摘要 | 第4-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
第一章 绪论 | 第14-30页 |
1.1 (R)-扁桃酸及其衍生物在工业上的应用 | 第14-17页 |
1.1.1 扁桃酸 | 第14-15页 |
1.1.2 扁桃酸的衍生物 | 第15-17页 |
1.2 (R)-扁桃酸及其衍生物合成技术及其研究进展 | 第17-23页 |
1.2.1 消旋扁桃酸的拆分 | 第18-21页 |
1.2.1.1 非对映体盐结晶拆分法 | 第18页 |
1.2.1.2 萃取拆分法 | 第18页 |
1.2.1.3 色谱拆分法 | 第18页 |
1.2.1.4 电泳拆分法 | 第18-19页 |
1.2.1.5 酶催化拆分法 | 第19-21页 |
1.2.2 光学活性扁桃酸的直接合成 | 第21-23页 |
1.2.2.1 化学法 | 第21-22页 |
1.2.2.2 电化学法 | 第22页 |
1.2.2.3 生物转化法 | 第22-23页 |
1.2.3 不对称氧化-还原反应拆分外消旋扁桃酸及衍生物的研究进展 | 第23页 |
1.3 本项目的选题意义及研究内容 | 第23-26页 |
参考文献 | 第26-30页 |
第二章 羰基还原酶产生菌株的筛选、鉴定 | 第30-45页 |
2.1 引言 | 第30页 |
2.2 材料与方法 | 第30-35页 |
2.2.1 土样 | 第30页 |
2.2.2 化学试剂与主要仪器 | 第30-31页 |
2.2.3 培养基 | 第31-32页 |
2.2.3.1 富集培养基 | 第31页 |
2.2.3.2 斜面培养基 | 第31页 |
2.2.3.3 种子培养基 | 第31页 |
2.2.3.4 发酵培养基 | 第31-32页 |
2.2.4 菌株的初筛 | 第32页 |
2.2.5 菌株的复筛 | 第32页 |
2.2.6 菌体ZJB-5074发酵与静息细胞的制备 | 第32页 |
2.2.7 液相分析检测条件 | 第32-33页 |
2.2.8 菌株的形态观察 | 第33页 |
2.2.9 生理生化特征研究 | 第33页 |
2.2.10 18S rDNA的扩增 | 第33-34页 |
2.2.11 系统发育学分析 | 第34页 |
2.2.12 菌株ZJB-5074的热稳定性 | 第34页 |
2.2.13 苯乙酮酸及其衍生物的制备 | 第34-35页 |
2.2.14 菌株底物特异性的研究 | 第35页 |
2.3 结果与讨论 | 第35-42页 |
2.3.1 菌株筛选情况 | 第35-36页 |
2.3.2 菌株ZJB-5074的鉴定 | 第36-39页 |
2.3.2.1 ZJB-5074菌株形态观察及生理生化鉴定 | 第36-38页 |
2.3.2.2 ZJB-5074菌株系统发育学分析 | 第38-39页 |
2.3.3 S.cerevisiae ZJB-5074的热稳定性 | 第39-40页 |
2.3.4 菌株底物特异性的研究 | 第40-42页 |
2.4 本章小结 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-45页 |
第三章 S.cerevisiae ZJB-5074不对称还原制备(R)-扁桃酸及其衍生物 | 第45-70页 |
3.1 引言 | 第45-46页 |
3.2 材料与方法 | 第46-51页 |
3.2.1 化学试剂与主要仪器 | 第46页 |
3.2.2 菌种 | 第46-47页 |
3.2.3 培养基 | 第47页 |
3.2.4 P.aeruginosa ZJB-1125发酵与静息细胞的制备 | 第47页 |
3.2.5 S.cerevisiae ZJB-5074发酵与静息细胞的制备 | 第47页 |
3.2.6 S.cerevisiae ZJB-5074静息细胞转化条件优化 | 第47-49页 |
