致谢 | 第5-6页 |
摘要 | 第6-9页 |
abstract | 第9-12页 |
缩写和符号清单 | 第16-20页 |
第一章 文献综述 | 第20-30页 |
引言 | 第20页 |
1.1 真菌产孢的多样性及生物学意义 | 第20-22页 |
1.2 真菌无性产孢分子机制进展 | 第22-24页 |
1.3 丝状真菌产孢相关调控转录因子的研究进展 | 第24-26页 |
1.4 绿僵菌分子生物学相关研究 | 第26-27页 |
1.5 miRNA的研究简介 | 第27-30页 |
1.5.1 miRNA功能的研究方法简介 | 第28-29页 |
1.5.2 miRNA调控功能的研究 | 第29-30页 |
第二章 引言 | 第30-34页 |
2.1 研究目的与意义 | 第30-32页 |
2.2 本论文的主要研究内容 | 第32-34页 |
第三章 罗伯茨绿僵菌产孢调控相关转录因子StuA功能研究 | 第34-70页 |
引言 | 第34页 |
3.1 材料与方法 | 第34-39页 |
3.1.1 实验材料 | 第34-35页 |
3.1.2 实验试剂 | 第35-36页 |
3.1.3 实验试剂 | 第36页 |
3.1.4 实验常用溶液配方 | 第36-37页 |
3.1.5 培养基 | 第37-39页 |
3.2 实验方法 | 第39-49页 |
3.2.1 生物信息学分析及进化树构建 | 第39-40页 |
3.2.2 MrStuA突变及回补菌株的获得 | 第40-43页 |
3.2.3 荧光定量RealTimePCR分析产孢相关基因表达 | 第43-46页 |
3.2.4 转基因菌株生物学性状分析 | 第46-49页 |
3.3 结果与分析 | 第49-67页 |
3.3.1 序列比对、系统进化树构建及敲除株的获得 | 第49-52页 |
3.3.2 重组载体的构建及转基因菌株的获得 | 第52-54页 |
3.3.3 荧光定量RealtimePCR分析产孢相关基因表达 | 第54-55页 |
3.3.4 转基因菌株生物学性状测定 | 第55-62页 |
3.3.5 数字表达谱分析 | 第62-67页 |
3.4 讨论 | 第67-69页 |
3.5 结论 | 第69-70页 |
第四章 罗伯茨绿僵菌产孢调控相关转录因子AbaA功能研究 | 第70-83页 |
引言 | 第70页 |
4.1 材料与方法 | 第70-71页 |
4.1.1 实验材料 | 第70页 |
4.1.2 实验仪器 | 第70页 |
4.1.3 实验试剂 | 第70页 |
4.1.4 实验常用溶液配方 | 第70页 |
4.1.5 培养基 | 第70-71页 |
4.2 实验方法 | 第71-75页 |
4.2.1 蛋白质结构的生物信息学分析 | 第71页 |
4.2.2 AbaA突变及回补菌株的获得 | 第71-73页 |
4.2.3 AbaA转基因菌株生物学性状测定 | 第73-74页 |
4.2.4 荧光定量Real Time PCR分析产孢相关基因表达 | 第74-75页 |
4.3 结果与分析 | 第75-81页 |
4.3.1 蛋白质结构分析 | 第75页 |
4.3.2 AbaA重组载体构建及转基因菌株的获得 | 第75-77页 |
4.3.3 转基因菌株生物学性状测定 | 第77-80页 |
4.3.4 荧光定量PCR检测转基因菌株产孢相关基因的表达 | 第80-81页 |
4.4 讨论 | 第81-82页 |
4.5 结论 | 第82-83页 |
第五章 罗伯茨绿僵菌产孢调控相关milRNA的功能研究 | 第83-101页 |
引言 | 第83页 |
5.1 材料与方法 | 第83-85页 |
5.1.1 实验材料 | 第83-84页 |
5.1.2 实验仪器 | 第84-85页 |
5.1.3 实验试剂 | 第85页 |
5.2 实验方法 | 第85-91页 |
5.2.1 目标milRNA的选择 | 第85页 |
5.2.2 STTM体系构建 | 第85-87页 |
5.2.3 STTM转基因菌株的获取 | 第87-88页 |
5.2.4 miRNA7过表达菌株的获取 | 第88页 |
5.2.5 茎环qRT-PCR检测转基因菌株milRNA的表达 | 第88-89页 |
5.2.6 STTM转基因菌株生物学性状分析 | 第89-91页 |
5.3 结果与分析 | 第91-99页 |
5.3.1 STTM重组载体构建及转基因菌株的获得 | 第91-92页 |
5.3.2 过表达菌株重组载体的构建及转基因菌株的获得 | 第92页 |
5.3.3 荧光定量RealtimePCR对小RNA差异表达分析 | 第92-99页 |
5.4 讨论 | 第99-100页 |
5.5 结论 | 第100-101页 |
第六章 结论和展望 | 第101-105页 |
6.1 结论 | 第101-104页 |
6.1.1 绿僵菌APSES家族转录因子StuA | 第101-102页 |
6.1.2 绿僵菌TEA/ATTS家族转录因子AbaA | 第102页 |
6.1.3 STTM法对绿僵菌milRNA7调控功能的初步研究 | 第102-104页 |
6.2 展望 | 第104-105页 |
创新点 | 第105-106页 |
参考文献 | 第106-113页 |
作者简介 | 第113页 |
一、个人基本情况 | 第113页 |
二、教育及工作经历 | 第113页 |
三、参加的科研项目 | 第113页 |
四、攻读本学位期间发表的学术论文 | 第113页 |