染 | 第43-44页 |
·siRNA抗病毒效果的检测 | 第44-45页 |
·细胞总RNA提取 | 第45-46页 |
·RT-PCR | 第46-47页 |
·实时定量PCR | 第47页 |
·Western blot检测细胞中病毒抗原量 | 第47-48页 |
·间接ELISA检测培养物上清中病毒抗原量 | 第48-49页 |
·间接免疫荧光检测细胞内病毒抗原 | 第49页 |
·流式细胞术(FCM)分析 | 第49-50页 |
·3G1scFv与3G1scFv-C_k-tP表达载体的构建 | 第50-51页 |
·单链抗体及其融合蛋白的表达、纯化与浓缩 | 第51-52页 |
·BCA法蛋白定量 | 第52页 |
·单链抗体与及其融合蛋白的功能检测 | 第52-53页 |
·3G1scFv-C_k-tP结合以及体外靶向转运siRNA能力的检测 | 第53-54页 |
·MTT测定细胞生长 | 第54-55页 |
·3G1scFv-C_k-tP体外靶向转运siRNA的抗病毒效果的检测 | 第55页 |
·汉坦病毒致病动物模型的建立 | 第55页 |
·3G1scFv-C_k-tP体内靶向转运siRNA能力的检测 | 第55页 |
·动物标本的收集和处理 | 第55页 |
·小鼠血清IFN-α水平的检测 | 第55-56页 |
·统计学处理 | 第56-57页 |
3 实验结果 | 第57-80页 |
·siRNAs对病毒RNA水平的影响 | 第57-58页 |
·siRNAs对病毒抗原量的影响 | 第58-60页 |
·3G1scFv与3G1scFv-C_k-tP表达载体的构建 | 第60页 |
·单链抗体及其融合蛋白的表达、纯化和鉴定 | 第60-61页 |
·单链抗体及其融合蛋白的抗原结合活性分析 | 第61-63页 |
·单链抗体及其融合蛋白的内化活性分析 | 第63-65页 |
·3G1scFv-C_k-tP对siRNA的结合与转运 | 第65-69页 |
·3G1scFv-C_k-tP/siRNA对细胞生长的影响 | 第69页 |
·3G1scFv-C_k-tP靶向转运siRNA在体外的抗病毒效果 | 第69-72页 |
·siRNAs在HV感染鼠脑内的靶向运送 | 第72-75页 |
·3G1scFv-C_k-tP靶向转运siRNA在体内的抗病毒效果 | 第75-80页 |
4 讨论 | 第80-84页 |
·汉坦病毒感染与RNAi治疗 | 第80-81页 |
·单链抗体-鱼精蛋白片段融合蛋白靶向转运治疗性RNAi | 第81-84页 |
小结 | 第84-85页 |
参考文献 | 第85-108页 |
个人简历和研究成果 | 第108-109页 |
致谢 | 第109-110页 |