| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-12页 |
| 文献综述 | 第12-32页 |
| 第一章 哺乳动物ES 细胞的研究进展及应用前景 | 第12-32页 |
| ·ES 细胞的研究概况 | 第12-18页 |
| ·小鼠ES 细胞的研究概况 | 第13-14页 |
| ·人ES 细胞研究概况 | 第14-15页 |
| ·家畜ES 细胞研究概况 | 第15-18页 |
| ·ES 细胞生物学特性 | 第18-20页 |
| ·全能性 | 第18页 |
| ·无限增殖能力 | 第18页 |
| ·可操作性 | 第18-19页 |
| ·ES 细胞表面抗原 | 第19页 |
| ·OCT-4 活性 | 第19-20页 |
| ·Nanog 活性 | 第20页 |
| ·维持ES 细胞多能性的机制 | 第20-25页 |
| ·外源性信号分子对于ES 细胞多能性的作用 | 第20-21页 |
| ·ES 细胞多能性的转录因子调控 | 第21-24页 |
| ·ES 多能性的调控网络 | 第24-25页 |
| ·影响ES 细胞分离克隆的因素 | 第25-28页 |
| ·胚胎质量及胚胎类型 | 第25页 |
| ·培养基 | 第25页 |
| ·饲养层 | 第25-26页 |
| ·条件培养基 | 第26页 |
| ·细胞因子及其他添加物 | 第26-28页 |
| ·ES 细胞的鉴定方法 | 第28-29页 |
| ·形态学鉴定 | 第28页 |
| ·碱性磷酸酶(alkaline phosphatase，AKP)活性 | 第28页 |
| ·转录因子OCT-4 及Nanog 的表达检测 | 第28页 |
| ·ES 细胞特异性表面抗原的表达 | 第28页 |
| ·核型分析 | 第28-29页 |
| ·体外分化能力鉴定 | 第29页 |
| ·体内分化能力鉴定 | 第29页 |
| ·嵌合体试验鉴定 | 第29页 |
| ·ES 细胞的应用前景 | 第29-30页 |
| ·应用于基因靶向技术生产转基因动物 | 第29-30页 |
| ·生产克隆动物 | 第30页 |
| ·发育生物学研究的理想体外模型 | 第30页 |
| ·细胞、组织和器官的修复 | 第30页 |
| ·药理学研究的动物模型 | 第30页 |
| ·ES 细胞研究面临的难题与挑战 | 第30-32页 |
| 试验部分 | 第32-49页 |
| 第二章 KSR 和FBS 对昆白小鼠ES 分离、传代的影响 | 第32-40页 |
| ·材料与方法 | 第32-34页 |
| ·实验动物 | 第32页 |
| ·实验材料 | 第32-34页 |
| ·试验方法 | 第34-35页 |
| ·小鼠胎儿成纤维细胞（MEF）的分离和培养 | 第34页 |
| ·MEF 的传代及饲养层制备 | 第34页 |
| ·昆白小鼠胚胎的获取与培养 | 第34-35页 |
| ·小鼠ES 细胞的传代 | 第35页 |
| ·小鼠ES 细胞的鉴定 | 第35页 |
| ·数据处理 | 第35-36页 |
| ·结果 | 第36-37页 |
| ·讨论 | 第37-40页 |
| 第三章 绵羊类ES 细胞分离、克隆 | 第40-49页 |
| ·材料与方法 | 第40-41页 |
| ·实验动物 | 第40页 |
| ·试验材料 | 第40-41页 |
| ·试验方法 | 第41-42页 |
| ·绵羊胎儿成纤维细胞（SEF）和MEF 的分离和培养 | 第41页 |
| ·SEF 和MEF 饲养层的制备 | 第41页 |
| ·昆白小鼠胚胎的获取与培养 | 第41页 |
| ·小鼠ES 细胞条件培养基的制备 | 第41页 |
| ·绵羊胚胎的获取与培养 | 第41页 |
| ·绵羊内细胞团的分离、传代 | 第41-42页 |
| ·绵羊类ES 细胞的鉴定 | 第42页 |
| ·数据处理 | 第42页 |
| ·结果 | 第42-45页 |
| ·绵羊胚胎的形态特征 | 第42页 |
| ·绵羊内细胞团的分离、培养与观察 | 第42-43页 |
| ·胚胎发育阶段对绵羊ES 细胞分离、克隆的影响 | 第43页 |
| ·不同饲养层对绵羊ES 细胞分离、克隆的影响 | 第43-44页 |
| ·不同培养体系对绵羊ES 细胞分离、克隆的影响 | 第44-45页 |
| ·绵羊ES 细胞的鉴定 | 第45页 |
| ·讨论 | 第45-49页 |
| ·胚胎发育不同阶段对绵羊类ES 细胞分离、克隆的影响 | 第45-46页 |
| ·不同饲养层对绵羊类ES 细胞分离、克隆的影响 | 第46-47页 |
| ·KSR 对绵羊类ES 细胞分离、克隆的影响 | 第47页 |
| ·ESCCM 对绵羊类ES 细胞分离、克隆的影响 | 第47-49页 |
| 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-60页 |
| 附图 | 第60-64页 |
| 缩略语表 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 作者简介 | 第66页 |
