| 个人简历 | 第3-7页 |
| 英文缩略词索引 | 第7-9页 |
| 中文摘要 | 第9-11页 |
| 英文摘要 | 第11-12页 |
| 前言 | 第13-17页 |
| 材料与方法 | 第17-45页 |
| 1 实验材料 | 第17-27页 |
| 1.1 主要仪器 | 第17-18页 |
| 1.2 细胞株 | 第18页 |
| 1.3 细胞转染材料 | 第18-22页 |
| 1.4 主要试剂 | 第22-24页 |
| 1.5 常用试剂的配制 | 第24-27页 |
| 2 实验方法 | 第27-45页 |
| 2.1 启动子区域的生物信息学分析 | 第27-28页 |
| 2.2 细胞培养实验前准备 | 第28-29页 |
| 2.3 细胞培养 | 第29-30页 |
| 2.4 质粒转化及提取 | 第30-31页 |
| 2.5 总RNA提取 | 第31-33页 |
| 2.6 逆转录PCR | 第33页 |
| 2.7 实时荧光定量PCR | 第33-35页 |
| 2.8 核蛋白提取 | 第35-36页 |
| 2.9 Western blot | 第36-37页 |
| 2.10 甲基化处理及检测 | 第37-38页 |
| 2.11 质粒胶回收 | 第38-39页 |
| 2.12 双荧光素酶检测 | 第39-40页 |
| 2.13 染色质免疫共沉淀(Chromatin immunoprecipitation,ChIP) | 第40-43页 |
| 2.14 统计学分析 | 第43-45页 |
| 结果 | 第45-58页 |
| 1. OY-TES-1启动子分析及转录因子结合位点预测 | 第45-47页 |
| 1.1 获取OY-TES-1基因的5'上游序列 | 第45页 |
| 1.2 查询OY-TES-1启动子区域 | 第45-46页 |
| 1.3 转录因子结合位点预测 | 第46-47页 |
| 2. Sp1-siRNA对靶基因的干扰效果 | 第47-50页 |
| 3. pcDNA3.1-Sp1对细胞增加外源性Sp1表达的效果 | 第50-53页 |
| 4. 确定OY-TES-1启动子区域 | 第53页 |
| 4.1 OY-TES-1基因启动子荧光素酶报基因质粒的构建及鉴定 | 第53页 |
| 4.2 OY-TES-1重组启动子报告基因活性检测 | 第53页 |
| 5. Sp1对OY-TES-1启动子活性的影响 | 第53-56页 |
| 5.1 下调Sp1对OY-TES-1启动子活性的影响 | 第53-54页 |
| 5.2 上调Sp1对OY-TES-1启动子活性的影响 | 第54-55页 |
| 5.3 突变Sp1位点对OY-TES-1启动子活性的影响 | 第55-56页 |
| 6. 确定Sp1与OY-TES-1启动子结合 | 第56页 |
| 7. 甲基化对OY-TES-1启动子的影响 | 第56-58页 |
| 讨论 | 第58-62页 |
| 结论 | 第62-63页 |
| 正文参考文献 | 第63-68页 |
| 综述 | 第68-78页 |
| 综述参考文献 | 第74-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第79页 |