3.2.6.1 pH及温度的影响 | 第48页 |
3.2.6.2 辅助底物的影响 | 第48页 |
3.2.6.3 底物浓度及菌体量对反应的影响 | 第48-49页 |
3.2.7 产物抑制作用 | 第49页 |
3.2.8 菌株S.cerevisiae ZJB-5074不对称还原苯乙酮酸的反应进程 | 第49页 |
3.2.9 细胞的批次稳定性研究 | 第49页 |
3.2.10 S.cerevisiae ZJB-5074不对称还原的产物累积 | 第49-50页 |
3.2.11 透化细胞催化条件 | 第50页 |
3.2.12 羰基不对称还原制备(R)-扁桃酸及其衍生物 | 第50页 |
3.2.12.1 苯乙酮酸及其衍生物的制备 | 第50页 |
3.2.12.2 制备(R)-扁桃酸及其衍生物的反应条件 | 第50页 |
3.2.13 液相分析检测条件及数据处理 | 第50-51页 |
3.2.14 羰基还原酶酶活的测定 | 第51页 |
3.3 结果与讨论 | 第51-66页 |
3.3.1 S.cerevisiae ZJB-5074还原条件的优化 | 第51-57页 |
3.3.1.1 pH对羰基还原反应的影响 | 第51-52页 |
3.3.1.2 温度对羰基还原反应的影响 | 第52-53页 |
3.3.1.3 辅助底物对羰基还原反应的影响 | 第53-55页 |
3.3.1.4 底物浓度对羰基还原反应的影响 | 第55-56页 |
3.3.1.5 菌体量对羰基还原反应收率的影响 | 第56-57页 |
3.3.2 不对称还原苯乙酮酸的反应进程曲线 | 第57-58页 |
3.3.3 产物浓度对羰基还原反应的影响 | 第58-59页 |
3.3.4 细胞的批次稳定性 | 第59-60页 |
3.3.5 产物累积 | 第60-61页 |
3.3.6 透化处理的全细胞不对称还原苯乙酮酸反应 | 第61-62页 |
3.3.7 羰基还原反应制备(R)-扁桃酸及其衍生物 | 第62-66页 |
3.4 本章小结 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-70页 |
第四章 生物氧化-还原反应生产(R)-扁桃酸及其衍生物 | 第70-86页 |
4.1 引言 | 第70-71页 |
4.2 材料与方法 | 第71-73页 |
4.2.1 化学试剂及主要仪器 | 第71页 |
4.2.2 菌种 | 第71页 |
4.2.3 培养基 | 第71页 |
4.2.4 P.aeruginosa ZJB-1125和S.cerevisiae ZJB-5074发酵与静息细胞的制备 | 第71-72页 |
4.2.4.1 P.aeruginosa ZJB-1125发酵与静息细胞的制备 | 第71页 |
4.2.4.2 S.cerevisiae ZJB-5074发酵与使用第二批静息细胞制备 | 第71-72页 |
4.2.5 氧化-还原反应条件 | 第72页 |
4.2.6 氧化-还原反应拆分2-氯扁桃酸的放大反应 | 第72页 |
4.2.7 液相分析方法及数据处理 | 第72-73页 |
4.3 结果与讨论 | 第73-82页 |
4.3.1 串联反应与同步反应拆分扁桃酸的条件优化 | 第73-75页 |
4.3.2 一锅法氧化-还原反应的底物特异性研究 | 第75-77页 |
4.3.3 几种底物的串联及同步反应的进程曲线 | 第77-81页 |
4.3.4 一锅法氧化-还原反应拆分2-氯扁桃酸的反应放大 | 第81-82页 |
4.4 本章小结 | 第82-83页 |
参考文献 | 第83-86页 |
第五章 结论与展望 | 第86-90页 |
5.1 结论 | 第86-87页 |
5.2 展望 | 第87-90页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第90-91页 |
致谢 | 第91页 |