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梨pgip基因cDNA的克隆与表达

摘要第1-7页
Abstract第7-10页
1.文献综述第10-20页
   ·引言第10页
   ·植物多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(PGIPs)基因特性及其表达调控研究进展第10-18页
     ·PGIPs的发现第10-14页
     ·PGIPs的特点第14-17页
       ·PGIP与PG的相互作用第14-15页
       ·PGIP特异的分子结构第15-17页
     ·pgip基因的表达调控第17-18页
       ·pgip基因的诱导表达第17-18页
       ·pgip基因的克隆与异源表达第18页
   ·论文选题的目的意义第18-19页
   ·克隆及表达策略第19-20页
2.材料与方法第20-38页
   ·实验材料第20-28页
     ·植物材料第20页
     ·菌株第20页
     ·载体第20-23页
     ·试剂与试剂盒第23页
     ·培养基第23页
     ·溶液和缓冲液第23-28页
     ·引物第28页
   ·主要仪器设备第28页
   ·实验方法第28-38页
     ·梨叶片总RNA的提取第28-30页
     ·电泳技术第30-32页
     ·RNA OD值的测定第32页
     ·反转录第32页
     ·PCR第32-33页
     ·DNA片段的回收第33-34页
     ·DNA片段和载体DNA的连接第34页
     ·大肠杆菌的转化第34-35页
     ·大肠杆菌质粒DNA的提取第35页
     ·限制性内切酶酶切反应第35-36页
     ·DNA序列测定和分析第36页
     ·重组Pupgip基因在大肠杆菌中的表达第36-38页
3.结果与分析第38-58页
   ·RNA提取及检测第38-39页
   ·RT-PCR第39-40页
   ·阳性克隆的筛选与鉴定第40页
   ·梨pgip基因的生物信息学分析第40-55页
     ·测序结果第40-42页
     ·梨PGIP蛋白信号肽预测第42-43页
     ·梨PGIP蛋白氨基酸组成及密码子偏爱性分析第43-47页
     ·梨属pgip基因cDNA序列及其编码氨基酸序列同源性分析第47-48页
     ·进化树分析第48-50页
     ·PuPGIP蛋白质亲水性和疏水性分析第50-51页
     ·PuPGIP蛋白质三维模型构建第51-52页
     ·PuPGIP蛋白质跨膜结构预测第52页
     ·PuPGIP蛋白质糖基化位点预测第52-53页
     ·PuPGIP蛋白质序列同源性分析第53-55页
   ·梨pgip基因组织特异性表达分析第55页
   ·重组Pupgip基因cDNA在大肠杆菌中的表达分析第55-58页
     ·重组质粒pET-Pupgip的琼脂糖凝胶电泳及酶切鉴定第55-56页
     ·重组Pupgip基因cDNA在大肠杆菌中的表达分析第56-58页
4.讨论第58-61页
   ·RNA的提取及检测第58页
   ·cDNA片段的密码子分析第58-59页
   ·pgip基因同源性及进化关系分析第59页
   ·pgip基因组织特异性表达分析第59-60页
   ·Pgip基因在大肠杆菌中的表达第60-61页
5.小结第61-62页
参考文献第62-66页
致谢第66-67页
硕士期间发表的论文第67页

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