中文摘要 | 第4-6页 |
英文摘要 | 第6-12页 |
全文缩略词中英文对照 | 第12-15页 |
绪论 | 第15-18页 |
第一部分Peroxiredoxin2在胎盘绒毛的表达和其对细胞氧化还原状态,增殖和凋亡的影响 | 第18-50页 |
1 材料和方法 | 第18-35页 |
1.1 实验材料 | 第18-23页 |
1.1.1 实验细胞 | 第18页 |
1.1.2 人胎盘绒毛样本的收集 | 第18-19页 |
1.1.3 实验试剂 | 第19-21页 |
1.1.4 仪器和耗材 | 第21-23页 |
1.2 实验方法 | 第23-35页 |
1.2.1 培养液和工作液的配制 | 第23页 |
1.2.2 细胞复苏 | 第23页 |
1.2.3 细胞的培养和传代 | 第23-24页 |
1.2.4 细胞冻存 | 第24页 |
1.2.5 RNA的抽提 | 第24-25页 |
1.2.6 qRT-PCR检测 | 第25-27页 |
1.2.7 Western blot | 第27-29页 |
1.2.8 免疫组织化学 | 第29-30页 |
1.2.9 免疫组织荧光 | 第30-31页 |
1.2.10 细胞免疫荧光 | 第31页 |
1.2.11 细胞内源性ROS的测定 | 第31页 |
1.2.12 流式细胞术测凋亡 | 第31-32页 |
1.2.13 siRNA转染 | 第32页 |
1.2.14 TUNEL | 第32-33页 |
1.2.15 BrdU | 第33-34页 |
1.2.16 CCK-8 | 第34页 |
1.2.17 绒毛组织体外培养 | 第34-35页 |
1.3 统计方法 | 第35页 |
2 实验结果 | 第35-47页 |
2.1 Prdx2在不明原因复发性流产病人的胎盘绒毛细胞滋养层的表达较正常妊娠降低 | 第35-36页 |
2.2 Prdx2的降低使细胞内活性氧升高,抑制了细胞增殖,促进细胞凋亡,同时抑制细胞融合 | 第36-37页 |
2.3 不明原因复发性流产病人的胎盘绒毛细胞较正常妊娠增殖能力减弱,凋亡增加 | 第37-47页 |
3 讨论 | 第47-49页 |
4 结论 | 第49-50页 |
第二部分Peroxiredoxin2调节滋养细胞增殖和凋亡的分子机制 | 第50-66页 |
1 材料和方法 | 第50-58页 |
1.1 实验材料 | 第50-54页 |
1.1.1 实验细胞 | 第50页 |
1.1.2 人胎盘绒毛样本的收集 | 第50-51页 |
1.1.3 实验试剂 | 第51-52页 |
1.1.4 仪器和耗材 | 第52-54页 |
1.2 实验方法 | 第54-57页 |
1.2.1 培养液和工作液的配制 | 第54页 |
1.2.2 细胞的培养和传代 | 第54页 |
1.2.3 Western blot | 第54-56页 |
1.2.4 免疫组织化学 | 第56-57页 |
1.2.5 siRNA转染 | 第57页 |
1.3 统计方法 | 第57-58页 |
2 实验结果 | 第58-63页 |
2.1 Prdx2的表达降低使活性氧调节下的磷酸化p53和p21 表达升高 | 第58页 |
2.2 Prdx2的表达降低激活了p38-MAPK通路,该通路与p21 的升高相关 | 第58-61页 |
2.3 复发性流产病人的胎盘绒毛组织p-p53和p21 的表达也较正常妊娠升高 | 第61-63页 |
3 讨论 | 第63-65页 |
4 结论 | 第65-66页 |
第三部分 c-Myc对Peroxiredoxin2表达的转录调控机制 | 第66-92页 |
1 材料和方法 | 第66-81页 |
1.1 实验材料 | 第66-70页 |
1.1.1 实验细胞 | 第66页 |
1.1.2 人胎盘绒毛样本的收集 | 第66-67页 |
1.1.3 实验试剂 | 第67-69页 |
1.1.4 仪器和耗材 | 第69-70页 |
1.2 实验方法 | 第70-81页 |
1.2.1 培养液和工作液的配制 | 第70-71页 |
1.2.2 细胞的培养和传代 | 第71页 |
1.2.3 RNA的抽提 | 第71-72页 |
1.2.4 qRT-PCR检测 | 第72-73页 |
1.2.5 Western blot | 第73-75页 |
1.2.6 免疫组织化学 | 第75页 |
1.2.7 免疫组织荧光 | 第75-76页 |
1.2.8 siRNA转染 | 第76-77页 |
1.2.9 CCK-8 | 第77页 |
1.2.10 流式细胞术测凋亡 | 第77页 |
1.2.11 质粒的抽提 | 第77-78页 |
1.2.12 质粒的转染 | 第78页 |
1.2.13 染色质免疫共沉淀(ChIP) | 第78-81页 |
1.3 统计方法 | 第81页 |
2 实验结果 | 第81-88页 |
2.1 c-Myc直接结合于Prdx2启动子序列,且具有转录激活作用 | 第81-82页 |
2.2 c-Myc在复发性流产病人的胎盘绒毛表达降低 | 第82-84页 |
2.3 c-Myc的表达降低使细胞增殖减弱,凋亡增加 | 第84-88页 |
3 讨论 | 第88-91页 |
4 结论 | 第91-92页 |
参考文献 | 第92-99页 |
致谢 | 第99-100页 |
论文发表情况 | 第100-102页 |