| 致谢 | 第1-9页 |
| 主要英文缩写 | 第9-10页 |
| 中文摘要 | 第10-12页 |
| 英文摘要 | 第12-16页 |
| 第一章 卵巢肿瘤血清诊断标志物筛选及临床验证研究近况(文献综述) | 第16-104页 |
| 1. 卵巢恶性肿瘤概述 | 第16-29页 |
| ·卵巢恶性肿瘤的发病率及可能的致病因素 | 第16-19页 |
| ·卵巢恶性肿瘤的主要诊断与鉴别诊断模式及存在的问题 | 第19-29页 |
| 2. 卵巢肿瘤血清潜在诊断标志物筛选及临床验证研究近况 | 第29-45页 |
| ·血清潜在诊断标志物筛选的主要方法及原理 | 第29-39页 |
| ·卵巢肿瘤血清潜在诊断标志物筛选现况以及临床验证情况 | 第39-41页 |
| ·已筛选出的卵巢肿瘤血清潜在诊断标志物临床验证现况 | 第41-45页 |
| ·卵巢肿瘤血清潜在诊断标志物筛选中存在的问题及拟解决的问题 | 第45页 |
| 3. 卵巢肿瘤血清诊断标志物研究近况 | 第45-56页 |
| ·血清抗原抗体类诊断标记物在卵巢恶性肿瘤诊断、鉴别诊断及病程监测中的应用 | 第45-51页 |
| ·血清CA125含量测定在卵巢恶性肿瘤诊断、鉴别诊断及病程监测中的应用 | 第46-47页 |
| ·血清CA125含量测定在诊断、鉴别诊断及病程监测中应用中存在的问题及原因 | 第47页 |
| ·血清HE4含量测定在卵巢恶性肿瘤诊断、鉴别诊断及病程监测中的应用 | 第47-49页 |
| ·其它血清抗原抗体类标志物在卵巢恶性肿瘤诊断、鉴别诊断及病程监测中的应用价值及缺陷 | 第49-51页 |
| ·激素类标志物在卵巢恶性肿瘤诊断、鉴别诊断及病程监测中的应用价值及缺陷 | 第51-53页 |
| ·酶类标志物在卵巢恶性肿瘤诊断、鉴别诊断及病程监测中的应用价值及缺陷 | 第53-54页 |
| ·肽类标志物在卵巢恶性肿瘤诊断、鉴别诊断及病程监测中的应用价值及缺陷 | 第54-55页 |
| ·多指标联合应用在卵巢恶性肿瘤诊断、鉴别诊断及病程监测中的应用价值 | 第55-56页 |
| 4. 卵巢恶性肿瘤的分子诊断及判断预后的研究现况 | 第56-70页 |
| ·癌基因检测作为卵巢恶性肿瘤诊断及判断预后的临床价值 | 第57-60页 |
| ·抑癌基因检测作为卵巢恶性肿瘤诊断及判断预后的临床价值 | 第60-65页 |
| ·生长因子检测作为卵巢恶性肿瘤诊断及判断预后的临床价值 | 第65-69页 |
| ·多分子指标联合应用在卵巢恶性肿瘤诊断及判断预后的临床价值 | 第69-70页 |
| 5. CXCL1基因与卵巢肿瘤的关系研究 | 第70-76页 |
| ·CXCL1基因的发现、结构及主要生物学功能 | 第71-73页 |
| ·CXCL1基因与恶性肿瘤的关系研究现况 | 第73-74页 |
| ·CXCL1基因与卵巢恶性肿瘤的关系及分子机理 | 第74-76页 |
| ·CXCL1基因作为血清潜在诊断标志物在卵巢恶性肿瘤诊断、鉴别诊断中的可能价值 | 第76页 |
| 6. 本研究的目地和意义 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-104页 |
| 第二章 CXCL1基因在卵巢组织中的表达检测及临床意义初探 | 第104-137页 |
| 1. 材料及方法 | 第104-128页 |
| ·材料 | 第104-110页 |
| ·组织标本 | 第104-105页 |
| ·载体及菌株 | 第105-106页 |
| ·实验主要仪器设备 | 第106-107页 |
| ·主要试剂 | 第107-108页 |
| ·部分试剂的配置 | 第108-109页 |
| ·用具处理 | 第109-110页 |
| ·引物的设计 | 第110页 |
| ·实验方法及步骤 | 第110-128页 |
| ·卵巢组织总RNA提取 | 第110-112页 |
| ·cDNA合成 | 第112-113页 |
| ·CXCL1及GAPDH基因扩增(RT—PCR) | 第113-116页 |
| ·PCR产物的纯化与回收 | 第116-117页 |
| ·回收的PCR产物与EZ-T载体连接 | 第117-118页 |
