摘要 | 第1-8页 |
Summary | 第8-11页 |
第一部分 文献综述 | 第11-24页 |
第一章 细胞因子概述 | 第11-24页 |
·猪干扰素研究进展 | 第12-17页 |
·干扰素的发现及命名 | 第12-13页 |
·IFN-α的产生 | 第13页 |
·IFN-α的理化性质 | 第13-14页 |
·IFN-α的生物学与免疫学活性 | 第14-16页 |
·IFN-α的应用 | 第16-17页 |
·猪 a 干扰素研究进展 | 第17-20页 |
·猪干扰素简介 | 第17-18页 |
·猪α-干扰素理化性质及结构特点 | 第18-19页 |
·猪α-干扰素的基因工程 | 第19页 |
·猪α-干扰素实际应用及前景展望 | 第19-20页 |
·抗体的研究进展 | 第20-23页 |
·单克隆抗体 | 第20-21页 |
·基因工程抗体 | 第21-23页 |
·本试验的目的与意义 | 第23-24页 |
第二部分 试验研究 | 第24-58页 |
第二章 猪 IFN-α1 重组蛋白的原核表达、纯化与鉴定 | 第24-32页 |
·实验材料 | 第24-25页 |
·菌种和试剂 | 第24页 |
·仪器与设备 | 第24页 |
·溶液的配置 | 第24-25页 |
·培养基 | 第25页 |
·实验方法 | 第25-28页 |
·重组质粒的诱导表达 | 第25-26页 |
·表达产物的检测 | 第26-28页 |
·结果 | 第28-30页 |
·表达产物SDS-PAGE 分析 | 第28-29页 |
·重组蛋白纯化后SDS-PAGE 分析 | 第29页 |
·表达产物Wetern-blotting 分析 | 第29-30页 |
·纯化重组蛋白浓度测定 | 第30页 |
·讨论 | 第30-32页 |
第三章 pIFN-α 单克隆抗体的制备及鉴定 | 第32-57页 |
·材料 | 第32-36页 |
·试剂 | 第32页 |
·重组载体与抗原 | 第32页 |
·实验动物 | 第32-33页 |
·骨髓瘤细胞 | 第33页 |
·主要仪器 | 第33页 |
·主要培养液及缓冲液 | 第33-36页 |
·方法 | 第36-44页 |
·pIFN-α抗体ELISA 检测方法的建立 | 第36页 |
·动物免疫及抗体效价测定 | 第36-38页 |
·杂交瘤细胞的制备 | 第38-40页 |
·pIFN-α单克隆抗体腹水制备 | 第40-41页 |
·杂交瘤细胞的冻存 | 第41页 |
·单克隆抗体生物学特性鉴定 | 第41-44页 |
·结果 | 第44-52页 |
·动物免疫与抗体效价测定结果 | 第44-48页 |
·单克隆抗体生物学特性鉴定 | 第48-52页 |
·讨论 | 第52-57页 |
·抗原的制备 | 第52页 |
·动物免疫 | 第52-53页 |
·细胞融合过程中应注意的问题 | 第53页 |
·杂交瘤细胞株的筛选 | 第53-54页 |
·腹水制备 | 第54页 |
·单克隆抗体的纯化 | 第54-55页 |
·杂交瘤细胞的体外冻存及反复传代稳定性试验 | 第55-56页 |
·单克隆抗体亚类 | 第56页 |
·杂交瘤细胞的染色体 | 第56-57页 |
第四章 结论 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-63页 |
致谢 | 第63-64页 |
导师简介 | 第64-65页 |
作者简介 | 第65页 |