| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-16页 |
| 目录 | 第16-18页 |
| 英文缩写词表 | 第18-20页 |
| 第一章 不同胆固醇水平条件下人前列腺癌PC-3细胞中的PHB表达及意义 | 第20-48页 |
| ·引言 | 第20-21页 |
| ·实验材料 | 第21-23页 |
| ·PC-3细胞株 | 第21页 |
| ·主要试剂 | 第21-22页 |
| ·主要仪器 | 第22-23页 |
| ·实验方法与步骤 | 第23-40页 |
| ·细胞培养方法 | 第23-25页 |
| ·实验分组和给药 | 第25-26页 |
| ·细胞计数 | 第26页 |
| ·RT-PCR检测PHB mRNA | 第26-29页 |
| ·Real-time PCR检测PHB mRNA | 第29-30页 |
| ·双向凝胶电泳检测PHB蛋白表达差异 | 第30-38页 |
| ·蛋白质印迹法(Western-blot)检测PHB蛋白的表达差异 | 第38-40页 |
| ·统计学处理 | 第40页 |
| ·结果 | 第40-45页 |
| ·CDM联合PDGF对PC-3细胞数量影响 | 第40-42页 |
| ·PC-3细胞中总RNA的完整性和纯度测定 | 第42-43页 |
| ·CDM对PC-3细胞PHB mRNA表达的影响 | 第43-44页 |
| ·CDM对PC-3细胞PHB蛋白表达的影响 | 第44-45页 |
| ·讨论 | 第45-47页 |
| ·小结 | 第47-48页 |
| 第二章 PHB启动因子中胆固醇敏感的作用位点研究 | 第48-72页 |
| ·引言 | 第48-49页 |
| ·实验材料 | 第49-50页 |
| ·PC-3细胞株 | 第49页 |
| ·主要试剂 | 第49页 |
| ·主要仪器 | 第49-50页 |
| ·实验方法与步骤 | 第50-61页 |
| ·细胞培养方法 | 第50页 |
| ·PHB Promoter引物的设计、合成 | 第50页 |
| ·PCR扩增 | 第50-51页 |
| ·双酶切和纯化 | 第51-53页 |
| ·T4 DNA连接酶反应 | 第53页 |
| ·DH5α大肠杆菌感受态细胞制备 | 第53-54页 |
| ·DH5α大肠杆菌转化 | 第54-55页 |
| ·质粒DNA提取与纯化 | 第55-56页 |
| ·脂质体介导DNA转染PC-3细胞 | 第56页 |
| ·Luciferase荧光检测 | 第56-57页 |
| ·PHB Promoter分段引物设计和合成 | 第57-59页 |
| ·点突变引物设计和合成 | 第59-60页 |
| ·基因点突变 | 第60页 |
| ·统计学处理 | 第60-61页 |
| ·结果 | 第61-66页 |
| ·PHB Promoter和各分段产物构建检测 | 第61页 |
| ·PHB Promoter和各分段产物构建质粒检测 | 第61页 |
| ·双酶切检测PHB Promoter和各分段产物构建质粒 | 第61-62页 |
| ·CHO对PHB Promoter的Luciferase荧光表达影响 | 第62页 |
| ·PHB Promoter各分段产物Luciferase荧光表达 | 第62-64页 |
| ·SRE基因位点点突变对Luciferase荧光表达影响 | 第64-66页 |
| ·讨论 | 第66-71页 |
| ·小结 | 第71-72页 |
| 第三章 PHB在人前列腺癌PC-3细胞中的作用机制研究 | 第72-88页 |
| ·引言 | 第72-73页 |
| ·实验材料 | 第73-74页 |
| ·PC-3细胞株 | 第73页 |
| ·主要试剂 | 第73-74页 |
| ·主要仪器 | 第74页 |
| ·实验方法与步骤 | 第74-77页 |
| ·细胞培养方法 | 第74页 |
| ·RNAi抑制PHB蛋白表达 | 第74-75页 |
| ·PHB RNAi干预 | 第75页 |
| ·流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡(Annexin-V-FITC/PI双染法) | 第75-76页 |
| ·MTT进行细胞增殖分析 | 第76-77页 |
| ·统计学处理 | 第77页 |
| ·结果 | 第77-84页 |
| ·Real-time PCR选择PHB RNAi oligo | 第77-78页 |
| ·CDM联合细胞生长因子刺激对细胞凋亡的影响 | 第78-79页 |
| ·PHB RNAi对细胞凋亡影响 | 第79-82页 |
| ·PHB RNAi对MTT检测细胞增殖影响 | 第82-84页 |
| ·讨论 | 第84-87页 |
| ·小结 | 第87-88页 |
| 综述 Prohiobitin与肿瘤 | 第88-100页 |
| 参考文献 | 第100-113页 |
| 致谢 | 第113-114页 |
| 攻读学位期间主要的研究成果 | 第114页 |
