摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-14页 |
1 引言 | 第14-46页 |
·绒山羊的研究进展 | 第14-17页 |
·概况 | 第14页 |
·绒山羊图谱研究 | 第14-15页 |
·绒山羊育种研究 | 第15-16页 |
·本研究的意义 | 第16-17页 |
·毛囊的形态发生和周期性调控以及其在绒山羊上的研究进展 | 第17-27页 |
·毛囊形态发生和分子调控 | 第17-20页 |
·毛囊的周期性变化和分子调控 | 第20-22页 |
·绒山羊绒毛生长和周期性变化的研究进展 | 第22-27页 |
·细菌人工染色体基因组文库 | 第27-42页 |
·基因组文库概述 | 第27页 |
·克隆载体的发展 | 第27-28页 |
·BAC 载体 | 第28-33页 |
·BAC 文库的构建 | 第33-35页 |
·阳性克隆的挑选和保存 | 第35页 |
·BAC 文库的鉴定 | 第35-36页 |
·BAC 文库的筛选 | 第36-37页 |
·BAC 基因组文库的应用 | 第37-42页 |
·绒毛生长发育相关基因BMP、MTN、FGF、KAP 和IGFBP 与毛囊发育的关系 | 第42-45页 |
·骨形成蛋白与绒毛的关系 | 第42-43页 |
·成纤维细胞生长因子5 与绒毛的的关系 | 第43页 |
·角蛋白与绒毛的关系 | 第43-44页 |
·褪黑激素与绒毛的关系 | 第44页 |
·胰岛素样生长因子结合蛋白的研究进展 | 第44-45页 |
·世界上已有的羊BAC 文库 | 第45-46页 |
2 材料与方法 | 第46-75页 |
·实验材料 | 第46-50页 |
·主要药品和酶 | 第46页 |
·主要仪器设备 | 第46-47页 |
·主要试剂 | 第47-49页 |
·实验动物 | 第49页 |
·菌株和克隆载体 | 第49-50页 |
·实验方法 | 第50-75页 |
·文库构建 | 第51-61页 |
·文库的保存 | 第61-64页 |
·文库的鉴定 | 第64-73页 |
·绒毛生长相关基因的筛选 | 第73-75页 |
3 实验结果 | 第75-105页 |
·文库构建 | 第75-87页 |
·基因组大片段制备 | 第75-80页 |
·BAC 载体的制备 | 第80-83页 |
·感受态的制备条件的摸索 | 第83-84页 |
·连接条件的摸索 | 第84页 |
·转化条件的摸索 | 第84-85页 |
·BAC 文库评价 | 第85-87页 |
·文库的保存 | 第87-88页 |
·单克隆分离和培养 | 第87页 |
·使用机械手分装菌液 | 第87-88页 |
·池 DNA 的提取 | 第88页 |
·PCR 筛选BAC 文库 | 第88-93页 |
·基因组DNA 的提取 | 第88-89页 |
·PCR 扩增获得阳性 | 第89页 |
·PCR 筛选超级池 | 第89-90页 |
·二级池PCR 筛选 | 第90-92页 |
·文库结构 | 第92-93页 |
·微卫星标记和功能基因的阳性克隆数 | 第93页 |
·绒毛生长发育相关基因阳性克隆的获得 | 第93-105页 |
·MTNR1a 阳性克隆的获得 | 第94-97页 |
·KAPS.1 阳性克隆的获得 | 第97-98页 |
·BMP4 阳性克隆的获得 | 第98-100页 |
·FGF5 阳性克隆的获得 | 第100-102页 |
·IGFBP5 阳性克隆的获得 | 第102-105页 |
4 分析与讨论 | 第105-112页 |
·高分子量DNA 的制备技术 | 第106-108页 |
·琼脂糖包埋法制备DNA | 第106页 |
·大片段DNA 的选择 | 第106-107页 |
·大片段DNA 的回收 | 第107-108页 |
·BAC 载体的制备 | 第108-109页 |
·质粒的提取和纯化 | 第108页 |
·质粒的酶切和脱磷 | 第108-109页 |
·质粒载体的检测和回收 | 第109页 |
·载体与高分子量DNA 的连接 | 第109-110页 |
·电转化技术 | 第110页 |
·BAC 文库的保存 | 第110-111页 |
·BAC 文库的鉴定 | 第111-112页 |
·BAC 的鉴定 | 第112页 |
·PCR 筛选文库的可行性 | 第112页 |
5 结论与展望 | 第112-115页 |
·结论 | 第112-113页 |
·展望 | 第113-115页 |
致谢 | 第115-117页 |
参考文献 | 第117-126页 |
附录 | 第126-128页 |
作者简介 | 第128页 |