摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
英文缩略词 | 第12-13页 |
1 前言 | 第13-20页 |
1.1 胃癌耐药与化合物 | 第13页 |
1.2 PI3K/Akt信号通路及其与肿瘤耐药的关系 | 第13-15页 |
1.3 细胞自噬及其与肿瘤耐药的关系 | 第15-17页 |
1.4 肿瘤转移与EMT | 第17-18页 |
1.5 实验课题研究意义 | 第18-20页 |
2 Jaridon6通过PI3K/Akt通路诱导MGC803/5-Fu细胞凋亡 | 第20-45页 |
2.1 引言 | 第20页 |
2.2 实验材料 | 第20-27页 |
2.2.1 实验用细胞株 | 第20-21页 |
2.2.2 实验仪器 | 第21-22页 |
2.2.3 实验试剂 | 第22-24页 |
2.2.4 细胞培养、冻存试剂的配制 | 第24页 |
2.2.5 Westernblot相关试剂的配制 | 第24-26页 |
2.2.6 其它溶液 | 第26-27页 |
2.3 实验方法 | 第27-36页 |
2.3.1 细胞培养与细胞计数 | 第27-28页 |
2.3.2 MTT法测定化合物Jaridon6的抗肿瘤活性 | 第28-29页 |
2.3.3 细胞平板克隆形成实验 | 第29-30页 |
2.3.4 明场和暗场观察细胞和细胞核形态的变化 | 第30-31页 |
2.3.5 AnnexinV/PI双染色法检测细胞凋亡率 | 第31页 |
2.3.6 细胞周期分布情况的检测 | 第31-32页 |
2.3.7 Westernblot检测Akt通路相关蛋白表达量 | 第32-36页 |
2.3.8 统计学方法 | 第36页 |
2.4 实验结果 | 第36-42页 |
2.4.1 Jaridon6对胃癌耐药株MGC803/5-Fu有良好的抗肿瘤作用 | 第36-37页 |
2.4.2 Jaridon6能够抑制MGC803/5-Fu细胞集落的形成 | 第37-38页 |
2.4.3 明场和暗场观察MGC803/5-Fu细胞和细胞核形态变化 | 第38-39页 |
2.4.4 Jaridon6促进耐药细胞MGC803/5-Fu的凋亡 | 第39-40页 |
2.4.5 Jaridon6将细胞MGC803/5-Fu阻滞在G0/G1期 | 第40-41页 |
2.4.6 Jaridon6通过PI3K/Akt通路诱导MGC803/5-Fu细胞的凋亡 | 第41-42页 |
2.5 讨论 | 第42-44页 |
2.6 实验小结 | 第44-45页 |
3 Jaridon6促进MGC803/5-Fu细胞自噬的发生 | 第45-54页 |
3.1 引言 | 第45页 |
3.2 实验材料 | 第45-46页 |
3.3 实验方法 | 第46-48页 |
3.3.1 细胞培养 | 第46页 |
3.3.2 免疫荧光技术 | 第46-47页 |
3.3.3 透射电镜观察细胞自噬的超微结构 | 第47页 |
3.3.4 Westernblot检测LC3B-Ⅱ和p62蛋白的表达量 | 第47-48页 |
3.4 实验结果 | 第48-51页 |
3.4.1 免疫荧光技术观察Jaridon6作用后LC3B在MGC803/5-Fu细胞中的定位 | 第48-49页 |
3.4.2 细胞自噬体与自噬溶酶体的超微结构 | 第49-50页 |
3.4.3 Jaridon6在蛋白水平促进MGC803/5-Fu发生细胞自噬 | 第50-51页 |
3.5 讨论 | 第51-53页 |
3.6 实验小结 | 第53-54页 |
4 Jaridon6抑制耐药细胞MGC803/5-Fu的转移 | 第54-63页 |
4.1 引言 | 第54页 |
4.2 实验仪器与试剂 | 第54-55页 |
4.3 实验方法 | 第55-57页 |
4.3.1 细胞划痕实验 | 第55页 |
4.3.2 细胞Transwell实验 | 第55-56页 |
4.3.3 Westernblot检测EMT相关蛋白表达量 | 第56-57页 |
4.4 实验结果 | 第57-61页 |
4.4.1 Jaridon6能够抑制MGC803/5-Fu细胞的迁移 | 第57-59页 |
4.4.2 Jaridon6可以抑制MGC803/5-Fu细胞的EMT进程 | 第59-61页 |
4.5 讨论 | 第61-62页 |
4.6 实验小结 | 第62-63页 |
5 结论 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-71页 |
个人简介、发表论文、荣誉 | 第71-72页 |
致谢 | 第72页 |