| 摘要 | 第5-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 第一章 前言 | 第10-17页 |
| 1.1 CaM的结构 | 第10-11页 |
| 1.2 CAM和CAMBP的结合特性 | 第11-12页 |
| 1.3 IQ基序与钙调素结合蛋白家族 | 第12-13页 |
| 1.4 IQM家族的研究现状 | 第13-16页 |
| 1.4.1 IQM家族 | 第13-15页 |
| 1.4.2 IQM1的研究现状 | 第15-16页 |
| 1.5 研究目的和意义 | 第16-17页 |
| 第二章 材料与方法 | 第17-36页 |
| 2.1 实验材料 | 第17-20页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第17页 |
| 2.1.2 相关菌种和质粒 | 第17页 |
| 2.1.3 酶、试剂盒和主要试剂 | 第17页 |
| 2.1.4 溶液和培养基 | 第17-20页 |
| 2.2 实验方法与步骤 | 第20-36页 |
| 2.2.1 拟南芥的培养 | 第20页 |
| 2.2.2 拟南芥叶片总蛋白提取方法 | 第20页 |
| 2.2.3 蛋白免疫共沉淀 | 第20-21页 |
| 2.2.4 Western Blot | 第21-23页 |
| 2.2.5 引物设计 | 第23-25页 |
| 2.2.6 PCR扩增 | 第25页 |
| 2.2.7 双酶切体系 | 第25-26页 |
| 2.2.8 目的片段回收和纯化 | 第26-27页 |
| 2.2.9 大肠杆菌感受态的制备 | 第27页 |
| 2.2.10 大肠杆菌转化(热激法) | 第27-28页 |
| 2.2.11 转化子筛选鉴定 | 第28页 |
| 2.2.12 酵母感受态的制备 | 第28页 |
| 2.2.13 酵母转化 | 第28-29页 |
| 2.2.14 酵母双杂交筛选cDNA文库 | 第29页 |
| 2.2.15 酵母筛库阳性克隆鉴定 | 第29页 |
| 2.2.16 X-gal蓝斑实验分析筛选阳性克隆 | 第29-30页 |
| 2.2.17 酵母质粒提取 | 第30-31页 |
| 2.2.18 碱裂解法提取大肠杆菌质粒 | 第31页 |
| 2.2.19 BIFC实验 | 第31-32页 |
| 2.2.20 CRISPR/Cas9技术构建突变体 | 第32-36页 |
| 第三章 结果与分析 | 第36-50页 |
| 3.1 植物体内IQM1蛋白的表达 | 第36-38页 |
| 3.2 酵母双杂交筛选cDNA文库结果分析 | 第38-43页 |
| 3.2.1 IQM1蛋白自激活鉴定 | 第38-39页 |
| 3.2.2 IQM1互作蛋白的筛选 | 第39-41页 |
| 3.2.3 候选IQM1互作蛋白的酵母双杂交鉴定 | 第41-43页 |
| 3.3 候选IQM1互作蛋白的双分子荧光互补分析 | 第43-47页 |
| 3.3.1 BiFC载体的构建 | 第43-44页 |
| 3.3.2 BiFC分析 | 第44-47页 |
| 3.4 IQM1互作蛋白的基因组编辑载体的构建 | 第47-50页 |
| 第四章 讨论 | 第50-53页 |
| 参考文献 | 第53-58页 |
| 附录 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59页 |