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大白菜霜霉菌诱导抑制性消减cDNA文库的构建及防御相关基因的表达分析

目录第1-6页
摘要第6-8页
Abstract第8-10页
缩略词表第10-11页
前言第11-13页
第一章 文献综述第13-20页
 1 霜霉病菌的保存及侵染规律第13页
 2 芸薹属抗霜霉病分子生物学研究第13-14页
 3 植物病程相关蛋白第14-15页
 4 差减杂交技术第15-17页
   ·SSH在植物发育相关基因方面的应用第15-16页
   ·SSH在非生物胁迫方面的应用第16页
   ·SSH在植物抗病机理研究方面的应用第16-17页
 5 实时荧光定量PCR第17-20页
   ·荧光定量PCR的检测方法第17-18页
   ·实时荧光定量PCR在病原菌检测中的应用第18-19页
   ·实时荧光定量PCR在抗病相关基因表达分析方面的应用第19-20页
第二章 大白菜霜霉菌诱导抑制性消减cDNA差减文库的构建和分析第20-47页
 1 材料与方法第21-34页
   ·材料第21-22页
   ·病原菌接种及样品取样第22页
   ·试验方法第22-34页
     ·叶片总RNA的提取第22页
     ·DNAase Ⅰ纯化总RNA第22页
     ·SSH文库的构建第22-29页
     ·反向Northern斑点杂交验证第29-33页
     ·阳性克隆的测序和序列分析第33页
     ·荧光定量PCR第33-34页
 2 结果与分析第34-44页
   ·大白菜叶片总RNA完整性及纯度检测第34-35页
   ·接头连接效率的检测第35-36页
   ·差减与未差减产物的两轮PCR第36页
   ·差减效率的检测第36-37页
   ·文库插入片段大小的鉴定及重组率的计算第37页
   ·探针标记效率的检测第37-38页
   ·反向Northern斑点杂交第38-39页
   ·差异克隆序列功能分类第39-41页
   ·荧光定量PCR检测分析第41-44页
 3 讨论第44-47页
第三章 大白菜霜霉菌诱导5个防御相关基因片段的克隆与表达分析第47-57页
 1 实验材料与病菌接种第48页
 2 防御基因的分离和扩增第48-50页
 3 防御基因的序列比对和表达分析第50-51页
 4 结果与分析第51-55页
   ·防御基因的序列比对分析第51-52页
   ·防御基因实时荧光定量PCR分析第52-55页
 5 讨论第55-57页
全文结论第57-59页
创新之处第59-61页
参考文献第61-69页
攻读硕士期间发表的文章第69-71页
致谢第71页

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