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抗体介导的siRNA靶向运输并抑制汉坦病毒复制的研究

缩略语表第1-9页
中文摘要第9-12页
ABSTRACT第12-17页
文献回顾第17-39页
正文第39-84页
 1 实验材料第39-43页
   ·细胞系第39页
   ·质粒与菌种第39-40页
   ·病毒第40页
   ·实验动物第40页
   ·主要试剂第40-41页
   ·主要仪器第41-43页
 2 实验方法第43-57页
   ·siRNA的设计第43页
   ·病毒感染和细胞转染第43-44页
   ·siRNA抗病毒效果的检测第44-45页
   ·细胞总RNA提取第45-46页
   ·RT-PCR第46-47页
   ·实时定量PCR第47页
   ·Western blot检测细胞中病毒抗原量第47-48页
   ·间接ELISA检测培养物上清中病毒抗原量第48-49页
   ·间接免疫荧光检测细胞内病毒抗原第49页
   ·流式细胞术(FCM)分析第49-50页
   ·3G1scFv与3G1scFv-C_k-tP表达载体的构建第50-51页
   ·单链抗体及其融合蛋白的表达、纯化与浓缩第51-52页
   ·BCA法蛋白定量第52页
   ·单链抗体与及其融合蛋白的功能检测第52-53页
   ·3G1scFv-C_k-tP结合以及体外靶向转运siRNA能力的检测第53-54页
   ·MTT测定细胞生长第54-55页
   ·3G1scFv-C_k-tP体外靶向转运siRNA的抗病毒效果的检测第55页
   ·汉坦病毒致病动物模型的建立第55页
   ·3G1scFv-C_k-tP体内靶向转运siRNA能力的检测第55页
   ·动物标本的收集和处理第55页
   ·小鼠血清IFN-α水平的检测第55-56页
   ·统计学处理第56-57页
 3 实验结果第57-80页
   ·siRNAs对病毒RNA水平的影响第57-58页
   ·siRNAs对病毒抗原量的影响第58-60页
   ·3G1scFv与3G1scFv-C_k-tP表达载体的构建第60页
   ·单链抗体及其融合蛋白的表达、纯化和鉴定第60-61页
   ·单链抗体及其融合蛋白的抗原结合活性分析第61-63页
   ·单链抗体及其融合蛋白的内化活性分析第63-65页
   ·3G1scFv-C_k-tP对siRNA的结合与转运第65-69页
   ·3G1scFv-C_k-tP/siRNA对细胞生长的影响第69页
   ·3G1scFv-C_k-tP靶向转运siRNA在体外的抗病毒效果第69-72页
   ·siRNAs在HV感染鼠脑内的靶向运送第72-75页
   ·3G1scFv-C_k-tP靶向转运siRNA在体内的抗病毒效果第75-80页
 4 讨论第80-84页
   ·汉坦病毒感染与RNAi治疗第80-81页
   ·单链抗体-鱼精蛋白片段融合蛋白靶向转运治疗性RNAi第81-84页
小结第84-85页
参考文献第85-108页
个人简历和研究成果第108-109页
致谢第109-110页

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