| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-18页 |
| 1.1 有机磷类农药残留分析研究进展 | 第10-13页 |
| 1.1.1 有机磷杀虫剂的简介 | 第10页 |
| 1.1.2 有机磷农药残留分析现状 | 第10页 |
| 1.1.3 农药残留的检测方法 | 第10-13页 |
| 1.2 抗体制备技术的现状 | 第13-14页 |
| 1.2.1 多克隆抗体制备技术 | 第13页 |
| 1.2.2 单克隆抗体制备技术 | 第13-14页 |
| 1.2.3 基因重组抗体制备技术 | 第14页 |
| 1.3 重组抗体的筛选技术 | 第14-15页 |
| 1.4 噬菌体展示技术及其应用 | 第15-18页 |
| 1.4.1 噬菌体展示系统简介 | 第15页 |
| 1.4.2 噬菌体展示系统 | 第15-17页 |
| 1.4.3 噬菌体展示技术的应用 | 第17-18页 |
| 第二章 材料和方法 | 第18-27页 |
| 2.1 试验材料 | 第18-19页 |
| 2.1.1 主要试剂和材料 | 第18页 |
| 2.1.2 主要仪器设备 | 第18页 |
| 2.1.3 溶液系统 | 第18-19页 |
| 2.2 研究方法 | 第19-25页 |
| 2.2.1 辅助噬菌体 M13KO7 的制备 | 第19-20页 |
| 2.2.2 阳性 ScFv 抗体的筛选及可溶性表达 | 第20-24页 |
| 2.2.3 抗体的纯化及鉴定 | 第24-25页 |
| 2.3 抗体效价的测定 | 第25页 |
| 2.4 ELISA 条件的初步优化 | 第25-27页 |
| 2.4.1 抗原、抗体最佳工作浓度的测定 | 第25页 |
| 2.4.2 抗原包被时间及包被温度的确定 | 第25-26页 |
| 2.4.3 抗体亲和性及灵敏度检测 | 第26页 |
| 2.4.4 半抗原的标准抑制曲线 | 第26页 |
| 2.4.5 交叉反应测定 | 第26-27页 |
| 第三章 结果与分析 | 第27-36页 |
| 3.1 阳性单克隆的筛选及可溶性表达结果 | 第27-31页 |
| 3.1.1 阳性单克隆的 ELISA 鉴定 | 第27-28页 |
| 3.1.2 菌液 PCR 结果及分析 | 第28-29页 |
| 3.1.3 阳性菌质粒酶切验证 | 第29页 |
| 3.1.4 阳性克隆 ScFv 基因测序 | 第29-30页 |
| 3.1.5 不同组分 ELSIA 结果 | 第30-31页 |
| 3.2 抗体的纯化及鉴定 | 第31-32页 |
| 3.2.1 SDS-PAGE 电泳定性分析 | 第31-32页 |
| 3.2.2 Western blot 鉴定分析 | 第32页 |
| 3.3 抗体效价的测定 | 第32-33页 |
| 3.4 ELISA 条件初步优化结果 | 第33-36页 |
| 3.4.1 抗原、抗体最佳工作浓度的确定 | 第33页 |
| 3.4.2 抗原包被时间及包被温度的确定 | 第33-34页 |
| 3.4.3 亲和性测定 | 第34页 |
| 3.4.4 半抗原的标准抑制曲线 | 第34页 |
| 3.4.5 交叉反应测定 | 第34-36页 |
| 第四章 讨论 | 第36-40页 |
| 4.1 阳性 SCFV 抗体的筛选 | 第36-37页 |
| 4.2 可溶性抗体的表达和鉴定 | 第37-38页 |
| 4.3 抗体的鉴定 | 第38页 |
| 4.4 ELISA 方法 | 第38页 |
| 4.5 SCFV 的特异性 | 第38-40页 |
| 结论 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-45页 |
| 附录 | 第45-48页 |
| 附录 1 间接竞争 ELISA | 第45-46页 |
| 附录 2 培养基配方 | 第46-47页 |
| 附录 3 各种溶液配制方法 | 第47-48页 |
| 缩略词 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 作者简介 | 第50页 |