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冬凌草中新型二萜Jaridon 6对胃癌耐药细胞MGC803/5-Fu的抗肿瘤机制研究

摘要第4-6页
Abstract第6-8页
英文缩略词第12-13页
1 前言第13-20页
    1.1 胃癌耐药与化合物第13页
    1.2 PI3K/Akt信号通路及其与肿瘤耐药的关系第13-15页
    1.3 细胞自噬及其与肿瘤耐药的关系第15-17页
    1.4 肿瘤转移与EMT第17-18页
    1.5 实验课题研究意义第18-20页
2 Jaridon6通过PI3K/Akt通路诱导MGC803/5-Fu细胞凋亡第20-45页
    2.1 引言第20页
    2.2 实验材料第20-27页
        2.2.1 实验用细胞株第20-21页
        2.2.2 实验仪器第21-22页
        2.2.3 实验试剂第22-24页
        2.2.4 细胞培养、冻存试剂的配制第24页
        2.2.5 Westernblot相关试剂的配制第24-26页
        2.2.6 其它溶液第26-27页
    2.3 实验方法第27-36页
        2.3.1 细胞培养与细胞计数第27-28页
        2.3.2 MTT法测定化合物Jaridon6的抗肿瘤活性第28-29页
        2.3.3 细胞平板克隆形成实验第29-30页
        2.3.4 明场和暗场观察细胞和细胞核形态的变化第30-31页
        2.3.5 AnnexinV/PI双染色法检测细胞凋亡率第31页
        2.3.6 细胞周期分布情况的检测第31-32页
        2.3.7 Westernblot检测Akt通路相关蛋白表达量第32-36页
        2.3.8 统计学方法第36页
    2.4 实验结果第36-42页
        2.4.1 Jaridon6对胃癌耐药株MGC803/5-Fu有良好的抗肿瘤作用第36-37页
        2.4.2 Jaridon6能够抑制MGC803/5-Fu细胞集落的形成第37-38页
        2.4.3 明场和暗场观察MGC803/5-Fu细胞和细胞核形态变化第38-39页
        2.4.4 Jaridon6促进耐药细胞MGC803/5-Fu的凋亡第39-40页
        2.4.5 Jaridon6将细胞MGC803/5-Fu阻滞在G0/G1期第40-41页
        2.4.6 Jaridon6通过PI3K/Akt通路诱导MGC803/5-Fu细胞的凋亡第41-42页
    2.5 讨论第42-44页
    2.6 实验小结第44-45页
3 Jaridon6促进MGC803/5-Fu细胞自噬的发生第45-54页
    3.1 引言第45页
    3.2 实验材料第45-46页
    3.3 实验方法第46-48页
        3.3.1 细胞培养第46页
        3.3.2 免疫荧光技术第46-47页
        3.3.3 透射电镜观察细胞自噬的超微结构第47页
        3.3.4 Westernblot检测LC3B-Ⅱ和p62蛋白的表达量第47-48页
    3.4 实验结果第48-51页
        3.4.1 免疫荧光技术观察Jaridon6作用后LC3B在MGC803/5-Fu细胞中的定位第48-49页
        3.4.2 细胞自噬体与自噬溶酶体的超微结构第49-50页
        3.4.3 Jaridon6在蛋白水平促进MGC803/5-Fu发生细胞自噬第50-51页
    3.5 讨论第51-53页
    3.6 实验小结第53-54页
4 Jaridon6抑制耐药细胞MGC803/5-Fu的转移第54-63页
    4.1 引言第54页
    4.2 实验仪器与试剂第54-55页
    4.3 实验方法第55-57页
        4.3.1 细胞划痕实验第55页
        4.3.2 细胞Transwell实验第55-56页
        4.3.3 Westernblot检测EMT相关蛋白表达量第56-57页
    4.4 实验结果第57-61页
        4.4.1 Jaridon6能够抑制MGC803/5-Fu细胞的迁移第57-59页
        4.4.2 Jaridon6可以抑制MGC803/5-Fu细胞的EMT进程第59-61页
    4.5 讨论第61-62页
    4.6 实验小结第62-63页
5 结论第63-64页
参考文献第64-71页
个人简介、发表论文、荣誉第71-72页
致谢第72页

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