| 中文摘要 | 第1-6页 |
| 英文摘要 | 第6-11页 |
| 1.前言 | 第11-25页 |
| ·禽传染性支气管炎研究进展 | 第11-12页 |
| ·禽传染性支气管炎的危害 | 第11页 |
| ·禽传染性支气管炎的流行与分布 | 第11-12页 |
| ·禽传染性支气管炎病毒的分子生物学研究进展 | 第12-16页 |
| ·禽传染性支气管炎病毒的基因组结构 | 第12-13页 |
| ·禽传染性支气管炎病毒的主要结构蛋白 | 第13-16页 |
| ·禽传染性支气管炎病毒核酸疫苗研究进展 | 第16-20页 |
| ·真核表达载体VR1020和pVAX1的研究和应用概况 | 第20-23页 |
| ·本研究的前期工作基础 | 第23-24页 |
| ·存在的问题 | 第24页 |
| ·本研究的目的意义和创新点 | 第24-25页 |
| 2.禽传染性支气管炎病毒S1、M、N基因真核表达载体VR1020的构建与鉴定 | 第25-41页 |
| ·材料 | 第25-26页 |
| ·载体、模板、基因工程菌及细胞株 | 第25页 |
| ·主要生化试剂 | 第25页 |
| ·培养基和主要溶液的配制 | 第25-26页 |
| ·主要仪器设备与实验耗材 | 第26页 |
| ·方法 | 第26-37页 |
| ·技术路线 | 第26-27页 |
| ·S1、M、N基因的RT-PCR扩增 | 第27-30页 |
| ·N基因的定点突变处理 | 第30-34页 |
| ·S1、M、N基因VR1020真核表达质粒的构建 | 第34页 |
| ·S1、M、N基因VR1020重组质粒的鉴定 | 第34-35页 |
| ·真核表达质粒的表达检测 | 第35-37页 |
| ·结果 | 第37-41页 |
| ·S1、M、N基因的RT-PCR扩增结果 | 第37页 |
| ·N基因的定点突变结果 | 第37-39页 |
| ·S1、M、N基因VR1020重组质粒的鉴定 | 第39页 |
| ·真核表达质粒的表达检测结果 | 第39-41页 |
| 3.禽传染性支气管炎病毒S1、M、N基因真核表达载体pVAX1的构建与鉴定 | 第41-47页 |
| ·材料 | 第41页 |
| ·方法 | 第41-44页 |
| ·技术路线 | 第41页 |
| ·S1、M、N基因的RT-PCR扩增 | 第41-42页 |
| ·S1、M、N基因pVAX1真核表达质粒的构建 | 第42-43页 |
| ·S1、S1、M、N基因pVAX1重组质粒的鉴定 | 第43-44页 |
| ·真核表达质粒的表达检测 | 第44页 |
| ·结果 | 第44-47页 |
| ·S1、M、N基因的RT-PCR扩增结果 | 第44-45页 |
| ·S1、M、N基因pVAX1重组质粒的鉴定 | 第45页 |
| ·真核表达质粒的表达检测结果 | 第45-47页 |
| 4.禽传染性支气管炎病毒S1、M、N基因DNA疫苗的制备与免疫原性研究 | 第47-57页 |
| ·材料 | 第47-48页 |
| ·质粒、攻毒用毒株、实验动物 | 第47页 |
| ·主要生化试剂 | 第47页 |
| ·主要的配制试剂 | 第47-48页 |
| ·主要仪器 | 第48页 |
| ·方法 | 第48-51页 |
| ·质粒的大量制备与检测 | 第48-49页 |
| ·脂质体的制备 | 第49页 |
| ·DNA疫苗的配制 | 第49-50页 |
| ·实验动物分组及免疫 | 第50页 |
| ·特异性IBV血清抗体的检测 | 第50-51页 |
| ·CD_4+、CD_8+T淋巴细胞亚类检测 | 第51页 |
| ·攻毒实验 | 第51页 |
| ·结果 | 第51-57页 |
| ·质粒的大量制备与检测结果 | 第51-52页 |
| ·脂质体及疫苗的制备结果 | 第52页 |
| ·特异性IBV血清抗体的检测结果 | 第52-53页 |
| ·CD_4+、CD_8+T淋巴细胞亚类检测结果 | 第53-56页 |
| ·攻毒实验结果 | 第56-57页 |
| 5.讨论 | 第57-64页 |
| ·目的基因的选择 | 第57页 |
| ·载体的选择 | 第57-58页 |
| ·真核表达质粒的转染 | 第58页 |
| ·真核表达质粒表达产物的检测 | 第58-59页 |
| ·IBV DNA疫苗组合 | 第59页 |
| ·关于真核表达载体VR1020和pVAX1的比较 | 第59-60页 |
| ·脂质体的佐剂作用 | 第60-61页 |
| ·关于DNA疫苗的免疫原性 | 第61-62页 |
| ·攻毒保护实验 | 第62-64页 |
| 6.结论 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 附录1:英汉缩略名词对照表 | 第73-74页 |
| 附录2:N基因定点突变后的测序结果 | 第74-75页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第75页 |
