| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-10页 |
| 缩略词 | 第10-12页 |
| 目录 | 第12-17页 |
| 第一部分 文献综述 | 第17-32页 |
| 第一章 微生物除草剂的研究进展 | 第17-25页 |
| 1 活体微生物除草剂的研究进展 | 第17-21页 |
| ·真菌除草剂的研究进展 | 第17-20页 |
| ·细菌及病毒微生物除草剂的研究进展 | 第20-21页 |
| 2 农用抗生素除草剂的研究进展 | 第21-22页 |
| 3 杂草生物防治的局限性 | 第22-23页 |
| ·寄主单一性的限制 | 第22-23页 |
| ·环境因子及制剂的影响 | 第23页 |
| ·菌种退化,工业化生产难 | 第23页 |
| 4 马唐生防菌的研究进展 | 第23-25页 |
| 第二章 菌种遗传改良的研究进展 | 第25-31页 |
| 1 诱变技术在菌种改良中的应用 | 第25-28页 |
| ·化学诱变 | 第25-26页 |
| ·物理诱变 | 第26-28页 |
| 2 生物技术在菌种改良中的应用 | 第28-31页 |
| ·原生质体转化 | 第28-29页 |
| ·电转化法 | 第29页 |
| ·限制性内切酶介导整合技术 | 第29-30页 |
| ·农杆菌介导的转化(ATMT) | 第30-31页 |
| 第三章 本课题研究目的及意义 | 第31-32页 |
| 第二部分 研究内容 | 第32-56页 |
| 第一章 马唐生防菌Col-68(Colletotrichum sp.)生物学特性 | 第32-40页 |
| 1 前言 | 第32-33页 |
| 2 材料与方法 | 第33-35页 |
| ·材料 | 第33页 |
| ·不同环境因子对菌株Col-68菌丝生长及产孢的影响 | 第33-34页 |
| ·不同环境因子对菌株Col-68分生孢子萌发试验 | 第34-35页 |
| ·菌株Col-68液体发酵培养基的选择 | 第35页 |
| ·数据统计与分析 | 第35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-38页 |
| 4 讨论 | 第38-40页 |
| 第二章 马唐生防菌Col-68(Colletotrichum sp.)紫外诱变改良 | 第40-47页 |
| 1 前言 | 第40页 |
| 2 材料与方法 | 第40-42页 |
| ·材料和试剂 | 第40-41页 |
| ·孢子悬浮液的配制 | 第41页 |
| ·紫外辐射敏感性测试 | 第41页 |
| ·紫外诱变处理 | 第41页 |
| ·诱变突变体保存 | 第41-42页 |
| ·对诱变突变体生物学性状分析 | 第42页 |
| 3 结果与分析 | 第42-46页 |
| ·菌株对紫外辐射的敏感性测试结果 | 第42-43页 |
| ·紫外诱变处理菌株Col-68试验结果 | 第43页 |
| ·对诱变菌株生物学性状分析结果 | 第43-46页 |
| 4 讨论 | 第46-47页 |
| 第三章 农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的马唐生防菌Col-68(Colletotrichum sp.)转化及致病突变体筛选 | 第47-56页 |
| 1 前言 | 第47页 |
| 2 材料与方法 | 第47-50页 |
| ·供试菌株、质粒与培养条件 | 第47-48页 |
| ·培养基的配制 | 第48页 |
| ·载体构建与引物设计 | 第48页 |
| ·农杆菌的冻融法转化 | 第48页 |
| ·马唐炭疽病菌菌株Col-68的T-DNA转化 | 第48-49页 |
| ·菌株Col-68的DNA提取与转化子的检测 | 第49-50页 |
| ·转化子的生物学特性分析 | 第50页 |
| 3 结果与分析 | 第50-54页 |
| ·马唐炭疽病病菌转化子的获得 | 第50页 |
| ·转化子的检测 | 第50-52页 |
| ·转化子生物学性状分析结果 | 第52-54页 |
| 4 讨论 | 第54-56页 |
| 参考文献 | 第56-63页 |
| 附录A | 第63-65页 |
| 1 质粒pBIG2RHPH2-GFP-GUS | 第63页 |
| 2 菌株Col-68潮霉素敏感性测定 | 第63-64页 |
| 3 ATMT转化子潮霉素二次筛选 | 第64-65页 |
| 附录B 马唐种子消毒与催芽 | 第65-66页 |
| 附录C 常规分子生物学实验技术 | 第66-74页 |
| 1 真菌DNA提取(CTAB法) | 第66页 |
| 2 农杆菌冻融法转化 | 第66-67页 |
| 3 PCR反应 | 第67-68页 |
| ·PCR体系 | 第67页 |
| ·PCR反应 | 第67-68页 |
| 4 Southern杂交酶切反应体系 | 第68页 |
| 5 DNA的琼脂糖电泳 | 第68页 |
| 6 DNA片段的凝胶回收 | 第68-69页 |
| 7 Southern杂交分析 | 第69-74页 |
| ·试剂的配制 | 第69-70页 |
| ·DIG-DNA探针标记 | 第70页 |
| ·马唐炭疽病菌Col-68基因组DNA的消化、电泳及变性 | 第70-71页 |
| ·DNA转膜 | 第71-72页 |
| ·Southern杂交过程 | 第72-73页 |
| ·免疫显色 | 第73-74页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
