| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 文献综述 | 第11-26页 |
| 第一章 子宫内膜基质细胞体外培养的研究进展 | 第11-18页 |
| ·子宫内膜的概况 | 第11-14页 |
| ·子宫内膜的一般结构 | 第11页 |
| ·子宫内膜的功能 | 第11-14页 |
| ·子宫内膜基质细胞体外培养 | 第14-16页 |
| ·子宫内膜基质细胞体外培养的发展概况 | 第14页 |
| ·子宫内膜基质细胞体外培养的应用 | 第14-15页 |
| ·子宫内膜基质细胞的形态特性 | 第15页 |
| ·子宫内膜基质细胞的染色判定 | 第15页 |
| ·体外培养的子宫内膜基质细胞的生长特性 | 第15-16页 |
| ·雌激素和孕激素对子宫内膜基质细胞增殖的影响及作用机制 | 第16-18页 |
| ·雌激素的作用机制 | 第16页 |
| ·孕激素作用的机制 | 第16-18页 |
| 第二章 细胞永生化的研究进展 | 第18-26页 |
| ·细胞的衰老、危机和永生化 | 第18-19页 |
| ·衰老 | 第18页 |
| ·危机 | 第18-19页 |
| ·细胞永生化 | 第19页 |
| ·促使细胞永生化的方法 | 第19-21页 |
| ·病毒 | 第19-21页 |
| ·放射性因素 | 第21页 |
| ·P53 突变体 | 第21页 |
| ·端粒酶 | 第21页 |
| ·端粒和端粒酶与细胞永生化的关系 | 第21-26页 |
| ·端粒和端粒酶的发现与组成 | 第22-23页 |
| ·端粒和端粒酶功能 | 第23-24页 |
| ·端粒酶在细胞永生化中的优越性 | 第24-26页 |
| 试验研究 | 第26-51页 |
| 第三章 山羊子宫内膜基质细胞的分离培养及其鉴定 | 第26-33页 |
| ·材料与方法 | 第26-27页 |
| ·试验动物 | 第26页 |
| ·基础培养基 | 第26页 |
| ·血清 | 第26页 |
| ·缓冲液 | 第26页 |
| ·酶 | 第26-27页 |
| ·台盼兰染液 | 第27页 |
| ·抗生素液 | 第27页 |
| ·免疫组织化学试剂 | 第27页 |
| ·主要仪器设备 | 第27页 |
| ·方法 | 第27-29页 |
| ·山羊子宫的采取 | 第27页 |
| ·山羊子宫内膜基质细胞分离培养 | 第27-28页 |
| ·原代细胞的培养 | 第28页 |
| ·ESCs 细胞的传代培养 | 第28页 |
| ·ESCs 生长曲线的测定 | 第28页 |
| ·ESCs 角蛋白和波形蛋白的鉴定 | 第28-29页 |
| ·结果 | 第29-30页 |
| ·ESCs 的形态和特征 | 第29页 |
| ·细胞生长曲线 | 第29-30页 |
| ·ESCs 波形蛋白和角蛋白的鉴定 | 第30页 |
| ·讨论 | 第30-31页 |
| ·不同分离方法对子宫内膜基质细胞分离的结果 | 第30-31页 |
| ·子宫内膜基质细胞的染色判定 | 第31页 |
| ·山羊ESCs 生长曲线的测定 | 第31页 |
| ·小结 | 第31-33页 |
| 第四章 hTERT 基因转染山羊子宫内膜基质细胞 | 第33-43页 |
| ·材料 | 第33页 |
| ·细胞与pCI-neo-hTERT 转化的感受态菌DH5α | 第33页 |
| ·工具酶和试剂 | 第33页 |
| ·主要仪器与设备 | 第33页 |
| ·方法与步骤 | 第33-38页 |
| ·溶液配制 | 第33-34页 |
| ·pCI-neo-hTERT 质粒的提取与鉴定 | 第34-36页 |
| ·pCI-neo-hTERT 质粒转染山羊子宫内膜基质细胞 | 第36-38页 |
| ·结果 | 第38-40页 |
| ·pCI-neo-hTERT 质粒提取和酶切鉴定 | 第38页 |
| ·pCI-neo-hTERT 质粒纯度和浓度 | 第38页 |
| ·新霉素（G418）对山羊子宫内膜基质细胞最佳筛选浓度的确定 | 第38-39页 |
| ·pCI-neo-hTERT 转染后阳性克隆的获得 | 第39页 |
| ·pCI-neo-hTERT 转染后细胞形态和特征 | 第39页 |
| ·阳性细胞的纯化及传代 | 第39-40页 |
| ·讨论 | 第40-42页 |
| ·小结 | 第42-43页 |
| 第五章 转染后子宫内膜基质细胞的理化性质鉴定 | 第43-51页 |
| ·材料 | 第43页 |
| ·工具酶和试剂 | 第43页 |
| ·主要仪器及设备 | 第43页 |
| ·方法与步骤 | 第43-46页 |
| ·免疫组化法检测端粒酶催化亚基（hTERT） | 第43-44页 |
| ·PCR-ELISA 法分析细胞端粒酶活性 | 第44-45页 |
| ·转染山羊ESCs 波形蛋白和角蛋白鉴定（具体方法如5.2.1） | 第45页 |
| ·转染细胞生长曲线的测定 | 第45页 |
| ·软琼脂克隆试验 | 第45-46页 |
| ·性腺激素对转染后子宫内膜基质细胞的刺激作用 | 第46页 |
| ·结果 | 第46-49页 |
| ·转染细胞的hTERT 免疫细胞化学染色鉴定 | 第46页 |
| ·转染后细胞的端粒酶活性检测 | 第46-47页 |
| ·转染后ESCs 的波形蛋白和角蛋白鉴定 | 第47页 |
| ·转染后细胞的生长曲线 | 第47页 |
| ·软琼脂克隆试验结果 | 第47-48页 |
| ·性腺激素对转染后子宫内膜基质细胞的刺激作用 | 第48-49页 |
| ·讨论 | 第49-50页 |
| ·小结 | 第50-51页 |
| 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 作者简介 | 第61页 |
