中文摘要 | 第2-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
符号说明 | 第9-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-17页 |
1 哺乳动物色素沉积理论 | 第10-12页 |
1.1 哺乳动物毛色形成 | 第10页 |
1.2 黑色素介绍 | 第10-11页 |
1.3 色素沉积相关基因介绍 | 第11-12页 |
2 Slc7a11的研究进展 | 第12-13页 |
2.1 SLC蛋白家族 | 第12页 |
2.2 Slc7a11基因的功能 | 第12页 |
2.3 Slc7a11与毛色沉积的关系 | 第12-13页 |
3 黑色素细胞的研究进展 | 第13-14页 |
3.1 黑色素细胞的形态和主要功能 | 第13页 |
3.2 黑色素细胞的生成 | 第13页 |
3.3 黑色素细胞的发育 | 第13-14页 |
3.4 黑色素细胞的标志物 | 第14页 |
4 黑色素细胞分离与鉴定 | 第14-16页 |
4.1 细胞的分离方法 | 第14-15页 |
4.2 表皮黑色素细胞的鉴定方法 | 第15-16页 |
5 本研究的目的与意义 | 第16-17页 |
第二章 兔黑色素细胞的分离及鉴定 | 第17-25页 |
1 材料与方法 | 第17-21页 |
1.1 实验材料 | 第17页 |
1.1.1 实验动物 | 第17页 |
1.1.2 主要试剂 | 第17页 |
1.1.3 主要仪器 | 第17页 |
1.2 实验方法 | 第17-21页 |
1.2.1 黑色素细胞的分离与培养 | 第17-19页 |
1.2.2 黑色素细胞的鉴定 | 第19-21页 |
2 结果与分析 | 第21-24页 |
2.1 黑色素细胞的分离获取 | 第21-22页 |
2.2 多巴染色 | 第22-23页 |
2.3 免疫细胞化学染色 | 第23-24页 |
3 讨论 | 第24-25页 |
第三章 Slc7a11基因在不同毛色獭兔皮肤中表达分析 | 第25-35页 |
1 材料与方法 | 第25-30页 |
1.1 实验材料 | 第25页 |
1.1.1 实验动物 | 第25页 |
1.1.2 主要试剂 | 第25页 |
1.1.3 主要仪器 | 第25页 |
1.2 实验方法 | 第25-30页 |
1.2.1 Slc7a11基因全长获取 | 第25-27页 |
1.2.2 免疫组织化学染色 | 第27-28页 |
1.2.3 检测Slc7a11在不同毛色獭兔皮肤中的表达规律 | 第28-30页 |
2 结果与分析 | 第30-33页 |
2.1 兔Slc7a11基因的克隆 | 第30页 |
2.2 Slc7a11在不同毛色獭兔皮肤中的定位分析 | 第30-31页 |
2.3 不同毛色獭兔皮肤中Slc7a11 mRNA表达水平分析 | 第31-32页 |
2.4 不同毛色獭兔皮肤中Slc7a11蛋白表达水平分析 | 第32-33页 |
3 讨论 | 第33-35页 |
第四章 Slc7a11基因表达量变化对黑色素沉积的影响 | 第35-51页 |
1 材料与方法 | 第35-41页 |
1.1 实验材料 | 第35页 |
1.1.1 黑色素细胞 | 第35页 |
1.1.2 主要试剂 | 第35页 |
1.1.3 主要仪器 | 第35页 |
1.2 实验方法 | 第35-41页 |
1.2.1 黑色素细胞的分离培养 | 第36页 |
1.2.2 siRNA设计合成与转染 | 第36-37页 |
1.2.3 细胞总RNA提取 | 第37页 |
1.2.4 荧光定量PCR | 第37-38页 |
1.2.5 Wes系统Protein simple技术检测蛋白表达量 | 第38页 |
1.2.6 真核表达载体的构建与转染 | 第38-41页 |
1.2.7 细胞黑色素含量检测 | 第41页 |
1.2.8 数据处理 | 第41页 |
2 结果与分析 | 第41-49页 |
2.1 Slc7a11干扰对色素沉积基因表达及黑色素生成的影响 | 第41-45页 |
2.2 Slc7a11过表达对色素沉积基因表达及黑色素生成的影响 | 第45-49页 |
3 讨论 | 第49-51页 |
第五章 Slc7a11启动子核心区域及关键转录因子鉴定 | 第51-64页 |
1 材料与方法 | 第51-57页 |
1.1 实验材料 | 第51页 |
1.1.1 实验细胞 | 第51页 |
1.1.2 主要试剂 | 第51页 |
1.1.3 主要仪器 | 第51页 |
1.2 实验方法 | 第51-57页 |
1.2.1 Slc7a11启动子区系列缺失载体的构建 | 第51-53页 |
1.2.2 细胞培养和瞬时转染 | 第53-54页 |
1.2.3 双荧光素酶活性检测 | 第54页 |
1.2.4 Slc7a11转录因子结合位点定点突变载体构建及活性检测 | 第54页 |
1.2.5 凝胶迁移实验(EMSA) | 第54-57页 |
1.2.6 数据分析 | 第57页 |
2 结果与分析 | 第57-63页 |
2.1 Slc7a11核心转录区域的确定 | 第57-59页 |
2.2 Slc7a11与转录因子POU2F1相互作用关系的鉴定 | 第59-63页 |
3 讨论 | 第63-64页 |
全文结论 | 第64-65页 |
主要创新点 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-72页 |
致谢 | 第72-73页 |
攻读学位期间发表学术论文目录 | 第73-74页 |