| 中文摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-17页 |
| 一、研究意义 | 第13-14页 |
| 二、研究目的与内容 | 第14-15页 |
| 三、研究结构流程图 | 第15-17页 |
| 第二章 文献回顾 | 第17-57页 |
| 引言 | 第17页 |
| 一、抗生素进入生态环境的途径 | 第17-18页 |
| 二、环境中的抗生素,细菌和耐药性 | 第18-20页 |
| (一)、环境中的抗生素 | 第18页 |
| (二)、环境中的细菌 | 第18-19页 |
| (三)、环境中的抗生素耐药性 | 第19-20页 |
| 三、水环境中耐药菌的污染现状 | 第20页 |
| 四、水环境中耐药基因传递机制初探 | 第20-21页 |
| 五、水环境中耐药菌的主要来源 | 第21-22页 |
| (一)、医院和制药厂污水排放 | 第21-22页 |
| (二)、城市下水道和污水处理厂 | 第22页 |
| 六、水环境中耐药菌的危害研究 | 第22-23页 |
| 七、环境中的四环素 | 第23-52页 |
| (一)、四环素的发现与发展 | 第24-27页 |
| (二)、四环素的耐药性 | 第27-52页 |
| 八、水环境中四环素存在情况的国内外研究进程 | 第52-54页 |
| 九、总结 | 第54-55页 |
| 十、未来方向 | 第55-57页 |
| 第三章 污水处理厂活性污泥中耐四环素乳糖发酵型肠杆菌(TR-LFE)的研究 | 第57-68页 |
| 简介 | 第57页 |
| 一、乳糖发酵型肠杆菌(LFE)简介 | 第57-58页 |
| 二、采样点简介 | 第58-60页 |
| (一)、上海市闵行区污水处理厂 | 第58-60页 |
| (二)、滴水湖 | 第60页 |
| (三)、采样点 | 第60页 |
| 三、材料 | 第60-61页 |
| (一)、药品与试剂 | 第60页 |
| (二)、相关仪器 | 第60页 |
| (三)、培养基 | 第60-61页 |
| 四、方法 | 第61页 |
| (一)、细菌培养 | 第61页 |
| (二)、培养基配置 | 第61页 |
| 五、结果与分析 | 第61-68页 |
| (一)、菌落基本形态 | 第61-62页 |
| (二)、细菌总数 | 第62-63页 |
| (三)、不同工况处理后对TR-LFE和LFE细菌数的影响 | 第63-64页 |
| (四)、各季节不同工况处理后对TR-LFE和LFE细菌数的影响 | 第64-66页 |
| (五)、本章小结 | 第66-68页 |
| 第四章 污水处理厂活性污泥中耐四环素乳糖发酵型肠杆菌(TR-LFE)基因型分析 | 第68-88页 |
| 简介 | 第68页 |
| 一、材料 | 第68-69页 |
| (一)、菌株 | 第68页 |
| (二)、药品与试剂 | 第68-69页 |
| (三)、相关仪器 | 第69页 |
| 二、方法 | 第69-72页 |
| (一)、DNA模板制作 | 第69页 |
| (二)、PCR反应 | 第69-71页 |
| (三)、琼脂糖凝胶电泳 | 第71页 |
| (四)、限制性片段长度多态性分析(RFLP) | 第71页 |
| (五)、PCR产物纯化 | 第71-72页 |
| (六)、测序鉴定 | 第72页 |
| 三、结果与分析 | 第72-88页 |
| (一)、耐四环素乳糖发酵型肠杆菌(TR-LFE)基因型统计 | 第72-81页 |
| (二)、多重耐药性耐四环素乳糖发酵型肠杆菌(TR-LFE)基因型统计 | 第81-82页 |
| (三)、限制性片段长度多态性分类分析 | 第82-83页 |
| (四)、测序结果 | 第83-86页 |
| (五)、本章小结 | 第86-88页 |
| 第五章 耐四环素乳糖发酵型肠杆菌(TR-LFE)质粒DNA对耐药基因的验证 | 第88-95页 |
| 简介 | 第88页 |
| 一、材料 | 第88页 |
| (一)、菌株 | 第88页 |
| (二)、药品与试剂 | 第88页 |
| (三)、相关仪器 | 第88页 |
| (四)、培养基 | 第88页 |
| 二、方法 | 第88-91页 |
| (一)、细菌培养 | 第88页 |
| (二)、抽提质粒 | 第88-90页 |
| (三)、琼脂糖凝胶电泳 | 第90页 |
| (四)、质粒DNA大小的测定 | 第90页 |
| (五)、PCR检测质粒携带的耐药性基因 | 第90页 |
| (六)、PCR产物纯化 | 第90页 |
| (七)、测序鉴定 | 第90-91页 |
| 三、结果与分析 | 第91-95页 |
| (一)、质粒抽提结果 | 第91页 |
| (二)、PCR验证质粒携带的耐药性基因 | 第91-92页 |
| (三)、测序结果 | 第92-94页 |
| (四)、本章小结 | 第94-95页 |
| 第六章 污水处理厂活性污泥中四环素耐药基因的研究 | 第95-102页 |
| 简介 | 第95页 |
| 一、材料 | 第95-96页 |
| (一)、药品与试剂 | 第95-96页 |
| (二)、相关仪器 | 第96页 |
| 二、方法 | 第96-97页 |
| (一)、活性污泥的DNA提取 | 第96-97页 |
| (二)、PCR反应 | 第97页 |
| 三、结果与分析 | 第97-102页 |
| (一)、不同季节活性污泥中耐药基因的出现情况 | 第97-99页 |
| (二)、污水处理过程中耐药基因的出现情况 | 第99-100页 |
| (三)、滴水湖耐药基因的相关情况 | 第100页 |
| (四)、本章小结 | 第100-102页 |
| 第七章 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)对四环素耐药基因的量化 | 第102-111页 |
| 简介 | 第102页 |
| 一、材料 | 第102页 |
| (一)、药品与试剂 | 第102页 |
| (二)、相关仪器 | 第102页 |
| 二.实时荧光定量PCR(qRT-PCR)测定方法 | 第102-104页 |
| (一)、标准品浓度 | 第102-103页 |
| (二)、标准曲线 | 第103-104页 |
| (三)、扩增曲线 | 第104页 |
| 三.结果与分析 | 第104-111页 |
| (一)、闵行污水厂tet(A)和tet(C)基因的量化 | 第104-107页 |
| (二)、污水处理过程中tet(A)和tet(C)基因的变化 | 第107页 |
| (三)、紫外(UV)消毒前、后的出水样品 | 第107-108页 |
| (四)、滴水湖tet(A)和tet(C)基因的量化 | 第108-110页 |
| (五)、本章小结 | 第110-111页 |
| 第八章 总结和展望 | 第111-116页 |
| 一、总结 | 第111-114页 |
| 二、展望与建议 | 第114-116页 |
| (一)、展望 | 第114页 |
| (二)、建议 | 第114-116页 |
| 附录 | 第116-122页 |
| 附录1 tet基因PCR扩增结果图 | 第116-118页 |
| 附录2 闵行污水厂活性污泥PCR扩增结果 | 第118-120页 |
| 附录3 闵行污水厂81株TR-LFE菌株质粒提取图谱 | 第120-122页 |
| 参考文献 | 第122-134页 |
| 致谢 | 第134页 |
