| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 第一章 绪论 | 第14-24页 |
| 1. 翻译控制肿瘤蛋白（TCTP）的研究概况 | 第14-18页 |
| 1.1 TCTP 的基因结构 | 第14页 |
| 1.2 TCTP 的蛋白质结构 | 第14-15页 |
| 1.3 TCTP 的生物学功能 | 第15-18页 |
| 2. 对虾 TCTP 的研究概况 | 第18-19页 |
| 3. 对虾细胞培养研究概况 | 第19-21页 |
| 4. 对虾细胞永生性转化研究概况 | 第21-22页 |
| 5. 论文立题依据、研究内容和意义 | 第22-24页 |
| 第二章 凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)翻译控制肿瘤蛋白基因的克隆、eGFP 融合蛋白真核表达载体构建及其在对虾原代细胞中的过表达研究 | 第24-57页 |
| 1. 前言 | 第24-25页 |
| 2. 材料与方法 | 第25-47页 |
| 2.1 实验材料 | 第25-30页 |
| 2.1.1 实验用虾 | 第25页 |
| 2.1.2 质粒及 Plat-GP 细胞 | 第25-26页 |
| 2.1.3 实验仪器设备 | 第26-27页 |
| 2.1.4 实验药品 | 第27-28页 |
| 2.1.5 实验试剂及其配制方法 | 第28-30页 |
| 2.2 实验方法 | 第30-47页 |
| 2.2.1 凡纳滨对虾对虾翻译控制肿瘤蛋白（Lv-TCTP）基因 ORF 的克隆 | 第30-34页 |
| 2.2.2 去终止密码子的加强型绿色荧光蛋白（eGFP）基因片段克隆 | 第34-35页 |
| 2.2.3 融合蛋白表达载体 pcDNA3.1-eGFP/TCTP 的构建 | 第35-39页 |
| 2.2.4 pcDNA3.1-eGFP/TCTP 质粒在 Plat-GP 细胞中的表达验证 | 第39-42页 |
| 2.2.5 凡纳滨对虾类淋巴组织原代培养细胞的培养方法 | 第42页 |
| 2.2.6 pcDNA3.1-eGFP/TCTP 质粒在对虾原代培养细胞中的表达 | 第42-43页 |
| 2.2.7 绿色荧光报告基因的检测 | 第43-47页 |
| 2.2.7.1 荧光显微镜观察 pcDNA3.1-eGFP/TCTP 在对虾类淋巴组织原代培养细胞中的表达 | 第43页 |
| 2.2.7.2 PCR 检测 pcDNA3.1-eGFP/TCTP 在对虾类淋巴原代培养细胞中导入及表达 | 第43-47页 |
| 3. 实验结果 | 第47-56页 |
| 3.1 凡纳滨对虾翻译控制肿瘤蛋白（Lv-TCTP）基因的克隆及其序列分析 | 第47-48页 |
| 3.2 去终止密码子的加强型绿色荧光蛋白（eGFP）基因片段克隆及其序列分析 | 第48-50页 |
| 3.3 融合蛋白表达载体 pcDNA3.1-eGFP/TCTP 的构建及其测序验证 | 第50-52页 |
| 3.4 荧光显微镜观察 pcDNA3.1-eGFP/TCTP 在 Plat-GP 细胞中的表达 | 第52-53页 |
| 3.5 pcDNA3.1-eGFP/TCTP 质粒在对虾类淋巴组织原代培养细胞中的表达 | 第53-54页 |
| 3.6 PCR 检测 pcDNA3.1-eGFP/TCTP 在对虾类淋巴组织原代培养细胞中的导入与转录表达 | 第54-56页 |
| 4.讨论 | 第56-57页 |
| 第三章 凡纳滨对虾 TCTP 基因启动子的克隆及其在对虾原代培养细胞中的表达活性研究 | 第57-78页 |
