| 摘要 | 第9-12页 |
| Abstract | 第12-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-25页 |
| 1 酶促褐变与多酚氧化酶 | 第17-18页 |
| 2 多酚氧化酶的酶学特性 | 第18页 |
| 3 多酚氧化酶的蛋白结构研究 | 第18-19页 |
| 4 PPO基因的分子生物学研究 | 第19-22页 |
| 4.1 PPO基因的克隆 | 第19-20页 |
| 4.2 PPO基因特性 | 第20页 |
| 4.2.1 PPO基因具有多基因家族性和高度保守性 | 第20页 |
| 4.2.2 PPO基因内含子研究 | 第20页 |
| 4.3 PPO基因表达研究 | 第20-21页 |
| 4.4 PPO基因的原核表达 | 第21-22页 |
| 5 多酚氧化酶的功能研究 | 第22-23页 |
| 6 研究目的、意义与主要内容 | 第23-25页 |
| 6.1 研究目的与意义 | 第23页 |
| 6.2 研究技术路线 | 第23-25页 |
| 第二章 丝瓜褐变过程中PPO酶活性的变化分析 | 第25-32页 |
| 1 材料与方法 | 第25-27页 |
| 1.1材料与试剂 | 第25-26页 |
| 1.2 试验方法 | 第26-27页 |
| 2 结果与分析 | 第27-31页 |
| 2.1 丝瓜褐变度结果分析 | 第27-28页 |
| 2.2 4℃冷藏处理和25℃常温贮存下丝瓜总酚含量的变化 | 第28-29页 |
| 2.3 4℃冷藏过程中丝瓜PPO酶活性变化 | 第29-30页 |
| 2.4 25℃常温处理下丝瓜PPO酶活性变化 | 第30-31页 |
| 3 结论与讨论 | 第31-32页 |
| 第三章 丝瓜PPO家族基因的克隆 | 第32-41页 |
| 1 材料与方法 | 第32-36页 |
| 1.1 材料 | 第32-33页 |
| 1.2 方法 | 第33-36页 |
| 2 结果与分析 | 第36-40页 |
| 2.1 丝瓜样品总RNA提取质量 | 第36页 |
| 2.2 丝瓜PPO基因家族的克隆 | 第36-37页 |
| 2.3 丝瓜PPO cDNA序列比较 | 第37-40页 |
| 3 结论与讨论 | 第40-41页 |
| 第四章 丝瓜PPO基因家族的生物信息学分析 | 第41-52页 |
| 1 材料与方法 | 第41页 |
| 1.1 材料 | 第41页 |
| 1.2 方法 | 第41页 |
| 2 结果与分析 | 第41-50页 |
| 2.1 LcPPO基因家族蛋白一级结构分析 | 第41-43页 |
| 2.2 LcPPO基因家族的二、三级结构预测与分析 | 第43-45页 |
| 2.3 LcPPO基因家族保守区域序列分析 | 第45页 |
| 2.4 LcPPO基因家族的亚细胞定位与转移肽的预测分析 | 第45-46页 |
| 2.5 LcPPO基因家族的跨膜结构与信号肽的预测分析 | 第46-47页 |
| 2.6 LcPPO基因蛋白磷酸位点预测的预测分析 | 第47-49页 |
| 2.7 LcPPO基因家族同源性分析及进化树图谱的构建 | 第49-50页 |
| 3 结论与讨论 | 第50-52页 |
| 第五章 丝瓜褐变中PPO家族基因的表达及相关性分析 | 第52-59页 |
| 1 材料与方法 | 第52-54页 |
| 1.1 材料与试剂 | 第52页 |
| 1.1.1 试验材料 | 第52页 |
| 1.1.2 试验仪器 | 第52页 |
| 1.1.3 试验试剂 | 第52页 |
| 1.2 试验方法 | 第52-54页 |
| 1.2.1 丝瓜样品的处理 | 第52-53页 |
| 1.2.2 总RNA的提取与cDNA模板的合成 | 第53页 |
| 1.2.3 实时荧光定量PCR引物设计 | 第53页 |
| 1.2.4 实时荧光定量PGR | 第53-54页 |
| 1.2.5 数据处理与分析 | 第54页 |
| 2 结果与分析 | 第54-57页 |
| 2.1 丝瓜不同组织中LcPPO1、LcPPO2、LcPPO3基因的表达分析 | 第54页 |
| 2.2 丝瓜不同品种LcPPO1、LcPPO2、LcPPO3基因的表达分析 | 第54-55页 |
| 2.3 4℃冷藏过程下丝瓜果肉LcPPO1、LcPPO2、LcPPO3基因的表达分析 | 第55-56页 |
| 2.4 25℃常温处理下丝瓜LcPPO1、LcPPO2、LcPPO3基因的表达分析 | 第56页 |
| 2.5 LcPPO荧光定量表达量、酶活性以及总酚含量变化的相关性分析 | 第56-57页 |
| 3 结论与讨论 | 第57-59页 |
| 第六章 丝瓜LcPPO2的原核表达 | 第59-69页 |
| 1 材料与方法 | 第59-65页 |
| 1.1 材料与试剂 | 第59-60页 |
| 1.2 方法 | 第60-65页 |
| 2 结果与分析 | 第65-67页 |
| 2.1 克隆载体的构建 | 第65页 |
| 2.2 表达载体的构建与鉴定 | 第65-66页 |
| 2.3 重组质粒的鉴定 | 第66-67页 |
| 2.4 融合蛋白诱导表达 | 第67页 |
| 3 结论与讨论 | 第67-69页 |
| 全文总结与展望 | 第69-71页 |
| 1.全文总结 | 第69-70页 |
| 2.展望 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-78页 |
| 附录 | 第78-81页 |
| 攻读硕士期间发表论文、参加学术会议与获奖情况 | 第81-82页 |
| 致谢 | 第82页 |
