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酿酒酵母生产白藜芦醇关键酶基因4CLcDNA的克隆与转化

中文摘要第1-4页
Abstract第4-6页
目录第6-8页
第一章 绪论第8-20页
   ·白藜芦醇的发现第8页
   ·白藜芦醇的研究进展第8-18页
     ·白藜芦醇的生物学功能及其应用前景第8-13页
     ·白藜芦醇结合蛋白研究进展第13页
     ·白藜芦醇的提取、纯化及合成工艺研究进展第13-15页
     ·白藜芦醇检测方法的研究进展第15页
     ·利用现代生物技术生产白藜芦醇的研究进展第15-16页
     ·4CL(4-香豆酸:辅酶A连接酶)研究进展第16-17页
     ·酿酒酵母表达系统的研究进展第17-18页
   ·课题研究的目的、意义第18-20页
第二章 材料和方法第20-32页
   ·主要试剂及仪器第20-23页
     ·基本试剂第20页
     ·酶及其它试剂第20页
     ·质粒和菌株第20页
     ·主要仪器第20-21页
     ·培养基第21页
     ·溶液配方第21-22页
     ·琼脂糖凝胶电泳相关溶液第22页
     ·大肠杆菌感受态细胞制备溶液第22页
     ·酵母质粒提取相关试剂第22-23页
   ·实验材料第23页
   ·实验方法第23-32页
     ·拟南芥的培养第23页
     ·拟南芥总RNA的提取第23页
     ·4CLcDNA第一链的扩增第23-24页
     ·第二链的扩增第24-25页
     ·重组质粒pESC-HIS-4CL的构建及检测第25-26页
     ·大肠杆菌(E.coli)DH5α感受态的制备第26-27页
     ·重组质粒pESC-4CL转化大肠杆菌DH5α及阳性克隆的鉴定第27页
     ·阳性克隆的鉴定第27-29页
     ·重组质粒pESC-HIS-4CL对酿酒酵母的转化第29-30页
     ·酵母转化子的鉴定第30-32页
第三章 实验结果第32-40页
   ·4CL(4-香豆酸:辅酶A连接酶)cDNA序列的克隆第32-33页
     ·TRIzol法提取拟南芥总RNA第32页
     ·通过RT-PCR法获得4CL的cDNA序列第32-33页
   ·重组质粒pESC-HIS-4CL的构建示意图第33-34页
   ·重组pESC-HIS-4CL质粒的鉴定第34-38页
   ·酵母转化子的筛选鉴定第38-40页
第四章 讨论第40-43页
   ·通过RT-PCR法扩增4CL基因的cDNA序列第40页
   ·穿梭载体pESC-HIS的选择第40-41页
   ·利用酿酒酵母发酵生产白藜芦醇第41-43页
结论及展望第43-44页
参考文献第44-52页
攻读硕士学位期间取得的学术成果第52-53页
致谢第53页

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