| ·检测连接是否成功 | 第118-119页 |
| ·感受态大肠杆菌DH-5α的制备 | 第119-120页 |
| ·连接产物转化至感受态DH-5α | 第120-121页 |
| ·挑选阳性克隆 | 第121页 |
| ·质粒DNA小提 | 第121-123页 |
| ·测序结果序列分析 | 第123页 |
| ·制备标准品 | 第123-124页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第124-127页 |
| ·数据整理 | 第127页 |
| ·统计分析 | 第127-128页 |
| 2. 结果 | 第128-133页 |
| ·CXCL1基因和重组GAPDH基因质粒构建结果 | 第128-129页 |
| ·阳性标准品实时荧光扩增标准曲线 | 第129页 |
| ·CXCL1测定的实时荧光扩增熔解曲线 | 第129-130页 |
| ·各类卵巢组织中CXCL1mRNA表达量比较 | 第130页 |
| ·卵巢恶性肿瘤组织中CXCL1mRNA表达量与其临床病理因素的关系 | 第130-131页 |
| ·卵巢恶性肿瘤组织中CXCL1mRNA表达与其预后的关系 | 第131-133页 |
| 3. 讨论 | 第133-135页 |
| 参考文献 | 第135-137页 |
| 第三章 CXCL1基因表达载体的构建及鉴定 | 第137-155页 |
| 1. 材料与方法 | 第137-149页 |
| ·材料 | 第137-141页 |
| ·质粒与菌株、细胞 | 第137-139页 |
| ·主要试剂 | 第139-140页 |
| ·仪器 | 第140-141页 |
| ·CXCL1引物的设计与合成 | 第141页 |
| ·实验方法 | 第141-149页 |
| ·CXCL1慢病毒表达系统的构建 | 第141-149页 |
| 2. 结果 | 第149-152页 |
| ·重组质粒CXCL1-PWPI PCR电泳结果 | 第149-150页 |
| ·重组质粒CXCL1-PWPI PCR测序结果 | 第150-151页 |
| ·CXCL1-PWPI转染293T细胞结果 | 第151页 |
| ·病毒滴度测定结果 | 第151-152页 |
| 3. 讨论 | 第152-154页 |
| 参考文献 | 第154-155页 |
| 第四章 CXCL1基因介导对卵巢上皮癌生物学功能影响体外实验研究 | 第155-180页 |
| 1. 材料和方法 | 第155-166页 |
| ·材料 | 第155-157页 |
| ·主要试剂及配制 | 第155-157页 |
| ·仪器 | 第157页 |
| ·实验方法 | 第157-166页 |
| ·慢病毒介导的细胞CXCL1表达 | 第157-161页 |
| ·慢病毒介导A2780细胞CXCL1表达前后细胞生物学功能测定 | 第161-166页 |
| ·细胞生长曲线测定 | 第161-162页 |
| ·细胞生长周期变化 | 第162-163页 |
| ·细胞体集落形成实验 | 第163页 |
| ·细胞体外迁移能力的测定 | 第163-164页 |
| ·细胞体外侵袭能力测定 | 第164-166页 |
| ·统计学方法 | 第166页 |
| 2. 结果 | 第166-174页 |
| ·慢病毒转染A2780细胞转染效率 | 第166-167页 |
| ·CXCL1(+)-PWPI-A2780细胞CXCL1mRNA表达结果 | 第167-168页 |
| ·CXCL1(+)-PWPI-A2780细胞CXCL1蛋白分泌检测结果 | 第168页 |
| ·CXCL1基因表达对A2780细胞细胞生长曲线的影响 | 第168-169页 |
| ·流式细胞仪检测细胞生长周期 | 第169-171页 |
| ·细胞集落形成实验结果 | 第171-172页 |
| ·细胞体外迁移能力的测定 | 第172-173页 |
| ·细胞体外侵袭能力测定 | 第173-174页 |
| 3. 讨论 | 第174-178页 |
| 参考文献 | 第178-180页 |
| 全文小结 | 第180页 |
