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绒山羊BAC文库的构建与鉴定以及绒毛生长发育相关基因的筛选

摘要第1-6页
Abstract第6-14页
1 引言第14-46页
   ·绒山羊的研究进展第14-17页
     ·概况第14页
     ·绒山羊图谱研究第14-15页
     ·绒山羊育种研究第15-16页
     ·本研究的意义第16-17页
   ·毛囊的形态发生和周期性调控以及其在绒山羊上的研究进展第17-27页
     ·毛囊形态发生和分子调控第17-20页
     ·毛囊的周期性变化和分子调控第20-22页
     ·绒山羊绒毛生长和周期性变化的研究进展第22-27页
   ·细菌人工染色体基因组文库第27-42页
     ·基因组文库概述第27页
     ·克隆载体的发展第27-28页
     ·BAC 载体第28-33页
     ·BAC 文库的构建第33-35页
     ·阳性克隆的挑选和保存第35页
     ·BAC 文库的鉴定第35-36页
     ·BAC 文库的筛选第36-37页
     ·BAC 基因组文库的应用第37-42页
   ·绒毛生长发育相关基因BMP、MTN、FGF、KAP 和IGFBP 与毛囊发育的关系第42-45页
     ·骨形成蛋白与绒毛的关系第42-43页
     ·成纤维细胞生长因子5 与绒毛的的关系第43页
     ·角蛋白与绒毛的关系第43-44页
     ·褪黑激素与绒毛的关系第44页
     ·胰岛素样生长因子结合蛋白的研究进展第44-45页
   ·世界上已有的羊BAC 文库第45-46页
2 材料与方法第46-75页
   ·实验材料第46-50页
     ·主要药品和酶第46页
     ·主要仪器设备第46-47页
     ·主要试剂第47-49页
     ·实验动物第49页
     ·菌株和克隆载体第49-50页
   ·实验方法第50-75页
     ·文库构建第51-61页
     ·文库的保存第61-64页
     ·文库的鉴定第64-73页
     ·绒毛生长相关基因的筛选第73-75页
3 实验结果第75-105页
   ·文库构建第75-87页
     ·基因组大片段制备第75-80页
     ·BAC 载体的制备第80-83页
     ·感受态的制备条件的摸索第83-84页
     ·连接条件的摸索第84页
     ·转化条件的摸索第84-85页
     ·BAC 文库评价第85-87页
   ·文库的保存第87-88页
     ·单克隆分离和培养第87页
     ·使用机械手分装菌液第87-88页
     ·池 DNA 的提取第88页
   ·PCR 筛选BAC 文库第88-93页
     ·基因组DNA 的提取第88-89页
     ·PCR 扩增获得阳性第89页
     ·PCR 筛选超级池第89-90页
     ·二级池PCR 筛选第90-92页
     ·文库结构第92-93页
     ·微卫星标记和功能基因的阳性克隆数第93页
   ·绒毛生长发育相关基因阳性克隆的获得第93-105页
     ·MTNR1a 阳性克隆的获得第94-97页
     ·KAPS.1 阳性克隆的获得第97-98页
     ·BMP4 阳性克隆的获得第98-100页
     ·FGF5 阳性克隆的获得第100-102页
     ·IGFBP5 阳性克隆的获得第102-105页
4 分析与讨论第105-112页
   ·高分子量DNA 的制备技术第106-108页
     ·琼脂糖包埋法制备DNA第106页
     ·大片段DNA 的选择第106-107页
     ·大片段DNA 的回收第107-108页
   ·BAC 载体的制备第108-109页
     ·质粒的提取和纯化第108页
     ·质粒的酶切和脱磷第108-109页
     ·质粒载体的检测和回收第109页
   ·载体与高分子量DNA 的连接第109-110页
   ·电转化技术第110页
   ·BAC 文库的保存第110-111页
   ·BAC 文库的鉴定第111-112页
     ·BAC 的鉴定第112页
     ·PCR 筛选文库的可行性第112页
5 结论与展望第112-115页
   ·结论第112-113页
   ·展望第113-115页
致谢第115-117页
参考文献第117-126页
附录第126-128页
作者简介第128页

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