摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-10页 |
1.文献综述 | 第10-20页 |
·引言 | 第10页 |
·植物多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(PGIPs)基因特性及其表达调控研究进展 | 第10-18页 |
·PGIPs的发现 | 第10-14页 |
·PGIPs的特点 | 第14-17页 |
·PGIP与PG的相互作用 | 第14-15页 |
·PGIP特异的分子结构 | 第15-17页 |
·pgip基因的表达调控 | 第17-18页 |
·pgip基因的诱导表达 | 第17-18页 |
·pgip基因的克隆与异源表达 | 第18页 |
·论文选题的目的意义 | 第18-19页 |
·克隆及表达策略 | 第19-20页 |
2.材料与方法 | 第20-38页 |
·实验材料 | 第20-28页 |
·植物材料 | 第20页 |
·菌株 | 第20页 |
·载体 | 第20-23页 |
·试剂与试剂盒 | 第23页 |
·培养基 | 第23页 |
·溶液和缓冲液 | 第23-28页 |
·引物 | 第28页 |
·主要仪器设备 | 第28页 |
·实验方法 | 第28-38页 |
·梨叶片总RNA的提取 | 第28-30页 |
·电泳技术 | 第30-32页 |
·RNA OD值的测定 | 第32页 |
·反转录 | 第32页 |
·PCR | 第32-33页 |
·DNA片段的回收 | 第33-34页 |
·DNA片段和载体DNA的连接 | 第34页 |
·大肠杆菌的转化 | 第34-35页 |
·大肠杆菌质粒DNA的提取 | 第35页 |
·限制性内切酶酶切反应 | 第35-36页 |
·DNA序列测定和分析 | 第36页 |
·重组Pupgip基因在大肠杆菌中的表达 | 第36-38页 |
3.结果与分析 | 第38-58页 |
·RNA提取及检测 | 第38-39页 |
·RT-PCR | 第39-40页 |
·阳性克隆的筛选与鉴定 | 第40页 |
·梨pgip基因的生物信息学分析 | 第40-55页 |
·测序结果 | 第40-42页 |
·梨PGIP蛋白信号肽预测 | 第42-43页 |
·梨PGIP蛋白氨基酸组成及密码子偏爱性分析 | 第43-47页 |
·梨属pgip基因cDNA序列及其编码氨基酸序列同源性分析 | 第47-48页 |
·进化树分析 | 第48-50页 |
·PuPGIP蛋白质亲水性和疏水性分析 | 第50-51页 |
·PuPGIP蛋白质三维模型构建 | 第51-52页 |
·PuPGIP蛋白质跨膜结构预测 | 第52页 |
·PuPGIP蛋白质糖基化位点预测 | 第52-53页 |
·PuPGIP蛋白质序列同源性分析 | 第53-55页 |
·梨pgip基因组织特异性表达分析 | 第55页 |
·重组Pupgip基因cDNA在大肠杆菌中的表达分析 | 第55-58页 |
·重组质粒pET-Pupgip的琼脂糖凝胶电泳及酶切鉴定 | 第55-56页 |
·重组Pupgip基因cDNA在大肠杆菌中的表达分析 | 第56-58页 |
4.讨论 | 第58-61页 |
·RNA的提取及检测 | 第58页 |
·cDNA片段的密码子分析 | 第58-59页 |
·pgip基因同源性及进化关系分析 | 第59页 |
·pgip基因组织特异性表达分析 | 第59-60页 |
·Pgip基因在大肠杆菌中的表达 | 第60-61页 |
5.小结 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
硕士期间发表的论文 | 第67页 |