| 内容提要 | 第1-9页 |
| 英文缩略词 | 第9-10页 |
| 第1章 绪论 | 第10-34页 |
| ·肿瘤放射治疗研究进展 | 第10-16页 |
| ·放射治疗概述 | 第10页 |
| ·电离辐射致DNA损伤 | 第10-12页 |
| ·电离辐射致生物膜损伤 | 第12页 |
| ·电离辐射杀伤细胞的机制 | 第12-15页 |
| ·电离辐射对肿瘤细胞的作用 | 第15-16页 |
| ·肿瘤基因治疗研究进展 | 第16-28页 |
| ·基因治疗 | 第16-22页 |
| ·肿瘤的基因治疗 | 第22-25页 |
| ·肿瘤基因-放射治疗 | 第25-27页 |
| ·Egr-1 介导的肿瘤基因-放射治疗研究进展 | 第27-28页 |
| ·AIF基因研究进展 | 第28-34页 |
| ·AIF基因和蛋白结构 | 第29页 |
| ·AIF在细胞中的过程 | 第29-30页 |
| ·AIF的功能 | 第30-32页 |
| ·AIF促凋亡的机制 | 第32页 |
| ·AIF的相关治疗策略 | 第32-34页 |
| 第2章 材料与方法 | 第34-58页 |
| ·主要试剂及器材 | 第34-36页 |
| ·主要试剂 | 第34-36页 |
| ·主要器材 | 第36页 |
| ·主要仪器 | 第36-37页 |
| ·质粒和菌株 | 第37页 |
| ·细胞株 | 第37页 |
| ·照射条件 | 第37页 |
| ·细胞的培养 | 第37-40页 |
| ·液体的配置 | 第37-39页 |
| ·细胞的复苏 | 第39页 |
| ·细胞的培养 | 第39页 |
| ·细胞的冻存 | 第39-40页 |
| ·Egr-1 介导的截短型人AIF_(Δ1-480)表达载体的构建 | 第40-50页 |
| ·组织和细胞中总RNA提取 | 第40-42页 |
| ·RNA的定量 | 第42页 |
| ·cDNA的合成 | 第42-43页 |
| ·引物的设计及合成 | 第43页 |
| ·PCR获得Egr-1 和AIF_(Δ1-480)基因 | 第43页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第43-44页 |
| ·DNA片段的回收 | 第44页 |
| ·pMD18T-AIF_(Δ1-480)质粒的获得 | 第44-47页 |
| ·pcDNA3.1-AIF_(Δ1-480)表达载体的构建 | 第47-49页 |
| ·pcDNA3.1-Egr-1-AIF_(Δ1-480)表达载体的构建 | 第49-50页 |
| ·转染效率的测定 | 第50页 |
| ·重组质粒在人乳腺癌MCF-7 细胞中的辐射诱导表达规律 | 第50-55页 |
| ·质粒大量制备 | 第50-51页 |
| ·质粒DNA的定量 | 第51页 |
| ·MCF-7 细胞转染 | 第51-52页 |
| ·总蛋白的提取 | 第52页 |
| ·蛋白的定量 | 第52页 |
| ·Western blot | 第52-55页 |
| ·重组质粒联合电离辐射对人乳腺癌MCF-7 细胞的体外抑制效应 | 第55-57页 |
| ·细胞增殖能力的检测 | 第55页 |
| ·细胞周期进程的变化 | 第55-56页 |
| ·细胞凋亡的变化 | 第56页 |
| ·细胞侵袭能力的变化 | 第56-57页 |
| ·细胞色素c蛋白的表达 | 第57页 |
| ·统计学处理 | 第57-58页 |
| 第3章 实验结果 | 第58-73页 |
| ·重组质粒的构建及鉴定 | 第58-63页 |
| ·截短型AIF_(Δ1-480)片段的获得 | 第58页 |
| ·pMD18T-AIF_(Δ1-480)鉴定 | 第58-59页 |
| ·pcDNA3.1-AIF_(Δ1-480)质粒的获得 | 第59-60页 |
| ·pcDNA3.1-AIF_(Δ1-480)质粒的鉴定 | 第60页 |
| ·Egr-1 片段的获得 | 第60-61页 |
| ·pcDNA3.1-Egr-1-AIF_(Δ1-480)质粒的构建 | 第61-62页 |
| ·pcDNA3.1- Egr-1-AIF_(Δ1-480)质粒的鉴定 | 第62-63页 |
| ·细胞转染条件的优化及转染效率的测定 | 第63页 |
| ·重组质粒转染人乳腺癌MCF-7 细胞后AIF表达规律 | 第63-64页 |
| ·重组质粒转染人乳腺癌MCF-7 细胞后辐射所致AIF表达规律 | 第64-66页 |
| ·重组质粒转染与2 Gy 照射后人乳腺癌MCF-7 细胞后AIF 蛋白表达的时程变化 | 第64-65页 |
| ·重组质粒转染人乳腺癌MCF-7 细胞后AIF 蛋白表达的剂量变化 | 第65-66页 |
| ·重组质粒转染及2 Gy X射线照射对人乳腺癌MCF-7 细胞增殖能力的影响 | 第66-67页 |
| ·重组质粒转染及2 Gy X射线照射对人乳腺癌MCF-7 细胞周期进程的影响 | 第67-69页 |
| ·重组质粒转染及2 Gy X射线照射对人乳腺癌MCF-7 细胞凋亡的影响 | 第69-70页 |
| ·重组质粒转染及2 Gy X射线照射对人乳腺癌MCF-7 细胞侵袭能力的影响 | 第70-71页 |
| ·重组质粒转染人乳腺癌MCF-7 细胞后2 Gy X射线照射所致细胞色素c（Cyt c）的表达 | 第71-73页 |
| 第4章 讨论 | 第73-81页 |
| ·实验方法的可行性分析 | 第73-75页 |
| ·目的基因的克隆及重组质粒的构建 | 第75-77页 |
| ·Egr-1 启动子的克隆及辐射敏感特性 | 第75-76页 |
| ·截短型AIF_(Δ1-480)促凋亡活性 | 第76页 |
| ·电离辐射诱导重组质粒的构建 | 第76-77页 |
| ·重组质粒体外联合辐射诱导基因蛋白表达的规律 | 第77-78页 |
| ·重组质粒联合辐射对MCF-7 细胞的作用 | 第78-81页 |
| 结论 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-98页 |
| 附图 | 第98-106页 |
| 攻博期间发表的学术论文及其他成果 | 第106-107页 |
| 致谢 | 第107-108页 |
| 中文摘要 | 第108-112页 |
| Abstract | 第112-116页 |
