中文摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-8页 |
第一章 文献综述 | 第8-17页 |
1.IFN和IFN系统 | 第8-11页 |
·IFN的分类以及基本性质 | 第8-9页 |
·IFN的生物学活性 | 第9-10页 |
·干扰素的分子结构 | 第10-11页 |
2.鱼类IFN的发现和鉴定 | 第11-15页 |
·鱼类IFN系统研究历程 | 第11-12页 |
·鱼类IFN及IFN系统 | 第12-14页 |
·鱼类IFN系统的其他相关基因 | 第14-15页 |
·鱼类IFN系统和鱼类病毒病 | 第15页 |
3.结语 | 第15-17页 |
第二章 斑点叉尾鮰IFN-α基因的克隆与序列分析 | 第17-31页 |
1 材料 | 第17-19页 |
·试验动物 | 第17页 |
·菌株和载体 | 第17页 |
·试剂 | 第17-18页 |
·溶液配制 | 第18-19页 |
·主要仪器设备 | 第19页 |
2 方法 | 第19-24页 |
·斑点叉尾鮰外周血淋巴细胞的分离与培养 | 第19页 |
·斑点叉尾鮰外周血淋巴细胞总RNA的提取 | 第19-20页 |
·RT-PCR扩增斑点叉尾鮰IFN-α基因 | 第20-21页 |
·斑点叉尾鮰IFN-α基因克隆与测序 | 第21-23页 |
·斑点叉尾鮰IFN-α基因生物信息学分析 | 第23-24页 |
3 结果 | 第24-29页 |
·斑点叉尾鮰IFN-α基因RT-PCR产物 | 第24-25页 |
·斑点叉尾鲴IFN-α基因重组质粒的双酶切电泳和PCR鉴定 | 第25页 |
·斑点叉尾鮰IFN-α基因重组质粒的序列测定 | 第25-26页 |
·斑点叉尾鮰IFN-α基因生物信息学分析 | 第26-29页 |
4 讨论 | 第29-31页 |
·淋巴细胞培养和斑点叉尾鮰IFN-α的诱导 | 第29页 |
·高纯度RNA的获得和防止RAN的降解 | 第29-30页 |
·鱼类IFN-α的相关研究 | 第30-31页 |
第三章 斑点叉尾鮰IFN-α成熟蛋白的原核表达及其生物活性检测 | 第31-48页 |
1 材料 | 第31-34页 |
·菌株和质粒 | 第31页 |
·试剂 | 第31页 |
·IFN抗病毒检测用鸡胚、细胞和病毒 | 第31-32页 |
·溶液配制 | 第32-34页 |
·主要仪器设备 | 第34页 |
2 方法 | 第34-39页 |
·斑点叉尾鮰IFN-α成熟蛋白基因扩增与克隆载体的构建 | 第34-35页 |
·斑点叉尾鮰IFN-α成熟蛋白基因重组表达质粒的构建 | 第35页 |
·斑点叉尾鮰IFN-α成熟蛋白基因重组表达质粒的诱导表达 | 第35-36页 |
·斑点叉尾鮰IFN-α成熟蛋白原核表达条件的优化 | 第36页 |
·斑点叉尾鮰IFN-α重组成熟蛋白的Western-blot鉴定 | 第36-37页 |
·斑点叉尾鮰IFN-α重组成熟蛋白生物学活性测定 | 第37-39页 |
3 结果 | 第39-45页 |
·斑点叉尾鮰IFN-α成熟蛋白基因扩增及克隆载体的构建 | 第39-40页 |
·斑点叉尾鮰IFN-α成熟蛋白基因原核表达质粒的构建 | 第40页 |
·斑点叉尾鮰IFN-α重组成熟蛋白的诱导表达和可溶性检测 | 第40-41页 |
·斑点叉尾鮰IFN-α重组成熟蛋白原核表达条件的优化 | 第41-43页 |
·斑点叉尾鮰IFN-α重组成熟蛋白Western-blot鉴定 | 第43页 |
·斑点叉尾鮰IFN-α重组成熟蛋白的生物学活性检测结果 | 第43-45页 |
4 讨论 | 第45-48页 |
·斑点叉尾鮰IFN-α重组成熟蛋白表达载体的选择 | 第45页 |
·斑点叉尾鮰IFN-α重组成熟蛋白表达条件的优化 | 第45-46页 |
·斑点叉尾鮰IFN-α重组成熟蛋白的纯化 | 第46页 |
·斑点叉尾鮰IFN-α重组成熟蛋白的应用前景 | 第46-48页 |
结论 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-53页 |
致谢 | 第53-54页 |
附录 | 第54页 |