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Slc7a11在獭兔皮毛黑色素沉积中的作用机制研究

中文摘要第2-4页
Abstract第4-5页
符号说明第9-10页
第一章 文献综述第10-17页
    1 哺乳动物色素沉积理论第10-12页
        1.1 哺乳动物毛色形成第10页
        1.2 黑色素介绍第10-11页
        1.3 色素沉积相关基因介绍第11-12页
    2 Slc7a11的研究进展第12-13页
        2.1 SLC蛋白家族第12页
        2.2 Slc7a11基因的功能第12页
        2.3 Slc7a11与毛色沉积的关系第12-13页
    3 黑色素细胞的研究进展第13-14页
        3.1 黑色素细胞的形态和主要功能第13页
        3.2 黑色素细胞的生成第13页
        3.3 黑色素细胞的发育第13-14页
        3.4 黑色素细胞的标志物第14页
    4 黑色素细胞分离与鉴定第14-16页
        4.1 细胞的分离方法第14-15页
        4.2 表皮黑色素细胞的鉴定方法第15-16页
    5 本研究的目的与意义第16-17页
第二章 兔黑色素细胞的分离及鉴定第17-25页
    1 材料与方法第17-21页
        1.1 实验材料第17页
            1.1.1 实验动物第17页
            1.1.2 主要试剂第17页
            1.1.3 主要仪器第17页
        1.2 实验方法第17-21页
            1.2.1 黑色素细胞的分离与培养第17-19页
            1.2.2 黑色素细胞的鉴定第19-21页
    2 结果与分析第21-24页
        2.1 黑色素细胞的分离获取第21-22页
        2.2 多巴染色第22-23页
        2.3 免疫细胞化学染色第23-24页
    3 讨论第24-25页
第三章 Slc7a11基因在不同毛色獭兔皮肤中表达分析第25-35页
    1 材料与方法第25-30页
        1.1 实验材料第25页
            1.1.1 实验动物第25页
            1.1.2 主要试剂第25页
            1.1.3 主要仪器第25页
        1.2 实验方法第25-30页
            1.2.1 Slc7a11基因全长获取第25-27页
            1.2.2 免疫组织化学染色第27-28页
            1.2.3 检测Slc7a11在不同毛色獭兔皮肤中的表达规律第28-30页
    2 结果与分析第30-33页
        2.1 兔Slc7a11基因的克隆第30页
        2.2 Slc7a11在不同毛色獭兔皮肤中的定位分析第30-31页
        2.3 不同毛色獭兔皮肤中Slc7a11 mRNA表达水平分析第31-32页
        2.4 不同毛色獭兔皮肤中Slc7a11蛋白表达水平分析第32-33页
    3 讨论第33-35页
第四章 Slc7a11基因表达量变化对黑色素沉积的影响第35-51页
    1 材料与方法第35-41页
        1.1 实验材料第35页
            1.1.1 黑色素细胞第35页
            1.1.2 主要试剂第35页
            1.1.3 主要仪器第35页
        1.2 实验方法第35-41页
            1.2.1 黑色素细胞的分离培养第36页
            1.2.2 siRNA设计合成与转染第36-37页
            1.2.3 细胞总RNA提取第37页
            1.2.4 荧光定量PCR第37-38页
            1.2.5 Wes系统Protein simple技术检测蛋白表达量第38页
            1.2.6 真核表达载体的构建与转染第38-41页
            1.2.7 细胞黑色素含量检测第41页
            1.2.8 数据处理第41页
    2 结果与分析第41-49页
        2.1 Slc7a11干扰对色素沉积基因表达及黑色素生成的影响第41-45页
        2.2 Slc7a11过表达对色素沉积基因表达及黑色素生成的影响第45-49页
    3 讨论第49-51页
第五章 Slc7a11启动子核心区域及关键转录因子鉴定第51-64页
    1 材料与方法第51-57页
        1.1 实验材料第51页
            1.1.1 实验细胞第51页
            1.1.2 主要试剂第51页
            1.1.3 主要仪器第51页
        1.2 实验方法第51-57页
            1.2.1 Slc7a11启动子区系列缺失载体的构建第51-53页
            1.2.2 细胞培养和瞬时转染第53-54页
            1.2.3 双荧光素酶活性检测第54页
            1.2.4 Slc7a11转录因子结合位点定点突变载体构建及活性检测第54页
            1.2.5 凝胶迁移实验(EMSA)第54-57页
            1.2.6 数据分析第57页
    2 结果与分析第57-63页
        2.1 Slc7a11核心转录区域的确定第57-59页
        2.2 Slc7a11与转录因子POU2F1相互作用关系的鉴定第59-63页
    3 讨论第63-64页
全文结论第64-65页
主要创新点第65-66页
参考文献第66-72页
致谢第72-73页
攻读学位期间发表学术论文目录第73-74页

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