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Peroxiredoxin 2调控母—胎界面滋养层细胞增殖和凋亡的分子机制研究

中文摘要第4-6页
英文摘要第6-12页
全文缩略词中英文对照第12-15页
绪论第15-18页
第一部分Peroxiredoxin2在胎盘绒毛的表达和其对细胞氧化还原状态,增殖和凋亡的影响第18-50页
    1 材料和方法第18-35页
        1.1 实验材料第18-23页
            1.1.1 实验细胞第18页
            1.1.2 人胎盘绒毛样本的收集第18-19页
            1.1.3 实验试剂第19-21页
            1.1.4 仪器和耗材第21-23页
        1.2 实验方法第23-35页
            1.2.1 培养液和工作液的配制第23页
            1.2.2 细胞复苏第23页
            1.2.3 细胞的培养和传代第23-24页
            1.2.4 细胞冻存第24页
            1.2.5 RNA的抽提第24-25页
            1.2.6 qRT-PCR检测第25-27页
            1.2.7 Western blot第27-29页
            1.2.8 免疫组织化学第29-30页
            1.2.9 免疫组织荧光第30-31页
            1.2.10 细胞免疫荧光第31页
            1.2.11 细胞内源性ROS的测定第31页
            1.2.12 流式细胞术测凋亡第31-32页
            1.2.13 siRNA转染第32页
            1.2.14 TUNEL第32-33页
            1.2.15 BrdU第33-34页
            1.2.16 CCK-8第34页
            1.2.17 绒毛组织体外培养第34-35页
        1.3 统计方法第35页
    2 实验结果第35-47页
        2.1 Prdx2在不明原因复发性流产病人的胎盘绒毛细胞滋养层的表达较正常妊娠降低第35-36页
        2.2 Prdx2的降低使细胞内活性氧升高,抑制了细胞增殖,促进细胞凋亡,同时抑制细胞融合第36-37页
        2.3 不明原因复发性流产病人的胎盘绒毛细胞较正常妊娠增殖能力减弱,凋亡增加第37-47页
    3 讨论第47-49页
    4 结论第49-50页
第二部分Peroxiredoxin2调节滋养细胞增殖和凋亡的分子机制第50-66页
    1 材料和方法第50-58页
        1.1 实验材料第50-54页
            1.1.1 实验细胞第50页
            1.1.2 人胎盘绒毛样本的收集第50-51页
            1.1.3 实验试剂第51-52页
            1.1.4 仪器和耗材第52-54页
        1.2 实验方法第54-57页
            1.2.1 培养液和工作液的配制第54页
            1.2.2 细胞的培养和传代第54页
            1.2.3 Western blot第54-56页
            1.2.4 免疫组织化学第56-57页
            1.2.5 siRNA转染第57页
        1.3 统计方法第57-58页
    2 实验结果第58-63页
        2.1 Prdx2的表达降低使活性氧调节下的磷酸化p53和p21 表达升高第58页
        2.2 Prdx2的表达降低激活了p38-MAPK通路,该通路与p21 的升高相关第58-61页
        2.3 复发性流产病人的胎盘绒毛组织p-p53和p21 的表达也较正常妊娠升高第61-63页
    3 讨论第63-65页
    4 结论第65-66页
第三部分 c-Myc对Peroxiredoxin2表达的转录调控机制第66-92页
    1 材料和方法第66-81页
        1.1 实验材料第66-70页
            1.1.1 实验细胞第66页
            1.1.2 人胎盘绒毛样本的收集第66-67页
            1.1.3 实验试剂第67-69页
            1.1.4 仪器和耗材第69-70页
        1.2 实验方法第70-81页
            1.2.1 培养液和工作液的配制第70-71页
            1.2.2 细胞的培养和传代第71页
            1.2.3 RNA的抽提第71-72页
            1.2.4 qRT-PCR检测第72-73页
            1.2.5 Western blot第73-75页
            1.2.6 免疫组织化学第75页
            1.2.7 免疫组织荧光第75-76页
            1.2.8 siRNA转染第76-77页
            1.2.9 CCK-8第77页
            1.2.10 流式细胞术测凋亡第77页
            1.2.11 质粒的抽提第77-78页
            1.2.12 质粒的转染第78页
            1.2.13 染色质免疫共沉淀(ChIP)第78-81页
        1.3 统计方法第81页
    2 实验结果第81-88页
        2.1 c-Myc直接结合于Prdx2启动子序列,且具有转录激活作用第81-82页
        2.2 c-Myc在复发性流产病人的胎盘绒毛表达降低第82-84页
        2.3 c-Myc的表达降低使细胞增殖减弱,凋亡增加第84-88页
    3 讨论第88-91页
    4 结论第91-92页
参考文献第92-99页
致谢第99-100页
论文发表情况第100-102页

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