| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 1 引言 | 第10-20页 |
| ·蜱传脑炎疾病的流行及危害 | 第10-12页 |
| ·国内外蜱传脑炎疾病的流行情况 | 第10-12页 |
| ·蜱传脑炎疾病的危害 | 第12页 |
| ·蜱传脑炎疾病的诊断现状 | 第12-13页 |
| ·蜱传脑炎疾病的防治措施 | 第13-14页 |
| ·蜱传脑炎病毒疫苗的研究进展 | 第14-16页 |
| ·灭活疫苗 | 第14-15页 |
| ·减毒疫苗 | 第15页 |
| ·cDNA 疫苗 | 第15页 |
| ·嵌和体疫苗 | 第15-16页 |
| ·核酸疫苗 | 第16页 |
| ·蜱传脑炎病毒分子的研究进展 | 第16-19页 |
| ·蜱传脑炎病毒分子的生物学性状 | 第17页 |
| ·蜱传脑炎病毒分子包膜相关蛋白的研究进展 | 第17-19页 |
| ·本研究的目的意义 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-48页 |
| ·试验材料 | 第20-27页 |
| ·菌株和载体 | 第20页 |
| ·试验动物 | 第20页 |
| ·主要生化试剂 | 第20-21页 |
| ·工具酶和试剂盒 | 第21-22页 |
| ·主要试验仪器和设备 | 第22-23页 |
| ·试验试剂的配制 | 第23-27页 |
| ·试验方法 | 第27-48页 |
| ·原核表达载体选择和分析 | 第27-28页 |
| ·表达质粒的转化 | 第28页 |
| ·克隆质粒和空质粒的转化 | 第28-29页 |
| ·克隆质粒的提取 | 第29-30页 |
| ·蛋白纯化前镍柱填料的预处理 | 第30页 |
| ·目的基因prM-E 在原核细胞的克隆和表达的研究 | 第30-34页 |
| ·目的基因prM 在原核细胞的克隆表达及其抗体制备的研究 | 第34-41页 |
| ·目的基因E 在原核细胞的克隆表达及其抗体制备的研究 | 第41-48页 |
| 3 结果 | 第48-63页 |
| ·目的基因PRM-E 在原核细胞的克隆和表达的结果 | 第48-53页 |
| ·目的基因prM-E 的PCR 扩增结果 | 第48页 |
| ·目的基因prM-E 的PCR 扩增产物回收 | 第48-49页 |
| ·目的基因prM-E 及载体质粒的酶切回收鉴定 | 第49页 |
| ·目的基因prM-E 及载体质粒的连接和转化 | 第49-50页 |
| ·目的基因prM-E 的小量表达 | 第50页 |
| ·目的基因prM-E 表达菌株的优化 | 第50-51页 |
| ·重组质粒prM-E 双酶切验证 | 第51页 |
| ·目的基因prM-E 的片段测序 | 第51-53页 |
| ·目的基因PRM 在原核细胞的克隆表达及其抗体制备的结果 | 第53-57页 |
| ·目的基因prM 的PCR 扩增结果 | 第53页 |
| ·目的基因prM 的PCR 扩增产物回收检测 | 第53-54页 |
| ·目的基因prM 及载体质粒的酶切回收检测 | 第54页 |
| ·目的基因prM 及载体质粒的连接和转化 | 第54-55页 |
| ·目的蛋白prM 小量表达 | 第55页 |
| ·目的蛋白prM 大量表达 | 第55-56页 |
| ·目的蛋白prM 大量表达的纯化 | 第56页 |
| ·目的蛋白prM 多克隆抗体效价检测 | 第56-57页 |
| ·目的基因prM 的片段测序 | 第57页 |
| ·目的基因E 在原核细胞的克隆表达及其抗体制备的结果 | 第57-63页 |
| ·目的基因E 的PCR 扩增结果 | 第57-58页 |
| ·目的基因E 的PCR 扩增产物回收 | 第58页 |
| ·目的基因E 及载体质粒的酶切产物回收检测 | 第58-59页 |
| ·目的基因E 及载体质粒的连接和转化 | 第59-60页 |
| ·目的蛋白E 的小量表达 | 第60页 |
| ·目的蛋白E 的大量表达 | 第60-61页 |
| ·目的蛋白E 的包涵体大量洗涤与纯化 | 第61页 |
| ·目的蛋白E 的抗体效价检测 | 第61-62页 |
| ·目的基因E 的片段测序结果 | 第62-63页 |
| 4 讨论 | 第63-70页 |
| ·关于目的氨基酸序列的抗性分析 | 第63-65页 |
| ·关于引物设计 | 第65页 |
| ·关于目的蛋白表达 | 第65-66页 |
| ·关于目的蛋白纯化 | 第66页 |
| ·包涵体的形成 | 第66页 |
| ·包涵体的洗涤溶解 | 第66页 |
| ·关于抗体制备和ELISA 效价检测 | 第66-67页 |
| ·抗体制备 | 第66-67页 |
| ·ELISA 效价检测 | 第67页 |
| ·关于目的基因在原核细胞的克隆和表达及其抗体制备 | 第67-68页 |
| ·prM-E 基因的克隆和表达及其抗体制备 | 第67页 |
| ·prM 基因的克隆和表达及其抗体制备 | 第67-68页 |
| ·E 基因的克隆和表达及其抗体制备 | 第68页 |
| ·关于目的蛋白的后续工作 | 第68-70页 |
| 结论 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-76页 |
| 附录 | 第76-84页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第84-85页 |
| 作者简历 | 第85-86页 |
| 致谢 | 第86-87页 |
