摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
缩略语表 | 第9-14页 |
第一章 绪论 | 第14-23页 |
1.1 缺血性卒中概述以及损伤机制 | 第14-19页 |
1.1.1 缺血性卒中概述 | 第14-15页 |
1.1.2 缺血性卒中的损伤机制 | 第15-18页 |
1.1.3 缺血性卒中后的修复 | 第18-19页 |
1.2 二甲双胍在缺血性卒中的作用 | 第19-21页 |
1.2.1 AMPK的结构与功能 | 第19-20页 |
1.2.2 二甲双胍以及AMPK在缺血性卒中中的作用 | 第20-21页 |
1.3 结论 | 第21-23页 |
第二章 二甲双胍在脑缺血急性期中的作用 | 第23-51页 |
2.1 引言 | 第23-24页 |
2.2 材料与方法 | 第24-40页 |
2.2.1 研究对象 | 第24页 |
2.2.2 主要仪器与试剂 | 第24-28页 |
2.2.3 实验设计 | 第28-29页 |
2.2.4 建立小鼠短暂大脑中动脉栓塞模型(tMCAO) | 第29页 |
2.2.5 腹腔注射二甲双胍 | 第29页 |
2.2.6 术前术后空腹血糖,血气分析以及体重测定 | 第29-30页 |
2.2.7 冰冻切片的制备 | 第30页 |
2.2.8 冰冻切片焦油紫染色以及梗死体积统计 | 第30-31页 |
2.2.9 行为学评估 | 第31页 |
2.2.10 蛋白质提取及蛋白印记 | 第31-33页 |
2.2.11 MPO活力测定 | 第33页 |
2.2.12 RNA提取及Real-Time PCR | 第33-37页 |
2.2.13 DAB染色以及免疫荧光染色 | 第37-38页 |
2.2.14 IgG染色 | 第38-39页 |
2.2.15 统计 | 第39-40页 |
2.3 实验结果 | 第40-48页 |
2.3.1 二甲双胍减轻缺血性脑损伤 | 第40页 |
2.3.2 二甲双胍改善小鼠脑缺血后的行为学 | 第40-41页 |
2.3.3 二甲双胍减少小鼠脑缺血后中性粒细胞的浸润 | 第41-44页 |
2.3.4 二甲双胍能够减少炎症因子的表达 | 第44页 |
2.3.5 二甲双胍减轻IgG的外渗 | 第44-45页 |
2.3.6 二甲双胍促进紧密连接蛋白的重建 | 第45-48页 |
2.3.7 二甲双胍不影响小鼠的血糖、血气分析以及体重 | 第48页 |
2.4 讨论 | 第48-51页 |
第三章 二甲双胍在脑缺血急性期中的作用机制研究 | 第51-62页 |
3.1 引言 | 第51-52页 |
3.2 材料与方法 | 第52-56页 |
3.2.1 研究对象 | 第52页 |
3.2.2 主要仪器与试剂 | 第52页 |
3.2.3 bEND.3 细胞的培养及传代 | 第52-53页 |
3.2.4 体外糖氧剥夺复氧模型 | 第53页 |
3.2.5 bEND.3 处理 | 第53-54页 |
3.2.6 建立小鼠短暂大脑中动脉缺血模型(tMCAO) | 第54页 |
3.2.7 腹腔注射二甲双胍 | 第54页 |
3.2.8 冰冻切片的制备 | 第54页 |
3.2.9 蛋白质提取及蛋白印记 | 第54-56页 |
3.2.10 DAB染色 | 第56页 |
3.2.11统计 | 第56页 |
3.3 实验结果 | 第56-60页 |
3.3.1 二甲双胍促进bEND.3 细胞AMPK的磷酸化 | 第56-57页 |
3.3.2 二甲双胍下调糖氧剥夺后bEND.3 细胞间粘附因子-1 的表达 | 第57-59页 |
3.3.3 二甲双胍促进小鼠脑内AMPK的磷酸化 | 第59页 |
3.3.4 二甲双胍减少缺血后ICAM-1 的表达 | 第59-60页 |
3.4 讨论 | 第60-62页 |
第四章 二甲双胍在脑缺血修复期中的作用 | 第62-73页 |
4.1 引言 | 第62-63页 |
4.2 材料与方法 | 第63-66页 |
4.2.1 研究对象 | 第63页 |
4.2.2 主要仪器与试剂 | 第63页 |
4.2.3 建立小鼠短暂大脑中动脉缺血模型(tMCAO) | 第63-64页 |
4.2.4 冰冻切片及漂片的制备 | 第64页 |
4.2.5 冰冻切片焦油紫染色以及萎缩体积统计 | 第64页 |
4.2.6 行为学评估 | 第64页 |
4.2.7 蛋白质提取及蛋白印记 | 第64页 |
4.2.8 免疫荧光染色及漂片法BrdU/ DCX以及BrdU/Lectin免疫荧光双染 | 第64-66页 |
4.2.9 统计 | 第66页 |
4.3 实验结果 | 第66-72页 |
4.3.1 二甲双胍减少萎缩体积 | 第66-67页 |
4.3.2 二甲双胍促进缺血后血管再生 | 第67-68页 |
4.3.3 二甲双胍增加脑缺血后SVZ区Nestin阳性细胞的数目 | 第68-69页 |
4.3.4 二甲双胍促进脑缺血后SVZ区的BrdU/DCX双阳性的表达 | 第69-71页 |
4.3.5 二甲双胍促进脑缺血后AMPK以及eNOS的磷酸化 | 第71-72页 |
4.4 讨论 | 第72-73页 |
总结 | 第73-74页 |
结论 | 第74-75页 |
参考文献 | 第75-81页 |
附录 | 第81-82页 |
攻读学位期间发表的学位论文 | 第82-83页 |
致谢 | 第83页 |