| 缩略语表 | 第5-7页 |
| 中文摘要 | 第7-10页 |
| 英文摘要 | 第10-12页 |
| 前言 | 第13-15页 |
| 文献回顾 | 第15-28页 |
| 第一部分EGFR 19、21外显子基因突变拷贝数荧光偏振检测标准体系的建立 | 第28-45页 |
| 1 实验材料 | 第28-31页 |
| 1.1 主要实验仪器 | 第28-29页 |
| 1.2 主要购买试剂 | 第29页 |
| 1.3 主要配制试剂 | 第29-31页 |
| 2 实验步骤 | 第31-38页 |
| 2.1 设计引物与探针 | 第31页 |
| 2.2 EGFR 19、21外显子野生型与突变型标准品的构建 | 第31-36页 |
| 2.3 荧光偏振检测PCR反应体系的初步建立 | 第36-37页 |
| 2.4 荧光偏振检测标准体系的建立与优化 | 第37页 |
| 2.5 验证荧光偏振检测标准体系的敏感性 | 第37页 |
| 2.6 验证荧光偏振检测标准体系的稳定性 | 第37-38页 |
| 2.7 验证荧光偏振检测标准体系的特异性 | 第38页 |
| 2.8 统计分析检测结果 | 第38页 |
| 3 结果 | 第38-43页 |
| 3.1 重组质粒标准品的验证 | 第38-39页 |
| 3.2 琼脂糖凝胶电泳验证PCR产物的变化趋势 | 第39-40页 |
| 3.3 反应体系的优化 | 第40-41页 |
| 3.4 荧光偏振值与模板拷贝数关系的曲线趋势图 | 第41-42页 |
| 3.5 荧光偏振检测反应标准体系的灵敏度分析 | 第42页 |
| 3.6 荧光偏振检测反应标准体系的稳定性分析 | 第42页 |
| 3.7 荧光偏振检测反应标准体系的特异性分析 | 第42-43页 |
| 4 讨论 | 第43-45页 |
| 第二部分 非小细胞肺癌临床标本中EGFR基因突变丰度的检测 | 第45-57页 |
| 1 实验材料 | 第45-47页 |
| 1.1 实验仪器及设备 | 第45-46页 |
| 1.2 购买试剂 | 第46页 |
| 1.3 配制试剂 | 第46-47页 |
| 2 实验方法 | 第47-50页 |
| 2.1 收集患者标本与资料 | 第47页 |
| 2.2 设计引物与探针 | 第47-48页 |
| 2.3 标本DNA提取 | 第48页 |
| 2.4 标本荧光偏振PCR与基因突变丰度的检测 | 第48-49页 |
| 2.5 直接测序法验证标本EGFR基因突变 | 第49页 |
| 2.6 统计分析随访资料 | 第49-50页 |
| 3 结果 | 第50-55页 |
| 3.1 整理患者临床资料 | 第50页 |
| 3.2 PCR产物片段大小验证 | 第50-51页 |
| 3.3 标本荧光偏振PCR与基因突变丰度的检测 | 第51页 |
| 3.4 直接测序结果与荧光偏振检测结果的比较 | 第51-53页 |
| 3.5 疗效与生存分析 | 第53-55页 |
| 4 讨论 | 第55-57页 |
| 小结 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-65页 |
| 个人简历和研究成果 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
