摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
1 绪论 | 第10-15页 |
1.1 白桦三萜的研究进展 | 第10页 |
1.2 硫化氢(H2S)的研究进展 | 第10-11页 |
1.3 NO与蛋白质翻译后修饰的研究进展 | 第11-12页 |
1.3.1 NO的研究进展 | 第11页 |
1.3.2 NO参与蛋白质亚硝基化的研究进展 | 第11-12页 |
1.4 亚硝基化谷胱甘肽还原酶(GSNOR)在植物中的研究进展 | 第12-13页 |
1.5 转录组测序研究进展 | 第13页 |
1.6 本研究的目的及意义 | 第13-15页 |
2 材料与方法 | 第15-22页 |
2.1 材料的获得与培养 | 第15页 |
2.1.1 白桦组培苗及白桦悬浮细胞的获得与培养 | 第15页 |
2.1.2 GSNOR转基因植株的来源 | 第15页 |
2.2 外源物质的添加 | 第15页 |
2.3 H_2S含量的测定 | 第15-16页 |
2.4 半胱氨酸脱巯基酶活性的测定 | 第16页 |
2.5 NO含量的测定 | 第16-17页 |
2.6 NOS酶活性的测定 | 第17页 |
2.7 NR酶活性的测定 | 第17-18页 |
2.7.1 标准曲线的制作 | 第17-18页 |
2.7.2 NR酶活性的测定 | 第18页 |
2.8 白桦酯醇的提取与测定 | 第18-19页 |
2.8.1 标准曲线的制作 | 第18页 |
2.8.2 测试样品的制备 | 第18-19页 |
2.9 转录组测序 | 第19-20页 |
2.9.1 植物材料 | 第19页 |
2.9.2 转录组测序流程 | 第19-20页 |
2.9.3 转录组数据分析流程 | 第20页 |
2.10 实时荧光定量PCR检测 | 第20-22页 |
2.10.1 总RNA的提取 | 第20-21页 |
2.10.2 实时荧光定量PCR检测 | 第21-22页 |
3 结果与分析 | 第22-55页 |
3.1 内源NO/H_2S介导H_2S/NO促进三萜积累的研究 | 第22-29页 |
3.1.1 外源H_2S对白桦悬浮细胞干重与三萜累积的影响 | 第22-24页 |
3.1.2 外源H_2S对白桦悬浮细胞中内源H_2S与NO含量的影响 | 第24-25页 |
3.1.3 内源NO/H_2S介导H_2S/NO对白桦酯醇积累的影响 | 第25-28页 |
3.1.4 讨论 | 第28-29页 |
3.2 白桦GSNOR转基因植株差异表达基因分析 | 第29-33页 |
3.2.1 转录组数据的质量监控 | 第29页 |
3.2.2 白桦Unigene基本注释 | 第29-31页 |
3.2.3 差异表达基因概况 | 第31-33页 |
3.2.4 讨论 | 第33页 |
3.3 GSNOR与Unigene相关性分析 | 第33-51页 |
3.3.1 GSNOR与Unigene相关性分析 | 第33-35页 |
3.3.2 GSNOR与三萜合成相关性分析 | 第35-36页 |
3.3.3 差异表达基因的相关性分析 | 第36-38页 |
3.3.4 白桦转录因子家族分析 | 第38-51页 |
3.3.5 讨论 | 第51页 |
3.4 差异表达基因分析 | 第51-55页 |
3.4.1 差异倍数大于10的Unigene分析 | 第51-52页 |
3.4.2 谷胱甘肽代谢相关基因的差异表达 | 第52页 |
3.4.3 硫代谢相关基因的差异表达 | 第52页 |
3.4.4 氮代谢相关基因的差异表达 | 第52页 |
3.4.5 差异表达基因的验证 | 第52-53页 |
3.4.6 讨论 | 第53-55页 |
结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-60页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第60-61页 |
致谢 | 第61-62页 |