| 缩略语表 | 第6-9页 |
| 中文摘要 | 第9-12页 |
| ABSTRACT | 第12-14页 |
| 前言 | 第15-16页 |
| 文献回顾 | 第16-25页 |
| 第一部分 代谢综合症 | 第16-20页 |
| 1 胰岛素抵抗在代谢综合征发生发展中起关键枢纽作用 | 第16-17页 |
| 1.1 正常胰岛素反应及信号通路 | 第16-17页 |
| 1.2 胰岛素抵抗影响糖脂代谢的表现 | 第17页 |
| 2 NAFLD是代谢综合症在肝脏的表现 | 第17-19页 |
| 2.1 NAFLD是代谢综合征的初期形式 | 第17页 |
| 2.2 NAFLD中甘油三酯过度沉积的分子机制 | 第17-19页 |
| 3 间断性禁食诱导的代谢保护作用 | 第19-20页 |
| 4 肝脏代谢与肠道微生态密切相关 | 第20页 |
| 第二部分 O-GLCNAC糖基化修饰 | 第20-25页 |
| 1 概述 | 第20-21页 |
| 1.1 O-GlcNAc糖基化修饰是一种重要的蛋白翻译后修饰 | 第20-21页 |
| 1.2 OGT和OGA调控蛋白O-GlcNAc糖基化修饰 | 第21页 |
| 2 O-GlcNAc与正常代谢 | 第21-22页 |
| 2.1 O-GlcNAc对进食反应的调节作用 | 第21-22页 |
| 2.2 O-GlcNAc糖基化对饥饿时脂肪生成的调节 | 第22页 |
| 3 O-GlcNAc与代谢性疾病 | 第22-24页 |
| 3.1 O-GlcNAc与肝脏胰岛素抵抗 | 第22页 |
| 3.2 O-GlcNAc与高糖血症 | 第22-23页 |
| 3.3 O-GlcNAc与非酒精性脂肪肝病 | 第23-24页 |
| 4 OGA在糖脂代谢发生发展中的作用及机制尚不明确 | 第24-25页 |
| 4.1 OGA的发现与分子功能 | 第24页 |
| 4.2 OGA在肝脏糖脂代谢调控中的作用及机制尚未阐明 | 第24-25页 |
| 第一部分 构建OGA肝细胞特异性敲除小鼠模型 | 第25-38页 |
| 1 材料 | 第25-28页 |
| 1.1 实验动物 | 第25页 |
| 1.2 主要试剂及药物 | 第25-27页 |
| 1.3 主要仪器及器材 | 第27-28页 |
| 2 方法 | 第28-33页 |
| 2.1 利用Cre/LoxP系统构建OGA肝细胞特异性敲除小鼠 | 第28-30页 |
| 2.2 小鼠基因型鉴定 | 第30-31页 |
| 2.3 肝组织标本采集 | 第31页 |
| 2.4 实时定量聚合酶链式反应(real-timequantitativepolymerasechainreaction,qRT-PCR) | 第31-32页 |
| 2.5 蛋白印迹(WesternBlot,WB) | 第32-33页 |
| 2.6 免疫组织化学 | 第33页 |
| 2.7 数据处理 | 第33页 |
| 3 结果 | 第33-36页 |
| 3.1 OGA-LKO小鼠基因型鉴定结果 | 第33-34页 |
| 3.2 OGA-LKO小鼠模型验证 | 第34-35页 |
| 3.3 OGA-LKO小鼠生长曲线 | 第35-36页 |
| 3.4 OGA-LKO小鼠遗传规律 | 第36页 |
| 4 讨论 | 第36-38页 |
| 第二部分 肝细胞OGA缺失可通过增加FOXO1蛋白稳定性促进肝糖异生 | 第38-42页 |
| 1 材料 | 第38页 |
| 1.1 实验动物 | 第38页 |
| 1.2 主要试剂及药物 | 第38页 |
| 1.3 主要仪器及器材 | 第38页 |
| 1.4 溶液配制 | 第38页 |
| 2 方法 | 第38-39页 |
| 2.1 IPGTT | 第38-39页 |
| 3 结果 | 第39-40页 |
| 3.1 OGA肝细胞特异性敲除小鼠葡萄糖耐量受损 | 第39页 |
