应用蛋白质工程技术改变嗜热酯酶的底物选择性
| 内容提要 | 第1-7页 |
| 第一章 前言 | 第7-19页 |
| ·嗜热酶 | 第7-8页 |
| ·嗜热酶简介 | 第7-8页 |
| ·嗜热酶的优势 | 第8页 |
| ·酯酶简介 | 第8-11页 |
| ·酯酶及其分类 | 第8-10页 |
| ·超嗜热酯酶APE1547 | 第10-11页 |
| ·酶基本特性的改造 | 第11-14页 |
| ·提高酶的稳定性 | 第11-12页 |
| ·提高酶的活性 | 第12页 |
| ·增强酶的底物选择性 | 第12-13页 |
| ·改变酶在有机溶剂中的活力 | 第13-14页 |
| ·改变酶的表面特性 | 第14页 |
| ·蛋白质工程 | 第14-18页 |
| ·蛋白质的理性设计 | 第14-15页 |
| ·蛋白质的非理性设计 | 第15-16页 |
| ·蛋白质的半理性设计 | 第16-18页 |
| ·立题依据和实验设计 | 第18-19页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第19-28页 |
| ·实验材料 | 第19-21页 |
| ·菌种和质粒 | 第19页 |
| ·主要试剂 | 第19-20页 |
| ·主要仪器 | 第20页 |
| ·试剂的配制 | 第20-21页 |
| ·实验方法 | 第21-28页 |
| ·随机突变库的构建和筛选 | 第21-23页 |
| ·定点饱和突变库的构建和筛选 | 第23-25页 |
| ·突变体酶的性质表征 | 第25-28页 |
| 第三章 突变库的构建与筛选 | 第28-36页 |
| ·引言 | 第28页 |
| ·实验结果 | 第28-34页 |
| ·随机突变库的构建和筛选 | 第28-30页 |
| ·饱和突变库的构建和筛选 | 第30-34页 |
| ·小结 | 第34-36页 |
| 第四章 重要突变体的性质测定 | 第36-46页 |
| ·引言 | 第36页 |
| ·实验结果 | 第36-45页 |
| ·突变体的构建 | 第36-37页 |
| ·温度对突变体酶催化活力的影响 | 第37页 |
| ·pH对突变体酶的影响 | 第37-38页 |
| ·底物特异性的测定 | 第38-39页 |
| ·动力学常数的测定 | 第39-41页 |
| ·C50 的测定 | 第41-42页 |
| ·F488 位点突变体的模建和底物对接分析 | 第42-44页 |
| ·W474 位点突变体底物对接分析 | 第44-45页 |
| ·小结 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 中文摘要 | 第52-55页 |
| Abstract | 第55-57页 |
