| 缩略语表 | 第6-9页 |
| 中文摘要 | 第9-11页 |
| ABSTRACT | 第11-13页 |
| 前言 | 第14-16页 |
| 文献回顾 | 第16-32页 |
| 1 肝脏、肝血窦与肝血窦内皮细胞结构 | 第16-20页 |
| 2 肝血窦内皮细胞与肝损伤 | 第20-26页 |
| 3 血管特异性Notch信号对肝脏稳态的维持 | 第26-27页 |
| 4 MiR-218以及Slit-Robo信号通路 | 第27-32页 |
| 第一部分 肝血窦内皮细胞的分离和鉴定 | 第32-42页 |
| 1 材料 | 第32-35页 |
| 1.1 小鼠 | 第32-33页 |
| 1.2 实验试剂 | 第33-34页 |
| 1.3 仪器设备 | 第34页 |
| 1.4 主要缓冲液 | 第34-35页 |
| 2 方法 | 第35-37页 |
| 2.1 小鼠原代肝血窦内皮细胞的分离与培养 | 第35-36页 |
| 2.2 小鼠原代肝血窦内皮细胞的鉴定 | 第36-37页 |
| 3 结果 | 第37-40页 |
| 3.1 细胞得率与活性检测 | 第37页 |
| 3.2 肝血窦内皮细胞培养与细胞形态 | 第37-38页 |
| 3.3 流式细胞仪鉴定 | 第38-39页 |
| 3.4 细胞内吞功能鉴定结果 | 第39页 |
| 3.5 细胞窗孔电镜结果 | 第39-40页 |
| 4 讨论 | 第40-42页 |
| 第二部分 MIR-218/SLIT-ROBO信号轴在小鼠肝血窦内皮细胞中的表达情况 | 第42-59页 |
| 1 材料 | 第42-46页 |
| 1.1 小鼠 | 第42页 |
| 1.2 主要试剂 | 第42-44页 |
| 1.3 主要仪器 | 第44-45页 |
| 1.4 主要缓冲液 | 第45-46页 |
| 1.5 PCR引物序列 | 第46页 |
| 2 方法 | 第46-51页 |
| 2.1 动物实验 | 第46-48页 |
| 2.2 免疫荧光染色 | 第48-49页 |
| 2.3 肝血窦内皮细胞的分离、培养 | 第49页 |
| 2.4 实时定量PCR | 第49-50页 |
| 2.5 Western-blot | 第50-51页 |
| 2.6 统计学方法 | 第51页 |
| 3 结果 | 第51-58页 |
| 3.1 C57小鼠Phx模型和肝纤维化模型中Slit-Robo信号通路相关分子在肝血窦内皮细胞的表达情况 | 第51-55页 |
| 3.2 NICD小鼠静息态和肝纤维化模型中miR-218/Slit-Robo信号通路相关分子在肝血窦内皮细胞的表达情况 | 第55-58页 |
| 4 讨论 | 第58-59页 |
| 第三部分 C57小鼠肝血窦内皮细胞中干预MIR-218的生物行为及表型影响 | 第59-87页 |
| 1 材料 | 第59-65页 |
| 1.1 小鼠 | 第59页 |
| 1.2 主要试剂 | 第59-62页 |
| 1.3 主要仪器 | 第62页 |
| 1.4 主要缓冲液 | 第62-63页 |
| 1.5 PCR引物序列 | 第63-65页 |
| 2 方法 | 第65-69页 |
| 2.1 肝血窦内皮细胞的分离、培养及转染 | 第65-66页 |
| 2.2 实时定量PCR | 第66-67页 |
| 2.3 Western-blot | 第67-68页 |
| 2.4 细胞功能实验 | 第68-69页 |
| 2.5 统计学方法 | 第69页 |
| 3 结果 | 第69-84页 |
| 3.1 C57小鼠肝血窦内皮细胞中转染mir-218mimic和inhibitor的生物学影响 | 第69-75页 |
| 3.2 C57小鼠肝血窦内皮细胞中转染腺病毒上调miR-218后的生物学影响 | 第75-84页 |
| 4 讨论 | 第84-87页 |
| 小结 | 第87-88页 |
| 参考文献 | 第88-98页 |
| 个人简历和研究成果 | 第98-99页 |
| 致谢 | 第99-100页 |
