摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-11页 |
前言 | 第11-13页 |
1. 文献综述 | 第13-21页 |
·分类历史 | 第13页 |
·形态特征和地理分布 | 第13-15页 |
·形态特征 | 第13-14页 |
·地理分布 | 第14-15页 |
·研究现状 | 第15-16页 |
·细胞学研究 | 第15-16页 |
·细胞学标记 | 第15页 |
·染色体组分析 | 第15-16页 |
·分子生物学研究 | 第16页 |
·研究方法 | 第16-20页 |
·核核糖体ITS 内转录间隔区 | 第17-18页 |
·叶绿体trnL 内含子和trnL-trnF 间隔区 | 第18-19页 |
·低拷贝基因Adh(Alcohol Dehydrogenease Gene, Adh) | 第19-20页 |
·PCR-RFLP | 第20页 |
·本研究的目的及意义 | 第20-21页 |
2. 材料与方法 | 第21-36页 |
·研究材料 | 第21-23页 |
·实验药品与主要仪器 | 第23-26页 |
·仪器及厂家 | 第23-24页 |
·试剂及配制 | 第24-26页 |
·液氮研磨法提取植物总DNA 的试剂及其配制 | 第24-25页 |
·琼脂糖凝胶电泳试剂及其配制 | 第25页 |
·制备大肠杆菌感受态细胞的试剂及其配制 | 第25页 |
·培养基的配制 | 第25页 |
·抗生素溶液的配制 | 第25页 |
·质粒DNA 提取试剂及其配制 | 第25-26页 |
·总基因组DNA 的提取 | 第26页 |
·PCR 扩增 | 第26-30页 |
·PCR 条件探索 | 第26-29页 |
·引物的稀释 | 第29页 |
·ITS 序列的PCR 扩增 | 第29-30页 |
·trnL-trnF 序列的PCR 扩增 | 第30页 |
·Adh 序列的PCR 扩增 | 第30页 |
·PCR 产物的回收纯化 | 第30-32页 |
·PCR 产物的克隆 | 第32-35页 |
·PCR 产物的连接 | 第32页 |
·制备感受态细胞、转化 | 第32-33页 |
·克隆菌的检测 | 第33-35页 |
·测序 | 第35页 |
·数据分析 | 第35-36页 |
3. 拟鹅观草属植物的系统发育关系和进化 | 第36-73页 |
·研究材料的基因组总DNA | 第36页 |
·研究材料核基因和叶绿体基因的PCR 扩增、克隆和测序 | 第36-38页 |
·ITS 的PCR 结果与分析 | 第36-37页 |
·trnL-trnF 的PCR 结果与分析 | 第37页 |
·Adh 基因的PCR 结果与分析 | 第37-38页 |
·克隆菌质粒酶切的检测结果 | 第38-41页 |
·ITS 序列的克隆菌质粒酶切检测结果与分析 | 第39页 |
·trnL-trnF 序列的克隆菌质粒酶切检测结果与分析 | 第39-40页 |
·Adh 基因序列的克隆菌质粒酶切检测结果与分析 | 第40-41页 |
·Adh 基因的PCR-RFLP 结果与分析 | 第41-44页 |
·序列特征 | 第44-46页 |
·序列的测序峰值图 | 第44页 |
·序列特点 | 第44-46页 |
·系统发育树 | 第46-73页 |
·叶绿体trnL-F 的系统发育树 | 第46-47页 |
·拟鹅观草属植物的叶绿体trnL-F 的系统发育树 | 第46页 |
·杜威草属植物的叶绿体trnL-F的系统发育树 | 第46-47页 |
·核基因ITS 序列的系统发育树 | 第47-49页 |
·二倍体拟鹅观草属植物的ITS 系统发育树 | 第47-48页 |
·四倍体拟鹅观草属植物的ITS 系统发育树 | 第48页 |
·拟鹅观草属植物的杂交 | 第48-49页 |
·杜威草属植物D. wangii 的ITS 系统发育树 | 第49页 |
·核基因Adh序列的系统发育树 | 第49-73页 |
·二倍体拟鹅观草属植物的核基因Adh1 序列系统发育树 | 第49页 |
·二倍体拟鹅观草属植物的核基因Adh2外显子序列系统发育树 | 第49-61页 |
·二倍体拟鹅观草属植物的核基因Adh2内含子序列系统发育树 | 第61页 |
·二倍体拟鹅观草属植物的核基因Adh3外显子序列系统发育树 | 第61页 |
·二倍体拟鹅观草属植物的核基因Adh3内含子序列系统发育树 | 第61页 |
·四倍体拟鹅观草属植物的核基因Adh序列系统发育树 | 第61-73页 |
4. 讨论 | 第73-79页 |
·方法学方面的探讨 | 第73-74页 |
·PCR 过程 | 第73-74页 |
·温度与时间的设置 | 第73-74页 |
·DNTP 的质量与浓度 | 第74页 |
·Mg~(2+)浓度 | 第74页 |
·酶及其浓度 | 第74页 |
·PCR-RFLP | 第74-75页 |
·实验结果的讨论 | 第75-79页 |
5. 小结与展望 | 第79-80页 |
参考文献 | 第80-85页 |
附录 | 第85-89页 |
致谢 | 第89-90页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第90-91页 |