| 3.2 OGA肝细胞敲除小鼠肝脏中糖异生相关基因表达升高 | 第39-40页 |
| 3.3 OGA肝细胞缺失可增加FoxO1蛋白稳定性 | 第40页 |
| 4 讨论 | 第40-42页 |
| 第三部分 肝细胞OGA缺失可通过调节SREBP1加重高脂饮食诱导的胰岛素抵抗及脂质代谢紊乱 | 第42-51页 |
| 1 材料 | 第42页 |
| 1.1 实验动物 | 第42页 |
| 1.2 主要试剂及药物 | 第42页 |
| 1.3 主要仪器及器材 | 第42页 |
| 1.4 溶液配制 | 第42页 |
| 2 方法 | 第42-45页 |
| 2.1 小鼠分组 | 第42页 |
| 2.2 脂肪肝模型的建立 | 第42-43页 |
| 2.3 造模后检测及观察指标 | 第43页 |
| 2.4 样本采集及送检 | 第43-44页 |
| 2.5 HE染色 | 第44页 |
| 2.6 油红O染色 | 第44-45页 |
| 2.7 Westernblot | 第45页 |
| 2.8 免疫组化 | 第45页 |
| 2.9 数据处理 | 第45页 |
| 3 结果 | 第45-49页 |
| 3.1 相同饮食条件下,OGA-LKO和WT小鼠之间血糖和体重无明显差异 | 第45页 |
| 3.2 OGA肝细胞缺失可加重HFD诱导的胰岛素抵抗 | 第45-46页 |
| 3.3 OGA肝细胞特异性敲除可加重HFD诱导的脂质代谢紊乱 | 第46-47页 |
| 3.4 OGA肝细胞特异性敲除可通过调节SREBP1促进脂肪合成 | 第47-49页 |
| 4 讨论 | 第49-51页 |
| 第四部分 OGA肝细胞特异性敲除通过改变肠道菌群促进高脂饮食诱导的肝脏炎性反应 | 第51-57页 |
| 1 材料 | 第51页 |
| 1.1 实验动物 | 第51页 |
| 1.2 主要试剂及药物 | 第51页 |
| 1.3 主要仪器及器材 | 第51页 |
| 2 方法 | 第51-52页 |
| 2.1 小鼠分组 | 第51页 |
| 2.2 样本采集及送检 | 第51页 |
| 2.3 免疫组化 | 第51-52页 |
| 3 结果 | 第52-56页 |
| 3.1 猴NASH肝脏炎性反应区域蛋白整体糖基化水平明显升高 | 第52页 |
| 3.2 OGA肝细胞敲除可诱导肝脏炎性反应 | 第52-53页 |
| 3.3 肝细胞OGA敲除后影响肠道菌群组成 | 第53-55页 |
| 3.4 OGA-LKO小鼠肠道中促炎细菌丰度显著升高促进肝脏炎症 | 第55页 |
| 3.5 OGA肝脏敲除后引起的肠道菌群改变可影响脂肪合成 | 第55-56页 |
| 4 讨论 | 第56-57页 |
| 第五部分 OGA肝细胞特异性敲除可阻碍间断性禁食诱导的代谢保护作用 | 第57-62页 |
| 1 材料 | 第57页 |
| 1.1 实验动物 | 第57页 |
| 1.2 主要试剂及药物 | 第57页 |
| 1.3 主要仪器及器材 | 第57页 |
| 1.4 溶液配制 | 第57页 |
| 2 方法 | 第57-58页 |
| 2.1 间断性禁食模型的建立 | 第57页 |
| 2.2 造模后检测及观察指标 | 第57页 |
| 2.3 数据处理 | 第57-58页 |
| 3 结果 | 第58-60页 |
| 3.1 肝脏OGA缺失可拮抗间断性禁食的代谢保护作用 | 第58页 |
| 3.2 IF诱导代谢保护作用不依赖体重和血糖的下降 | 第58-59页 |
| 3.3 IF后各组小鼠体成分无明显改变 | 第59-60页 |
| 4 讨论 | 第60-62页 |
| 小结 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-67页 |
| 个人简历和研究成果 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
