| 中文摘要 | 第3-7页 |
| Abstract | 第7-11页 |
| 目录 | 第12-16页 |
| 符号说明 | 第16-17页 |
| 文献综述 | 第17-39页 |
| 一. 猪感染BVDV的研究进展 | 第17-20页 |
| 1. 猪源BVDV的流行史 | 第17-19页 |
| 2. 猪感染BVDV的临床症状 | 第19页 |
| 3. 猪源BVDV的传染源 | 第19-20页 |
| 4. 猪感染BVDV和CSFV的鉴别诊断 | 第20页 |
| 二. BVDV感染性克隆的研究进展 | 第20-24页 |
| 1. 感染性克隆研究的意义和策略 | 第21-22页 |
| 2. BVDV感染性克隆的应用 | 第22-24页 |
| 三. 非结构蛋白与细胞抗病毒天然免疫 | 第24-29页 |
| 1. 细胞抗病毒天然免疫 | 第24-27页 |
| 2. BVDV非结构蛋白的功能研究进展 | 第27-29页 |
| 四. 开展本论文研究的背景及意义 | 第29-30页 |
| 参考文献 | 第30-39页 |
| 第一章 猪源牛病毒性腹泻病毒的分离与鉴定 | 第39-52页 |
| 摘要 | 第39页 |
| Abstract | 第39-41页 |
| 1. 材料 | 第41页 |
| 1.1 样品来源及背景 | 第41页 |
| 1.2 毒株、细胞和菌株 | 第41页 |
| 1.3 主要试剂 | 第41页 |
| 1.4 主要仪器 | 第41页 |
| 2. 方法 | 第41-44页 |
| 2.1 引物设计 | 第41-42页 |
| 2.2 病毒的分离培养 | 第42页 |
| 2.3 间接免疫荧光 | 第42-43页 |
| 2.4 病毒RNA的提取和RT-PCR | 第43页 |
| 2.5 基因克隆及测序分析 | 第43-44页 |
| 3. 结果 | 第44-48页 |
| 3.1 RT-PCR检测 | 第44-45页 |
| 3.2 间接免疫荧光检测结果 | 第45-46页 |
| 3.3 基因分型 | 第46-47页 |
| 3.4 E2基因的同源性分析 | 第47-48页 |
| 4. 讨论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-52页 |
| 第二章 猪源BVDV-2分离株SH-28全基因组序列的测定与分析 | 第52-65页 |
| 摘要 | 第52页 |
| Abstract | 第52-54页 |
| 1. 材料 | 第54页 |
| 1.1 细胞、毒株和菌株 | 第54页 |
| 1.2 主要试剂 | 第54页 |
| 1.3 主要仪器 | 第54页 |
| 2. 方法 | 第54-58页 |
| 2.1 病毒增殖 | 第54-55页 |
| 2.2 引物设计 | 第55-56页 |
| 2.3 病毒基因组中间序列的测定 | 第56页 |
| 2.4 病毒基因组末端序列的测定 | 第56-57页 |
| 2.5 基因序列的拼接与分析 | 第57-58页 |
| 3. 结果 | 第58-62页 |
| 3.1 RT-PCR扩增、测序及拼接 | 第58页 |
| 3.2 SH-28全基因组序列遗传信息分析 | 第58-62页 |
| 4. 讨论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-65页 |
| 第三章 猪源BVDV-2分离株感染性克隆的构建及病毒拯救 | 第65-88页 |
| 摘要 | 第65页 |
| Abstract | 第65-67页 |
| 1. 材料 | 第67页 |
| 1.1 病毒、细胞、菌体和载体 | 第67页 |
| 1.2 试剂与抗体 | 第67页 |
| 1.3 主要仪器 | 第67页 |
| 2. 方法 | 第67-74页 |
| 2.1 SH-28株全长cDNA感染性克隆的构建 | 第67-71页 |
| 2.2 亚基因感染性克隆的构建 | 第71-72页 |
| 2.3 体外转录 | 第72-73页 |
| 2.4 细胞转染 | 第73页 |
| 2.5 感染性病毒粒子的鉴定 | 第73-74页 |
| 3. 结果 | 第74-83页 |
| 3.1 SH-28株全长cDNA感染性克隆的构建与鉴定 | 第75-78页 |
| 3.2 亚基因组感染性克隆的构建与鉴定 | 第78-80页 |
| 3.3 vASH病毒的拯救与鉴定 | 第80-82页 |
| 3.4 vASH⊿N~(pro)缺失病毒的拯救与鉴定 | 第82-83页 |
| 3.5 病毒滴度增长趋势的比较 | 第83页 |
| 4. 讨论 | 第83-85页 |
| 参考文献 | 第85-88页 |
| 第四章 猪源BVDV-2非结构蛋白的功能探析 | 第88-104页 |
| 摘要 | 第88页 |
| Abstract | 第88-90页 |
| 1. 材料 | 第90-91页 |
| 1.1 病毒、细胞、菌体和载体 | 第90页 |
| 1.2 试剂与抗体 | 第90页 |
| 1.3 主要仪器 | 第90-91页 |
| 2. 方法 | 第91-94页 |
| 2.1 引物设计 | 第91-92页 |
| 2.2 重组真核表达质粒的构建与鉴定 | 第92页 |
| 2.3 细胞转染 | 第92-93页 |
| 2.4 Western blot检测非结构蛋白的表达 | 第93页 |
| 2.5 荧光定量PCR检测 | 第93-94页 |
| 3. 结果 | 第94-100页 |
| 3.1 重组真核表达质粒的鉴定 | 第94-96页 |
| 3.2 非结构蛋白表达的检测 | 第96-98页 |
| 3.3 猪源BVDV-2及其非结构蛋白对IFN-I表达的影响 | 第98页 |
| 3.4 过量表达非结构蛋白对猪源BVDV-2诱导抗病毒蛋白表达的影响 | 第98-99页 |
| 3.5 缺失表达Npro蛋白对猪源BVDV-2诱导抗病毒蛋白表达的影响 | 第99-100页 |
| 4. 讨论 | 第100-102页 |
| 参考文献 | 第102-104页 |
| 全文小结 | 第104-105页 |
| 本论文的创新点 | 第105-106页 |
| 致谢 | 第106-107页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第107-110页 |