| 1. 前言 | 第57-58页 |
| 2. 材料与方法 | 第58-67页 |
| 2.1 实验材料 | 第58-61页 |
| 2.1.1 实验用虾 | 第58页 |
| 2.1.2 质粒及 Plat-GP 细胞系 | 第58页 |
| 2.1.3 实验仪器设备 | 第58-59页 |
| 2.1.4 实验药品 | 第59-60页 |
| 2.1.5 实验试剂及其配制方法 | 第60-61页 |
| 2.2 实验方法 | 第61-67页 |
| 2.2.1 凡纳滨对虾 TCTP 基因启动子的克隆 | 第61-62页 |
| 2.2.2 eGFP/TCTP 融合蛋白编码序列的克隆 | 第62-64页 |
| 2.2.3 融合蛋白表达载体 pcDNA3.1-Ptctp-eGFP/TCTP 的构建 | 第64-66页 |
| 2.2.4 凡纳滨对虾类淋巴组织原代培养细胞的培养方法 | 第66页 |
| 2.2.5 pcDNA3.1-Ptctp-eGFP/TCTP 质粒在对虾原代培养细胞中的表达 | 第66页 |
| 2.2.6 荧光报告基因的检测 | 第66-67页 |
| 2.2.6.1 荧光显微镜观察 pcDNA3.1-Ptctp-eGFP/TCTP 在 Plat-GP及对虾类淋巴组织原代培养细胞中的表达 | 第66页 |
| 2.2.6.2 PCR 检测 pcDNA3.1-Ptctp-eGFP/TCTP 在对虾类淋巴原代培养细胞中导入及表达 | 第66-67页 |
| 3. 结果 | 第67-77页 |
| 3.1 凡纳滨对虾 TCTP 基因启动子的克隆及其序列分析 | 第67-68页 |
| 3.2 eGFP/TCTP 融合蛋白编码区序列的克隆及其序列分析 | 第68-71页 |
| 3.3 融合蛋白表达载体 pcDNA3.1-Ptctp-eGFP/TCTP 的构建及其序列分析 | 第71-73页 |
| 3.4 pcDNA3.1-Ptctp-eGFP/TCTP 质粒在对虾类淋巴组织原代培养细胞中的导入及表达 | 第73-77页 |
| 4. 讨论 | 第77-78页 |
| 第四章 对虾原代培养细胞的永生性转化研究 | 第78-89页 |
| 1. 前言 | 第78页 |
| 2. 材料与方法 | 第78-83页 |
| 2.1 实验材料 | 第78-81页 |
| 2.1.1 实验用虾 | 第78-79页 |
| 2.1.2 质粒 | 第79页 |
| 2.1.3 实验仪器设备 | 第79-80页 |
| 2.1.4 实验药品 | 第80-81页 |
| 2.1.5 实验试剂及其配制方法 | 第81页 |
| 2.2 实验方法 | 第81-83页 |
| 2.2.1 真核表达载体 pcDNA3.1-Ptctp-TCTP 质粒的构建 | 第81-82页 |
| 2.2.2 凡纳滨对虾类淋巴组织原代培养细胞的培养方法 | 第82页 |
| 2.2.3 pcDNA3.1-Ptctp-TCTP、pcDNA3.1-Ptctp-eGFP/TCTP 在对虾类淋巴组织原代培养细胞中过表达及对细胞永生性转化的影响 | 第82-83页 |
| 3. 实验结果 | 第83-87页 |
| 3.1 真核表达载体 pcDNA3.1-Ptctp-TCTP 质粒的构建及其序列验证 | 第83-85页 |
| 3.2 eGFP/TCTP 融合蛋白及 TCTP 在对虾类淋巴组织原代培养细胞永生性转化中的作用 | 第85-87页 |
| 4. 讨论 | 第87-89页 |
| 总结 | 第89-90页 |
| 参考文献 | 第90-96页 |
| 致谢 | 第96-97页 |
| 个人简历 | 第97-98页 |
